一种粘稠液状标本的处理方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及生化技术领域，尤其涉及一种粘稠液状标本的处理方法。
【背景技术】
[0002]临床检验中，经常碰到浓痰、脓水、胸水、胃液、气管液、咽部粘液、引导尿道分泌液等粘稠标本，这些标本一般需要初期处理后再进行微生物培养、生化检查、免疫检查等检验分析，而粘稠标本不易涂抹或涂抹不均匀，容易导致遗漏病原微生物培养，随着生化诊断技术、免疫诊断技术的发展以及以PCR技术为主要手段的分子诊断技术逐渐成为临床诊断中不可或缺的手段，对粘稠标本的处理要求更高。而体液标本中的蛋白、多糖等污染物容易干扰生物酶的活性、或过于粘稠影响生化免疫诊断技术的灵敏度以及特意度。
[0003]目前处理粘稠标本技术主要有煮沸法、氢氧化钠处理法、N-乙酰左旋半胱氨酸-氢氧化钠(NALC-NaOH)法、胰蛋白酶消化法等，但是这些方法或影响标本中的蛋白等待检物质的结构、或影响核酸提取效率，影响诊断试剂的灵敏度;或改变待检标本的物化特点，影响特异性，粘稠液状标本主要的粘稠成分为多糖、糖蛋白、以及免疫细胞、坏死组织、脂肪等多种成分为主，而且标本来源不同，其成分也不尽相同。如浓痰主要粘稠物质为气管上皮细胞分泌的糖蛋白MUC5AC、MUC5B等，浓痰还参杂少量血液和食物残渣等，导致标本之间的粘稠度不相同。
[0004]这些杂质不仅阻碍核酸增幅反应，也严重干扰了核酸提取和精制。粘稠标本还影响免疫法检验，如ELISA检验中标本中的抗原或抗体和试剂中的抗体抗原不能充分接触反应，金标法检验中标本不容易通过毛细管现象流向金标抗体一侧。在生化检验中粘稠标本容易导致毛细吸管堵塞，不仅影响诊断精度，还影响机器管理。为了解决这些问题，亟需一种针对粘稠液体标本的处理方法。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种粘稠液状标本的处理方法，从而解决现有技术中存在的前述问题。
[0006]为了实现上述目的，本发明所述粘稠液状标本的处理方法，该方法包括:将粘稠液体标本加入到预先制备的处理剂中，所述粘稠液体标本与所述预先制备的处理剂等体积，并做重复，作为实验组;按照所述粘稠液体标本被检测的类型对实验组进行处理，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0007]优选地，所述预先制备的处理剂包括处理剂A、处理剂B和处理剂C;
[0008]IL所述处理剂A包括:0.135g?0.405g的磷酸二氢钾、0.71g?2.13g的磷酸氢二钠、4g?12g的氯化钠、0.Ig?0.3g的氯化钾、2.5mL?7.5mL的吐温20和12.5g?37.5g的生物酶，所述处理剂A的pH为6.5?7.5 ；
[0009]IL所述处理剂B包括:0.135g?0.405g的磷酸二氢钾、0.71g?2.13g的磷酸氢二钠、4g?12g的氯化钠、0.1g?0.3g的氯化钾、5mL?15ml的十二烧基硫酸钠和5g?15g的二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5?7.5;
[0010]IL所述处理剂C包括:108g的脲和20g的二硫苏糖醇，所述处理剂C的pH为6.5?
7.5。
[0011 ]更优选地，所述生物酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶和脱氧核糖核酸酶中的一种或几种的任意配比。
[00?2]更优选地，所述生物酶包括:1Og的胰蛋白酶、1g糜蛋白酶和5g脱氧核糖核酸酶。
[0013]更优选地，当所述处理剂为处理剂A或处理剂B时，将实验组在36°C?37.5°C的条件下震荡0.8h?1.2h，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0014]更优选地，当所述处理剂为处理剂C时，将实验组在温度为95°C的条件下加热30min?60min后，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0015]更优选地，IL所述处理剂A包括:0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、Sg的氯化钠、0.2g的氯化钾、5mL的吐温20和25g的生物酶，所述处理剂A的pH为6.5?7.5。
[0016]更优选地，IL所述处理剂B包括:0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、Sg的氯化钠、0.2g的氯化钾、1ml的十二烷基硫酸钠和1g的二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5?7.5。
[0017]本发明的有益效果是:
[0018]本发明在标本中添加胰蛋白酶以及表面活性剂、以及还原剂，可以显著缩短标本液化时间，减少标本粘稠度，并且不影响诊断精度，并以此为基础发明了针对粘稠液状标本的处理剂以及处理方法，该处理剂以微生物培养用为主要用途的处理剂A，以生化免疫诊断为主要用途的处理剂B以及分子诊断为用途的处理剂C以满足各种临床需求，该添加剂可以预装到标本收集容器，实现单一容器处理，方便标本处理，减少操作程序，最大限度的避免生物污染。该处理方法应该针对诊断目的灵活应用，同时不影响医疗成本。
【具体实施方式】
[0019]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的【具体实施方式】仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0020]实施例1
[0021]将粘稠液状标本处理成微生物培养用的处理液的方法:取合格临床痰液标本20份，每份分别设置对照组和实验组，具体为:取体积为X mL的粘稠液体标本I加入到X mL预先制备的处理剂A中，做重复，作为实验组;取体积为X mL的粘稠液体标本I加入到X mL生理盐水中，做重复，作为对照组;将对照组和实验组在36°C?37.5°C的条件下震荡0.8?1.2h，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0022]IL所述处理剂A包括:0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、Sg的氯化钠、0.2g的氯化钾、5mL的吐温20和25g的生物酶，所述处理剂A的pH为6.5?7.5;所述生物酶包括:1g的胰蛋白酶、1g糜蛋白酶和5g脱氧核糖核酸酶。
[0023]能够明显获取:实验组粘稠度较对照组明显降低，按常规方法接种到血平板，观察菌落数，实验组菌落数较对照组多，之后肉眼观察可疑菌落，挑取菌落进行细菌菌种鉴别，实验组20份粘稠液体标本中13份分离出致病菌，对照组20份粘稠液体标本中5份分离出致病菌，添加处理剂A后明显降低了粘稠度，涂抹更为均匀，致病菌分离率明显升高。
[0024]处理剂A:主要用于微生物培养用粘稠液体标本处理，与既往标本处理剂相比，该处理剂可以完全液化粘稠标本，该处理剂中的无机盐成分作为缓冲剂保护生物酶的活性，维持微生物的生理活性，吐温20作为非离子表面活性剂，减少农稠度，使生物酶充分与标本混合，提高生物酶的作用，而生物酶分解黏蛋白和宿主DNA等导致粘稠的杂质，降低标本的粘稠度，为微生物涂抹培养创造有利条件。
[0025]实施例2
[0026]本实施例与实施例1的区别在于:IL所述处理剂A包括:0.135g磷酸二氢钾、0.7Ig磷酸氢二钠、4g氯化钠、0.1g氯化钾、2.5mL吐温20和12.5g生物酶，所述处理剂A的pH为7.0。
[0027]实施例3
[0028]本实施例与实施例1的区别在于:IL所述处理剂A包括:0.405g磷酸二氢钾、2.13g磷酸氢二钠、12g氯化钠、0.3g氯化钾、7.5mL吐温20和37.5g生物酶，所述处理剂A的pH为
7.5。
[0029]实施例4
[0030]将粘稠液状标本处理成免疫检测或生化学诊断所用的处理液的方法:取合格临床痰液标本38份，每份分别设置对照组和实验组，具体为:取体积为Y mL的粘稠液体标本I加入到Y mL预先制备的处理剂A中，做重复，作为实验组;取体积为Y mL的粘稠液体标本I加入至IjY mL生理盐水中，做重复，作为对照组;将对照