脂质代谢型肥胖基因个体化干预组合物及制备方法和系统的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种肥胖基因个体化干预的组合物，尤其设及一种脂质代谢型肥胖基 因个体化干预配合物的制备方法及其系统。
【背景技术】
[0002] 肥胖作为一种疾病，正严重威胁人类的健康。世界卫生组织专家委员会提出W体 质指数(Body-MassIndex，BMI)作为身体超重或肥胖的标准，即BMI在25~28之间为超重，28~ 32为肥胖，高于32为非常肥胖。肥胖症是一种与遗传因素及生活方式密切相关的慢性疾病， 它会引发血脂升高，容易造成脂肪肝、动脉血管病变、屯、脏病、糖尿病，肥胖的儿童还会引发 性功能发育不良并导致成人期各种疾病发病率和死亡率上升。
[0003] 目前肥胖症的临床治疗方法主要是饮食和运动疗法，但存在着碳水化合物、脂肪 W及蛋白质摄入量控制"一刀切"和盲目采用减肥药物的非个体化治疗方式。由于至少有 40%躯体脂肪量的差异是由遗传因素引起的，所W遗传对肥胖有很大影响。遗传体质不同的 人在患肥胖症时应采取不同的减肥策略，利用现代科学研究成果，开发一项基于分子遗传 基础的体重管理分子检测产品并制备相应的减肥食品W提供个性化的体重管理建议，具有 较强的社会意义和市场前景。经国内外文献研究证实，与肥胖相关的基因多态性主要有 ABCA1 rs2230806、P0Nlrs662、LPL rs320、LPL rs285、PPARG rsl801282、ADRB3 rs4994等。
[0004] ATP结合盒转运体A1 (ATP binding cassette hansporter A1，ABCA1)是一类膜 蛋白，通过消耗ATP介导蛋白质、胆固醇、憐脂等多种脂质和类脂质分子的跨膜转运。ABCAl 能够促进细胞内游离胆固醇和憐脂的流出，在胆固醇逆转运(RCT)和皿L生成中起重要作 用，被称作RCT守口人。ABCA1功能障碍将导致大量的胆固醇沉积，继而浸润血管壁，促进冠 屯、病的发生发展。该基因 rs2230806多态化/A)引起Arg/ Lys氨基酸改变，K多态可提高血浆 高密度脂蛋白含量，理论上对屯、脑血管具有保护作用。国内外的关联分析均表明ABCA1的 Lys多态对于个体饮食干预的效果不同。如来自2004年加拿大Nunavik省的健康调查，食物 评价W标准FFQ问卷进行。共调查了 677户，1056人。结果发现，对于相同的饱和脂肪酸摄入， ABCA1 A巧21化ys CC纯合子个体的血清低密度脂蛋白水平显著高于非携带者(p<0.05)，其 血清低密度脂蛋白与饱和脂肪酸的摄入存在正相关关系。而在CT基因型个体和TT基因型个 体中，则不存在相关性。研究表明，控制饱和脂肪酸的摄入对ABCA1 Arg219Lys CC基因型个 体预防高脂血症和屯、血管疾病更为重要。
[000引P0N1是一类巧离子依赖性高密度脂蛋白（HDL)的脂酶，在脂类代谢中具有重要的 抗氧化活性，通过水解脂质过氧化物及多种有机憐化物，保护低密度脂蛋白（LDL)免受氧化 修饰，减少氧化型脂质积聚，减轻动脉粥样病变。基因多态性不仅与动脉粥样硬化、糖尿病 等疾病相关，而且也影响个体饮食对于身体的干预效果。Canales A等人在2011年探索了核 桃浆浓缩肉的摄入与P0N1 rs662人群多态性的影响，结果显示，rs662 AG和GG基因型的屯、 血管风险高危人群对该类饮食降血脂、抗粥样硬化的效果更为明显。
[0006] L化基因编码脂蛋白脂酶，该酶在屯、脏、肌肉和脂肪组织中进行表达。L化W同型二 聚体蛋白的形式行使功能，其分子生物学的作用包括两部分，一部分为甘油Ξ醋的水解酶 作用，另一部分则是受体介导的脂蛋白内吞作用的桥梁。LPL蛋白上的位点突变在严重的情 况下可W导致I型高脂蛋白血症，而较轻程度上则引起体内脂蛋白代谢的素乱。脂蛋白脂酶 是催化与蛋白质相联的甘油Ξ醋水解作用的酶。它位于毛细管内皮的腔面，在甘油Ξ醋代 谢中起着关键的作用。它可将血液中的乳糜微粒和极低密度脂蛋白（VLDL )所携带的甘油 Ξ醋水解成甘油和脂肪酸，W供各种组织胆存和利用。肌体中的脂肪组织和骨胳肌中含有 丰富的脂蛋白脂酶。L化蛋白编码基因位于第8号染色体的8ρ22区段。L化基因全长28.0化， mRNA全长3550bp，具有10个外显子，编码的蛋白含有476个氨基酸。大量的研究证实LI^L基因 多态性会导致不同的减脂效果。如2014年Ma Y等人研究了L化基因的单核巧酸多态性rs320 与膳食脂肪酸在肥胖人群中相互作用。研究发现，rs320 TT基因型的人群中，膳食多不饱和 脂肪酸(PUFA)摄入较多的个体，其BM巧日腰围也较低。而TG和GG基因型中则无此现象。
[0007] PPARs是由英国科学家于1990年首先发现，Lees等通过基因打祀技术证明了 PPARs与过氧化物酶体增殖反应直接相关，其属于Π 型核激素受体超家族。目前已知PPARs 有Ξ种亚型G(丫）dPPARG在成年动物脂肪组织、大肠中表达量较高，肝、屯、、 肾中呈中等量表达，肌肉中仅低度表达，PPARG还在单核/巨隧细胞、泡沫细胞、屯、肌细胞、血 管平滑肌细胞、内皮细胞及动脉粥样硬化病灶中存在表达。PPARG基因位于3号染色体，跨 越至少150bp基因片段，由9个外显子组成(41、42、81-6)。？?41?；2主要分布在脂肪组织。 PPARG2具有多种生物活性，设及对多种祀基因的调节。PPARG2 rsl801282的基因多态性与 动脉中样硬化，肥胖W及减重效果密切相关。2014年Sanne P.Μ等人研究选取150个挪威肥 胖个体(ΒΜΙ of 27-38 kg/m2,39 males, 111 females),用低能量饮食干预8周（2.1 MJ/ day，50克碳水化合物，52克蛋白质，7克脂肪和微量营养素，可添加蔬菜），之后有3个月的观 察期(受试者被要求尽可能的保持新体重），测量其体重状况。观察候选基因 SNP在饮食干预 中的作用。结果表明，PPARG2 rs 1801282在饮食控制短期减重时效果接近，但在体重维持 期，Prol2Pro更容易发生反弹，因此需要持续的饮食控制。
[0008] B3肾上腺素能受体(ADRB3)是交感神经系统的重要组成部分，它主要介导脂肪分 解与热生成作用。该受体激动时局部脂肪分解增加。如果决定ADRB3发生突变，使细胞膜表 面基因表达缺陷，蛋白结构异常，ADRB3功能减低，细胞信号转导受阻，则会影响脂肪组织的 产热和分解，可W导致IR、K1和肥胖等。人类ADRB 3位于染色体Spll.l - pl2,含有2个外显 子和1个内含子，其内含子为1 025 bp，起始端为GTAGdADRB3的190位核巧酸的T被C取代，致 氨基酸序列中64位的色氨酸(化P)被精氨酸(A巧)置换：即化p64A巧。运个变异位于ADRB3的 第1个细胞内环，而该环被认为对细胞表面受体运动及受体偶联于细胞效应器系统的功能 至关重要。在应用ARRB3激动剂时，Arg携带者的脂肪细胞受体敏感性较Trp携带者降低10 倍。2000年Tchernof A等人探索了ADRB3化p64Arg突变对内脏脂肪减少、膜岛素敏感性、 屯、血管风险因素的效应。样本包括24位女性，1 T;rp64Arg homozygote, 10 T;rp64Arg hete;roz;ygotes , and 13 normal homoz;ygotes。使用标准饮食进行体重干预，为期约13个 月。结果显示，Trp64Arg等位基因携带者的体重下降、体脂下降的比例相似，但内脏脂肪的 下降仅仅为非携带者的43%，提示化p64Arg等位基因携带者在降低内脏脂肪时受到阻碍， 需要针对性的加强。2008年De Luis D A等研究样本人群来自西班牙。研究者选取了193位 欲减重的肥胖人±(BMI均>30,排除了患有屯、血管疾病、高血压和糖尿病、代谢性疾病的个 体），其中172人为rs4994野生型?Υρ64/?Υρ64，21人为rs4994突变型?Υρ64/Α^64。随机给 予他们两种饮食干预方案，dietl: 1500kcal/day(53%ca;rbohy化ates, 20% protein and 27% fats), diet2: 1,507 kcal/day (38% carbohydrates, 26% protein and 36% fats)，干预期为2个月。体育锻炼要求每周Ξ次，每次60min左右的中等强度体力活动。结 果显示，两种diet方案中，Trp64/Trp64携带者的体重、体脂含量、腰围、收缩压等都出现了 显著下降；而对于Trp64/A巧64基因型，diet2方案组的体重下降、BMI下降、腰围下降效果明 显优于diet 1组。本研究显示，ADRB3 T巧64/T巧64基因型对减肥干预的反应最好，而T巧64/ Arg64基因型在干预时需要控制碳水化合物的摄入。
[0009] 近来的许多研究都证实了，利用天然食物、植物等及其提取物，可W有助于减肥瘦 身。2015年王震等人探讨荷叶、绞股蓝及紫苏叶提取物制成复方制的预防性减肥降脂作用， 结果显示复方制剂不同剂量均对肥胖症、高血脂症具有良好的预防和治疗的作用，并且剂 量越大效果越好。2014年瑞典学者研究了渡菜提取物对于减肥效果的影响，结果显示多摄 取渡菜能有效降低食欲，有利于减肥，原因是渡菜里的天然化合物类囊体(thylakoid)，可 W让大脑释放让人感到饱腹感的荷尔蒙，从而降低饥饿的不适感，W致于可W有助于减肥。 2012年刘安军等研究了绿茶提取物的降血脂及减肥作用效果的研究，结果表明：绿茶醇提 物和上清液在调节血脂和控制体重方面效果较好，与对照组相比醇提物组TG和体重分别下 降了 37.50 %、11.84 %，上清液组TG和体重分别下降了 35.42 %、7.32%。粗蛋白和粗多糖只 有一定的降血脂效果，与对照组相比TC分别下降了 17.69%和9.52%，U)L-C下降了 56.25% 和42.97%。血清I1L活力，醇提物组显著高于模型组;血清化活力，上清液组显著低于模型 组(？〈0.01)。2012年曾河等研究了苦瓜提取物对减肥作用和可能机制，结果苦瓜提取物能 够在不影响摄食量的基础上抑制体质量增长速度，降低体质量和附睾下脂肪量，升高血清