组和实验组在36°C?37.5°C的条件下震荡
0.8?1.2h，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0031]IL所述处理剂B包括:0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、Sg的氯化钠、0.2g的氯化钾、1ml的十二烷基硫酸钠和1g的二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5?7.5。
[0032]处理剂B:主要用于免疫检测和生化学诊断所用的粘稠液体标本处理，与既往标本处理剂相比，该处理剂不但能够完全液化标本，使标本容易流动，该处理剂中的无机盐成分作为缓冲剂保护和稳定标本中的抗原抗体等蛋白质，SDS作为离散剂分散蛋白等大分子物质以减少粘稠度，并协作加强DTT的降低DNA 二聚体作用以及蛋白质之间的二硫键还原作用，减少标本的粘稠度，增加蛋白质之间的相互作用，提高免疫诊断试剂的敏感度和特意度，提高标本的生化检验效率。
[0033]能够明显获取:实验组粘稠度较对照组明显降低，分别取10uL粘稠液状标本处理液和对照组的处理液，分别滴加到痰液结核抗原金标免疫诊断试剂标本孔，实验组流速明显比对照组快，实验组全部显示阳性，阳性线清晰，质控线清晰，显示阳性时间较对照组提前2?3分钟，对照组有3个标本显示阴性，显示阳性时间较实验组慢2?3分钟，经过处理剂B处理的标本阳性率检测时间明显比对照组提高。
[0034]实施例5
[0035]本实施例与实施例4的区别在于:IL所述处理剂B包括:0.135g磷酸二氢钾、0.71g磷酸氢二钠、4g氯化钠、0.1g氯化钾、5ml十二烷基硫酸钠和5g二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5。
[0036]实施例6
[0037]本实施例与实施例4的区别在于:IL所述处理剂B包括:0.405g磷酸二氢钾、2.13g磷酸氢二钠、12g氯化钠、0.3g氯化钾、15ml十二烷基硫酸钠和15g 二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为7.5。
[0038]实施例7
[0039]将粘稠液状标本处理成分子诊断用的处理液的方法:取合格临床痰液标本100份，每份分别设置对照组和实验组，具体为:取体积为Z mL的粘稠液体标本I加入到Z mL预先制备的处理剂A中，做重复，作为实验组;取体积为Z mL的粘稠液体标本I加入到Z mL生理盐水中，做重复，作为对照组;将对照组和实验组将对照组和实验组在温度为95°C的条件下加热30min后，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。
[0040]IL所述处理剂C包括:108g的脲和20g的二硫苏糖醇，所述处理剂C的pH为6.5?
7.5。
[0041]处理剂C:主要用于分子诊断试剂，与既往标本处理剂相比，该处理剂液化标本完全，容易提取核酸，同时蛋白变性活性高，减小蛋白等杂质对核酸增幅反应的干扰，处理剂中的脲不仅起着分散剂作用，同时可以使蛋白质变性，还可以起到表面活性剂作用，破坏微生物等细胞膜，还促进DTT的二硫键还原作用，极大的减少标本的粘稠度，DTT经加热可以更加彻底的破坏细胞膜，促进细胞内核酸的放出，阻碍核酸形成二聚体，有利于提高PCR等分子诊断手段的效率。
[0042]将对照组和实验组得到的粘稠液状标本处理液常规核酸提取方法提取核酸，设计分枝杆菌特异性引物，进行PCR反应，能够明显获取:实验组97份阳性，3份1+标本呈现阴性，2+以上标本全部呈现阳性，对照组69份PCR阳性，31份PCR阴性，38份1+标本中17份阳性，21份呈现阴性，2+以上标本62份PCR阳性54份，阴性10份，实验组阳性率明显提高。
[0043]通过采用本发明公开的上述技术方案，得到了如下有益的效果:本发明在标本中添加胰蛋白酶以及表面活性剂、以及还原剂，可以显著缩短标本液化时间，减少标本粘稠度，并且不影响诊断精度，并以此为基础发明了针对粘稠液状标本的处理剂以及处理方法，该处理剂以微生物培养用为主要用途的处理剂A，以生化免疫诊断为主要用途的处理剂B以及分子诊断为用途的处理剂C以满足各种临床需求，该添加剂可以预装到标本收集容器，实现单一容器处理，方便标本处理，减少操作程序，最大限度的避免生物污染。该处理方法应该针对诊断目的灵活应用，同时不影响医疗成本。
[0044]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，该方法包括: 将粘稠液体标本加入到预先制备的处理剂中，所述粘稠液体标本与所述预先制备的处理剂等体积，并做重复，作为实验组;按照所述粘稠液体标本被检测的类型对实验组进行处理，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。2.根据权利要求1所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，所述预先制备的处理剂包括处理剂A、处理剂B和处理剂C; IL所述处理剂A包括:0.135g?0.405g的磷酸二氢钾、0.71g?2.13g的磷酸氢二钠、4g?12g的氯化钠、0.18?0.38的氯化钾、2.5!^?7.511^的吐温20和12.58?37.58的生物酶，所述处理剂A的pH为6.5?7.5 ； IL所述处理剂B包括:0.135g?0.405g的磷酸二氢钾、0.71g?2.13g的磷酸氢二钠、4g?12g的氯化钠、0.1g?0.3g的氯化钾、5mL?15ml的十二烧基硫酸钠和5g?15g的二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5?7.5 ； IL所述处理剂C包括:108g的脲和20g的二硫苏糖醇，所述处理剂C的pH为6.5?7.5。3.根据权利要求2所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，所述生物酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶和脱氧核糖核酸酶中的一种或几种的任意配比。4.根据权利要求3所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，所述生物酶包括:1g的胰蛋白酶、1g糜蛋白酶和5g脱氧核糖核酸酶。5.根据权利要求2所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，当所述处理剂为处理剂A或处理剂B时，将实验组在36°C?37.5°C的条件下震荡0.8h?1.2h，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。6.根据权利要求2所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，当所述处理剂为处理剂C时，将实验组在温度为95°C的条件下加热30min?60min后，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。7.根据权利要求2所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于， IL所述处理剂A包括:0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、8g的氯化钠、0.2g的氯化钾、5mL的吐温20和25g的生物酶，所述处理剂A的pH为6.5?7.5。8.根据权利要求2所述粘稠液状标本的处理方法，其特征在于，IL所述处理剂B包括:.0.27g的磷酸二氢钾、1.42g的磷酸氢二钠、8g的氯化钠、0.2g的氯化钾、1ml的十二烷基硫酸钠和1g的二硫苏糖醇，所述处理剂B的pH为6.5?7.5。
【专利摘要】本发明公开了一种粘稠液状标本的处理方法，涉及生化技术领域。该方法：将粘稠液体标本加入到预先制备的处理剂中，所述粘稠液体标本与所述预先制备的处理剂等体积，并做重复，作为实验组；按照所述粘稠液体标本被检测的类型对实验组进行处理，得到粘稠液状标本处理液，完成对粘稠液状标本的处理。本发明显著缩短标本液化时间，减少标本粘稠度且不影响诊断精度，可针对诊断目的灵活应用，同时不影响医疗成本。
【IPC分类】G01N1/28, C12Q1/68, C12Q1/04
【公开号】CN105506085
【申请号】CN201511001467
【发明人】朱克先, 马国富, 陈政, 刘剑峰, 乔建秀
【申请人】北京澳利文生物科技有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月28日