一种头状链霉菌发酵生产丝裂霉素的新型培养基和培养方法_2

文档序号:9682282阅读:来源:国知局
控制在120r/min; 171h?发酵结束:转速控制在80r/min;
[0065] c压力控制:罐压0.05?0.06MPa;
[0066]d pH控制:发酵过程中pH控制在6?7;
[0067] e 空气流量:0 ?60h: 150m3/h; 61 ?170h: 250m3/h; 171h?发酵结束:100m3/h;
[0068] f溶氧控制:
[〇〇69]发酵前60h内,不控制溶氧;
[〇〇7〇] 61?170h,溶氧控制在30%以上;
[〇〇71] 171?发酵结束:溶氧控制在40%以上。
[〇〇72]发酵培养结束,菌体浓度35%、还原糖1.8g/L、氨基氮14mg/100ml、化学效价1304u/mL、pH6.1、培养时间 200h。
[〇〇73] 实施例2
[〇〇74]种子培养:种子罐有效体积为lm3。
[〇〇75]种子培养基的组成为:甘露醇5kg、甘蔗糖蜜9kg、麦芽糖6kg、麦芽糖酶0.03kg、蚕蛹粉5kg、玉米浆11L、玉米蛋白粉4kg、硫酸铵4kg、轻质碳酸钙2kg。灭菌后的种子培养基的质量:氨基氮45/100ml、还原糖56g/L、pH: 7.2;
[0076]将种子培养基灭菌并冷却至25?30°C,并用无菌空气保压,然后在火焰保护下,将已经培养好的头状链霉菌母瓶发酵液按照0.6L/V的接种量接入该种子培养基中进行种子培养。
[〇〇77] 种子培养条件为:罐压0.03?0.05MPa;罐温28?29°C;空气流量:0?10h,采用空气搅拌代替机械搅拌;1 lh?移种:35m3/h;搅拌转速72r/min。至菌体浓度36 %、pH6.7、培养时间42h时移种。
[〇〇78]发酵培养:发酵罐有效体积为10m3。
[〇〇79]发酵培养基组成为:甘露醇50kg、甘蔗糖蜜120kg、麦芽糖100kg、麦芽糖酶0.5kg、蚕蛹粉7〇kg、玉米衆160L、玉米蛋白粉60kg、硫酸铵50kg、轻质碳酸|i540kg、磷酸镁3kg、氯化钠4kg、硫酸亚铁0.2kg、聚醚改性硅油0.4L、维生素B6 0.6kg、泛酸0.2kg、氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯6kg。先将发酵培养基灭菌,灭菌后的发酵培养基的质量:氨基氮73mg/100ml、还原糖76g/L、pH:6.7。发酵培养基冷却至20?25°C,并用无菌空气保压,然后将培养好的种子液移入发酵培养基进行发酵培养,移种比例控制在9.5%。
[0080]发酵培养条件为:
[0081 ] a温度:采用变温控制方法,0?60h:培养温度29?30°C;61?170h:培养温度28?29°C; 171?发酵培养结束,培养温度26?27°C。
[〇〇82] b搅拌转速:采用变频搅拌控制方法,0?60h:转速控制在90r/min; 61?170h:转速控制在120r/min; 171h?发酵结束:转速控制在80r/min;
[0083]c压力控制:罐压0.05?0.06MPa;
[0084]d pH控制:发酵过程中pH控制在6?7;
[0085]e 空气流量:0 ?60h: 160m3/h; 61 ?170h: 260m3/h; 171h?发酵结束:110m3/h;
[0086]f溶氧控制:
[〇〇87]发酵前60h内,不控制溶氧;
[0088]61?170h,溶氧控制在30%以上;
[〇〇89] 171?发酵结束:溶氧控制在40%以上。
[〇〇9〇]发酵培养结束,菌体浓度36%、还原糖1.7g/L、氨基氮13mg/100ml、化学效价1326u/mL、pH6.3、培养时间 205h。
[〇〇91] 实施例3
[〇〇92]种子培养:种子罐有效体积为lm3。
[0093]种子培养基的组成为:甘露醇6kg、甘蔗糖蜜10kg、麦芽糖7kg、麦芽糖酶0.04kg、蚕蛹粉6kg、玉米衆12L、玉米蛋白粉5kg、硫酸铵5kg、轻质碳酸|丐31^。灭菌后的种子培养基的质量:氨基氮51/100ml、还原糖61g/L、pH:7.0;
[0094]将种子培养基灭菌并冷却至25?30°C,并用无菌空气保压,然后在火焰保护下,将已经培养好的头状链霉菌母瓶发酵液按照0.7L/V的接种量接入该种子培养基中进行种子培养。
[〇〇95] 种子培养条件为:罐压0.03?0.05MPa;罐温28?29°C;空气流量:0?10h,采用空气搅拌代替机械搅拌;1 lh?移种:40m3/h;搅拌转速75r/min。至菌体浓度37 %、pH6.5、培养时间45h时移种。
[〇〇96]发酵培养:发酵罐有效体积为10m3。
[〇〇97]发酵培养基组成为:甘露醇60kg、甘蔗糖蜜130kg、麦芽糖110kg、麦芽糖酶0.6kg、蚕蛹粉80kg、玉米衆170L、玉米蛋白粉70kg、硫酸铵60kg、轻质碳酸|i550kg、磷酸镁4kg、氯化钠5kg、硫酸亚铁0.3kg、聚醚改性硅油0.5L、维生素B6 0.7kg、泛酸0.3kg、氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯7kg。先将发酵培养基灭菌,灭菌后的发酵培养基的质量:氨基氮75mg/100ml、还原糖82g/L、pH:6.5。发酵培养基冷却至20?25°C,并用无菌空气保压,然后将培养好的种子液移入发酵培养基进行发酵培养,移种比例控制在10 %。
[〇〇98]发酵培养条件为:
[〇〇99] a温度:采用变温控制方法,0?60h:培养温度29?30°C;61?170h:培养温度28?29°C; 171?发酵培养结束,培养温度26?27°C。
[〇1〇〇] b搅拌转速:采用变频搅拌控制方法,0?60h:转速控制在90r/min; 61?170h:转速控制在120r/min; 171h?发酵结束:转速控制在80r/min;
[0101]c压力控制:罐压0.05?0.06MPa;
[0102]d pH控制:发酵过程中pH控制在6?7;
[0103]e 空气流量:0 ?60h: 170m3/h; 61 ?170h: 270m3/h; 171h?发酵结束:120m3/h;
[0104]f溶氧控制:
[0105]发酵前60h内,不控制溶氧;
[0106]61?170h,溶氧控制在30%以上;
[〇1〇7] 171?发酵结束:溶氧控制在40%以上。
[0108]发酵培养结束,菌体浓度37%、还原糖1.5g/L、氨基氮llmg/100ml、化学效价141211/11^4册.5、培养时间21011。
[〇1〇9] 实施例4
[0110]种子培养:种子罐有效体积为lm3。
种子培养基的组成为:甘露醇7kg、甘蔗糖蜜11kg、麦芽糖8kg、麦芽糖酶0.05kg、蚕蛹粉7kg、玉米浆13L、玉米蛋白粉6kg、硫酸铵6kg、轻质碳酸钙4kg。灭菌后的种子培养基的质量:氨基氮54/100ml、还原糖66g/L、pH:6.7;
[0112]将种子培养基灭菌并冷却至25?30°C,并用无菌空气保压,然后在火焰保护下,将已经培养好的头状链霉菌母瓶发酵液按照0.8L/V的接种量接入该种子培养基中进行种子培养。
[0113] 种子培养条件为:罐压0.03?0.05MPa;罐温28?29°C;空气流量:0?10h,采用空气搅拌代替机械搅拌;1 lh?移种:45m3/h;搅拌转速78r/min。至菌体浓度38 %、pH6.3、培养时间47h时移种。
[〇114]发酵培养:发酵罐有效体积为10m3。
[0115]发酵培养基组成为:甘露醇70kg、甘蔗糖蜜140kg、麦芽糖120kg、麦芽糖酶0.7kg、蚕蛹粉90kg、玉米衆180L、玉米蛋白粉80kg、硫酸铵70kg、轻质碳酸|i560kg、磷酸镁5kg、氯化钠6kg、硫酸亚铁0.4kg、聚醚改性硅油0.6L、维生素B6 0.8kg、泛酸0.4kg、氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯8kg。先将发酵培养基灭菌,灭菌后的发酵培养基的质量:氨基氮78mg/100ml、还原糖86g/L、pH:6.2。发酵培养基冷却至20?25°C,并用无菌空气保压,然后将培养好的种子液移入发酵培养基进行发酵培养,移种比例控制在10.5%。
[0116]发酵培养条件为:
[0117] a温度:采用变温控制方法,0?60h:培养温度29?30°C;61?170h:培养温度28?29°C; 171?发酵培养结束,培养温度26?27°C。
[0118] b搅拌转速:采用变频搅拌控制方法,0?60h:转速控制在90r/min; 61?170h:转速控制在120r/min; 171h?发酵结束:转速控制在80r/min;
[0119] c压力控制:罐压0.05?0.06MPa;
[0120]d pH控制:发酵过程中pH控制在6?7;
[0121 ] e 空气流量:0 ?60h: 180m3/h; 61 ?170h: 280m3/h; 171h?发酵结束:130m3/h;
[0122] f溶氧控制:
[0123]发酵前60h内,不控制溶氧;
[0124] 61?170h,溶氧控制在30%以上;
[0125] 171?发酵结束:溶氧控制在40%以上。
[0126]发酵培养结束,菌体浓度39%、还原糖1.4g/L、氨基氮10mg/100ml、化学效价1384u/mL、pH6.3、培养时间 215h。
[0127]实施例5
[0128]种子培养:种子罐有效体积为lm3。
[0129]种子培养基的组成为:甘露醇8kg、甘蔗糖蜜12kg、麦芽糖9kg、麦芽糖酶0.06kg、蚕蛹粉8kg、玉米浆14L、玉米蛋白粉7kg、硫酸铵7kg、轻质碳酸钙5kg。灭菌后的种子培养基的质量:氨基氮 59mg/100ml、还原糖 70g/L、pH:6.5。
[0130]将种子培养基灭菌并冷却至25?30°C,并用无菌空气保压,然后在火焰保护下,将已经培养好的头状链霉菌母瓶发酵液按照0.9L/V的接种量接入该种子培养基中进行种子培养。
[0131]种子培养条件为:罐压0.03?0.05MPa;罐温28?29
当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1