一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天然药物化学领域，具体涉及到一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法。
【背景技术】
[0002]野漆树苷Rhoifolin，是类黄酮化合物。野漆树苷来源于沽油科山香圆的干燥叶和芸香科植物，用于制药，药理作用:抗肿瘤，抗高血压，黄嘌呤氧化酶抑制剂和抗氧化剂。
[0003]现有提取野漆树苷的材料主要为山香圆叶或芸香科毛橘红果实，它们的含量均比较低，只占干物质的0.1?0.6%。现有的生产工艺主要有溶剂萃取法、超临界萃取法、树脂吸附法和超滤膜分离技术等。溶剂萃取法方法简单，但提取的杂质也多，后续纯化的工艺繁杂，超临界萃取法设备投入大，树脂吸附法和超滤膜分离技术工艺比较复杂，得率低，工业化程度低。
【发明内容】
[0004]针对现有技术存在上述的不足，本发明提供了一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，本发明中提取溶剂为95%乙醇，可以降低水溶性物质进入提取液，用正丁醇与石油醚梯度混合液萃取浓缩液，得到纯度高产品，在水溶液中结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷，而且本发明的工艺流程简单，适用于大批量生产野漆树苷。
[0005]本发明的技术方案为，一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，包括以下步骤:
[0006]将化橘红叶粉碎并过滤；
[0007]将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液；
[0008]将提取液进行纯化得到野漆树苷。
[0009]上述的方法，其中，所述将化橘红叶粉碎并过滤的步骤中，其中所述过滤为通过40目筛网进行过滤。
[0010]上述的方法，其中，所述将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液的步骤包括:
[0011]选取直径为2.5cm的玻璃层析柱；
[0012]将化橘红叶粉末用95%乙醇湿样上柱并在柱中浸泡I小时；
[0013]将浸泡过后的溶液用95%乙醇洗脱并收集6倍量的洗脱液；
[0014]将洗脱液减压浓缩得到提取液。
[0015]上述的方法，其中，所述将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤包括:
[0016]将浓缩的提取液用石油醚与正丁醇混合液萃取多次；
[0017]将萃取的下层液进行浓缩；
[0018]将下层浓缩液用冷水分三次清洗并离心去除水溶性杂质得到野漆树苷粗产品；
[0019]将野漆树苷粗产品置于热水中溶解，置冰箱冷却结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷。
[0020]上述的方法，其中，所述将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤中:所述纯化中使用的萃取剂为石油醚与正丁醇混合液。
[0021 ] 上述的方法，其中，所述石油醚与正丁醇混合液的比例为8: 2; 6:4; 4:6; 2:8，并用每种配比混合而成的石油醚与正丁醇混合液依次各萃取I次。
[0022]本发明提供的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，包括以下步骤:将化橘红叶粉碎并过滤;将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液;将提取液进行纯化得到野漆树苷，本发明中化橘红叶片中的野漆苷占干物质的3.0?6.8%，是山香圆叶或芸香科毛橘红果实的十几倍，本发明中提取溶剂为95 %乙醇，降低水溶性物质进入提取液，用正丁醇与石油醚梯度混合液萃取浓缩液，得到纯度高产品，在水溶液中结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷，而且本工艺流程简单，适用于大批量生产野漆树苷。
【具体实施方式】
[0023]在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而，对于本领域技术人员而言显而易见的是，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。在其他的例子中，为了避免与本发明发生混淆，对于本领域公知的一些技术特征未进行描述。
[0024]为了彻底理解本发明，将在下列的描述中提出详细的步骤以及详细的结构，以便阐释本发明的技术方案。本发明的较佳实施例详细描述如下，然而除了这些详细描述外，本发明还可以具有其他实施方式。
[0025]本发明提供了一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，包括以下步骤:
[0026]步骤S1:将化橘红叶粉碎并过滤，其中所述过滤为通过40目筛网进行过滤。
[0027]步骤S2:将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液，具体包括:
[0028]步骤S2a:选取直径为2.5cm的玻璃层析柱。
[0029]步骤S2b:将化橘红叶粉末用95%乙醇湿样上柱并在柱中浸泡I小时，例如，取200克化橘红叶粉末用95%乙醇湿样上柱，在柱中浸泡I小时。
[0030]步骤S2c:将浸泡过后的溶液用95 %乙醇洗脱并收集6倍量的洗脱液，例如，当取200克化橘红叶粉末用95 %乙醇湿样上柱，在柱中浸泡I小时，用95 %乙醇洗脱，收集6倍量(V/W)即300mL洗脱液。
[0031]步骤S2d:将洗脱液减压浓缩得到提取液，得到提取液减压浓缩约10mL。
[0032]步骤S3:将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤包括:
[0033]步骤S3a:将浓缩的提取液用石油醚与正丁醇混合液萃取多次，具体为浓缩液依次用石油醚与正丁醇混合液(8:2; 6:4; 4:6; 2:8) 25mL依次各萃取I次。
[0034]步骤S3b:将萃取的下层液进行浓缩，具体为，弃去上层液，下层液浓缩。
[0035]步骤S3c:将下层浓缩液用冷水分三次清洗并离心去除水溶性杂质，具体为用少量冷水分三次清洗离心去水溶性杂质，去除水溶性杂质后的沉淀物即是野漆树苷粗产品。
[0036]步骤S3d:将野漆树苷粗产品置于热水中溶解，置冰箱冷却结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷，具体为将粗产品置于热水中溶解，置冰箱冷却结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷。
[0037]在本发明一优选的实施例中，将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤中:所述纯化中使用的萃取剂为石油醚与正丁醇混合液，进一步，石油醚与正丁醇混合液的比例为8:2; 6:4; 4:6; 2:8，并用每种配比混合而成的石油醚与正丁醇混合液依次各萃取I次。
[0038]以下提供一具体的实施例，来进一步阐述本发明的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法:
[0039]实施例一，一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，具体包括以下步骤，以化橘红叶为原料，粉碎，过40目筛，选取直径为2.5cm的玻璃层析柱，200克化橘红叶粉末用95 %乙醇湿样上柱，在柱中浸泡I小时，同样用95 %乙醇洗脱，收集6倍量(V/W)即300mL洗脱液，提取液减压浓缩约1mL，浓缩液依次用石油醚与正丁醇混合液(8:2;6:4;4:6;2:8)25mL各萃取I次，弃去上层液，下层液浓缩，用少量冷水分三次清洗离心去水溶性杂质，沉淀物即是纯度较高的野漆树苷粗产品，粗产品热水中溶解，置冰箱冷却结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷。
[0040]综上所述，本发明提供的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，包括以下步骤:将化橘红叶粉碎并过滤;将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液;将提取液进行纯化得到野漆树苷，本发明中化橘红叶片中的野漆苷占干物质的3.0?6.8%，是山香圆叶或芸香科毛橘红果实的十几倍，本发明中提取溶剂为95%乙醇，降低水溶性物质进入提取液，用正丁醇与石油醚梯度混合液萃取浓缩液，得到纯度高产品，在水溶液中结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷，而且本工艺流程简单，适用于大批量生产野漆树苷。
[0041]以上对本发明的较佳实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，其中未尽详细描述的设备和结构应该理解为用本领域中的普通方式予以实施;任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例，这并不影响本发明的实质内容。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。
【主权项】
1.一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，包括以下步骤: 将化橘红叶粉碎并过滤； 将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液； 将提取液进行纯化得到野漆树苷。2.如权利要求1所述的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，所述将化橘红叶粉碎并过滤的步骤中，其中所述过滤为通过40目筛网进行过滤。3.如权利要求2所述的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，所述将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液的步骤包括: 选取直径为2.5cm的玻璃层析柱； 将化橘红叶粉末用95%乙醇湿样上柱并在柱中浸泡I小时； 将浸泡过后的溶液用95%乙醇洗脱并收集6倍量的洗脱液； 将洗脱液减压浓缩得到提取液。4.如权利要求3所述的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，所述将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤包括: 将浓缩的提取液用石油醚与正丁醇混合液萃取多次； 将萃取的下层液进行浓缩； 将下层浓缩液用冷水分三次清洗并离心去除水溶性杂质得到野漆树苷粗产品； 将野漆树苷粗产品置于热水中溶解，置冰箱冷却结晶和重结晶，得到纯度98%以上的野漆树苷。5.如权利要求1-4任一所述的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，所述将提取液进行纯化得到野漆树苷的步骤中:所述纯化中使用的萃取剂为石油醚与正丁醇混合液。6.如权利要求5所述的一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，其特征在于，所述石油醚与正丁醇混合液的比例为8: 2; 6:4; 4:6; 2:8，并用每种配比混合而成的石油醚与正丁醇混合液依次各萃取I次。
【专利摘要】本发明提供了一种从化橘红叶中提取分离野漆树苷的方法，包括以下步骤：将化橘红叶粉碎并过滤；将过滤后的化橘红叶粉末进行提取得到提取液；将提取液进行纯化得到野漆树苷，本发明中化橘红叶片中的野漆苷占干物质的3.0～6.8％，是山香圆叶或芸香科毛橘红果实的十几倍，本发明中提取溶剂为95％乙醇，降低水溶性物质进入提取液，用正丁醇与石油醚梯度混合液萃取浓缩液，得到纯度高产品，在水溶液中结晶和重结晶，得到纯度98％以上的野漆树苷，本工艺流程简单，适用于大批量生产野漆树苷。
【IPC分类】C07H17/07, C07H1/08
【公开号】CN105541941
【申请号】CN201610028881
【发明人】韩寒冰, 赵俊生, 郭东胜, 魏国程, 张啟, 刘杰凤
【申请人】广东石油化工学院
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月7日