具有抗耐药菌活性的查尔酮衍生物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学技术领域，公开了具有抗耐药菌活性的新型查尔酮衍生物的 及其合成方法。
【背景技术】
[0002] 20世纪40年代，当青霉素广泛应用于临床治疗严重葡萄球菌感染时，抗菌药物耐 药随之成为临床工作者面临的一个严重挑战。1947年，从第1例对青霉素耐药的金黄色葡萄 球菌病例被报道及至1952年，临床病例分离出的金黄色葡萄球菌株，其中的75%表现对青 霉素耐药。近几年，随着对碳青霉烯类抗菌药物耐药的肠杆菌科细菌的出现，预示着抗菌药 物已进入后抗菌素时代。同时，高收入国家的医院、社区和农业生产中抗菌药物的使用越来 越多，耐药菌株层出不穷，迫使临床医生只能选择价格昂贵的新一代抗菌药物或广谱抗菌 药物;而在中、低收入国家，随人们收入以及患者住院率和院内感染率的增加，抗菌药物的 使用量也在不断增长。不断增长的抗生素用量以及在抗生素应用过程中出现的不合理使用 造成了耐药菌数量和比例的不断增加，严重威胁临床抗感染治疗。
[0003] 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（Methici 11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)是造成医院（hospital-acquired，HA)和社区获得性（communi ty-acquired， CA)感染的重要病原菌，能够引起多种致死性感染，如坏死性肺炎、骨髓炎、脑膜炎和心内膜 炎等。近年来，MRSA在世界范围内普遍流行且危害日益严重。据统计，美国每年因 MRSA感染 导致死亡的患者数相当于AIDS、结核病和病毒性肝炎的总和。在我国，医院获得性MRSA(HA-MRSA)是MRSA菌株的主要来源，呈现检出率高、多重耐药(对三类或以上抗生素耐药)严重的 特点。2010年度卫生部全国细菌耐药监测网的报告显示:在全国不同地区ICU来源的葡萄球 菌属细菌中，MRSA的检出率达到近80% (79.6%)且超过60%的MRSA对六类或六类以上临床 常用抗生素耐药。因此现有抗生素对于MRSA的治疗形势严峻。亟待开发针对MRSA有较强抑 杀活性的新型抗生素。
[0004] 根据文献报道，查耳酮具有抗菌活性，其结构里的α，β_不饱和羰基与细菌内的亲 核基团，如蛋白质中的疏基进行共辄加成而致使细菌死亡。Naganini etal.成功合成出了 一系列具有抗菌活性的查尔酮衍生物，这类查尔酮对大肠杆菌具有很好的抑制或杀灭作 用，并且经抗菌实验证明，羟基在查尔酮B环的邻位取代较对位取代活性强。Liarasetal合 成了一系列结构较新的查尔酮衍生物，这些查尔酮衍生物包含两个很有名的生物活性结构 分子，分别是噻唑和查尔酮。这些查尔酮衍生物的抗菌和抗真菌活性引起作者的关注，数据 显示这些化合物的抗菌活性几乎全部比对照组药性强。这也表明该类衍生物很可能成为新 的抗菌药物替代品。
[0005] 因此本研究设计与合成了一系列新型的查尔酮衍生物，体外活性实验显示该系列 化合物中的几种对MRSA具有较好的抑菌活性，值得进行深入开发。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一类抗耐药菌活性好的新型查尔酮衍生物。
[0007] 为实现本发明，本发明合成查尔酮衍生物路线如下：
[0008]
[0009] 合成目标化合物如下：
[0010] 1、5a:Ri = p_NH2，R2 = H，R4=C1，n = 1
[0011] 2、5b:Ri = p-NH2，R2 = 3-F，R4=Cl，n=l
[0012] 3、5c:R1 = p-NH2，R2 = 5-Br，R4 = Cl，n = l
[0013] 4n5cI：Ri = p-NH2 ,R2 = 6-Br ,R4=C1 ,n = 1
[0014] 5、5e :κ1 = ρ-ΝΗ2，R2 = H，R4=H，n = 1
[0015] 6、5f:Ri = p_NH2，R2 = H，R4=Br，n = 1
[0016] 7、5g:R1 = p-NH2，R2 = H，R4=Cl，n = 2
[0017] 8、5h:Ri = p_NH2，R2 = H，R4=Cl，n = 3
[0018] 9n5i ：Ri = p-NH2 ,R2 = H,R4=C1 ,n = 4
[0019] 10,5j：Ri = 〇-NH2,R2 = H,R4=Cl,n=l
[0020] lK5k：Ri=m-NH2 ,R2 = H,R4=C1 ,n = 1 〇
[0021 ]采用上述路线，化合物2为2-吡啶甲醛或取代的2-吡啶甲醛合成化合物5a_5k: [0022]
[0023] i2、51:Ri = p-NH2，R2 = H，R4=Cl，n=l。
[0024] 采用上述路线，化合物2为3-吡啶甲醛合成化合物51:
[0025]
[0026] i3、5m:Ri = p_NH2，R2 = H，R4=C1，n = 1，
[0027] 采用上述路线，化合物2为4-吡啶甲醛合成化合物5m。
[0028] 具体通过如下步骤实现：
[0029] 1、化合物1与化合物2发生经典的Claisen-Schmidt反应，反应条件是在氢氧化钠 的催化作用下，以乙醇为溶剂，常温下进行反应得到化合物3。
[0030] 2、化合物3与化合物4在弱碱K2C03和无水丙酮中，常温下进行反应得到一系列目标 化合物5a~5m。
[0031] 本发明所述新型的查尔酮衍生物对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌株(29213)有较 好的抑菌作用，化合物5a，5f，5k，5m对多株临床耐药菌株MRSA表现出良好的抑菌效果，并且 优于阳性对照药左氧氟沙星和红霉素，因此，本发明提供的此类新型查尔酮衍生物有望作 为新的抗菌候选药物进行深入的研究，并对解决目前全球面临耐药菌日益严重的问题有重 要意义。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用 于限制本发明要求保护的范围。
[0033] 合成化合物表征使用的仪器:NMR谱使用瑞典Bruker DPX-400型超导核磁共振仪 测定，TMS为内标;高分辨质谱使用Wat er s-Mi cromas s公司Q-Tof质谱仪测定。
[0034] 实施例1
[0035] 化合物5a的制备
[0036] 取氢氧化钠（370mg，9 · 25mmol)于250ml单口圆底烧瓶中，加入50ml水室温磁力搅 拌下溶解；然后将化合物1 (对氨基苯乙酮）（1. 〇〇g，7.40mmol)和化合物2(2-吡啶甲醛） (722ul，7.58mmol)加入100ml锥形瓶内，加入50ml乙醇超声至该体系基本澄清，然后将该澄 清溶液恒压滴加（ld/s)到上述已经搅拌氢氧化钠溶液的单口瓶内，滴加完毕后室温下继续 反应，此时体系棕黄色澄清。约6h后，TLC检测(PE: EA= 1:1)显示反应完全。停止反应，将反 应体系倒入约50ml冰水中，立即析出大量黄色固体，抽滤，滤饼水洗至中性，真空干燥，得到 亮黄色固体化合物3 (1.48g)，收率为89.2 %。
[0037] 取上述化合物3( 100mg，0·446mmol)和碳酸钟（74mg，0· 535mmol)于5ml单口圆底烧 瓶，然后加入1.35ml丙酮，塞上翻口橡胶塞室温下搅拌;然后用lml注射器通过橡胶塞向反 应体系注入化合物4(氯乙酰氯）（40.3μ1，0.535mmol)，体系立即由原来的橙色浑浊变为黄 色浑浊。约0.5h后，TLC(PE :EA = 1:1)检测，显示反应完全，3ml冰水淬灭反应，搅拌lOmin后， 将体系抽滤，滤饼冰水洗至中性，真空干燥得到化合物5a( 119mg)。
[0038] 产物为浅棕色固体，收率为:137-138°C。
[0039] 4 NMR(400MHz，CDCl3)S8.70((1, J = 3.9Hz，1H)，8· 51(s，lH) ,8.18-8.08(m，3H)， 7.82-7.68(m，4H)，7.48(d，J = 7.7Hz，lH)，7.31(ddd，J = 7.6,4.8,0.9Hz，lH)，4.23(s，2H).
[0040] 13C NMR(101MHz,CDC13)5188.87,164.08,153.12,150.14,142.67,141.02, 136.99,134.35,130.23,125.53,125.24,124.50,119.38,77.36,77.04,76.72,42.90.
[0041] HR-MS(ESI)Calcd for Ci6Hi4C1N2〇2[M+H]+:301.0744,found:301.0744.
[0042] 实施例2
[0043] 化合物5b的制备
[0044] 化合物1为对氨基苯乙酮，化合物2为3-氟-2-吡啶甲醛，化合物4为氯乙酰氯，制备 方法同实施例1。
[0045] 产物为淡黄色固体，收率为98.8%，m.p. :157-158°C。
[0046] 咕匪1?(4001抱，0)(：13)38.43((1，了 = 4.4!^，1!〇,8.39(8，1!〇,8.10((1(1，了 = 24.8， 12.0Hz，3H)，7.98(dd，J= 15.3, l.lHz，lH)，7.66(d，J = 8.7Hz，2H)，7.48-7.33(m，lH) ,7.28 (dt ,J = 8.5,4.3Hz,lH),4.16(s,2H).
[0047] 13C 匪R(101MHz，CDC13)δ187·55,163.02,144.75,144.70,140.02,133.67, 133.28.129.25.125.45.125.41.124.95.124.90.123.00. 122.81.118.36.76.33.76.21， 76.01.75.69.41.87. -0.00,-1.03.
[0048] HR-MS(ESI)Calcd for Ci6Hi3C1FN2〇2[M+H] +:319.0650,found:319.0648.
[0049] 实施例3
[0050] 化合物5c的制备
[00511化合物1为对氨基苯乙酮，化合物2为5-溴-2-吡啶甲醛，化合物4为氯乙酰氯，制备 方法同实施例1。
[0052] 产物为淡黄色固体，收率为85.3%，m.p. :226-227°C。
[0053] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0)510.72(s,1H),8.81(d,J=1.9Hz,lH),8.23-8.08(m,4H), 7.91(d ,J = 8.4Hz,lH),7.80(d ,J = 8.6Hz,2H),7.69(d ,J=15.4Hz,lH),4.32(d ,J = 6.3Hz, 2H).
[0054] 13C NMR(101MHz,DMS0)5187.63,165.24,151.71,150.73,143.11,141.26,139.75, 132.41,130.02,126.29,125.69,121.21,118.86,43.60,40.13,39.92,39.71,39.51, 39.30.39.09.38.88.
[0055] HR-MS(ESI)Calcd for Ci6Hi3BrClN2〇2[M+H]+:378.9849,found:378.9850.
[0056] 实施例4
[0057] 化合物5d的制备
[0058] 化合物1为对氨基苯乙酮，化合物2为6-溴-2-吡啶甲醛，化合物4为氯乙酰氯，制备 方法同实施例1。
[0059] 产物为淡黄色固体，收率为73.3%，m.p. :225-226°C。
[0060] 4 MMR(400MHz，DMS0)Sl0.74(s，lH) ,8.11 (dd，J= 17.6,12·0Ηζ，3Η)，7.96((1, J = 7.5Hz,lH) ,7.90-7.79(m,3H) ,7.72-7.59(m,2H) ,6.65(d,J = 8.6Hz, 1H) ,4.33(d,J = 7.1Hz,2H).
[0061] 13C NMR(101MHz，DMS0)Sl87.58，165.25，154.26，143.17，141.65，140.60，140.43, 132.31,130.06,128.94,126.30,124.30,118.88,43.60,40.13,39.92,39.71,39.50, 39.30.39.09.38.88.
[0062] HR-MS(ESI)Calcd for Ci6Hi3BrClN2〇2[M+H]+:378.9849,found:378.9850.
[0063] 实施例5
[0064] 化合物1为对氨基苯乙酮，化合物2为2-吡啶甲醛，化合物4为乙酰氯，制备方法同 实施例1。
[0065] 产物为淡黄色固体，收率为94.6%，πκρ· :183-184°C。
[0066] 4 NMR(400MHz，CDC13)S8.69(s，1H)，8.10(t，J=11.2Hz，3H)，7.98(s，lH) ,7.73 (dd,J = 33.0,11.1Ηz,4Η) ,7.48(d,J = 7.3Hz,lH) ,7.30(d,J = 6.0Hz,lH) ,2.22(s,3H), 1.89(s,2H).
[0067] 13C NMR(101MHz,CDC13)5189.02,168.74,153.22,150.14,142.54,142.49, 136.99,133.40,130.24,125.45,125.40,124.46,118.98,77.36,77.24,77.04,76.72, 24.77.0. 00.
[0068] HR-MS(ESI)Calcd for C16H15N202[M+H] +:267.1134,found:267.1132.HR-MS (ESI)Calcd for Ci6Hi5N2〇2[M+H] +:267.1134,found:267.1132.
[0069] 实施例6
[0070] 化合物1为对氨基苯乙酮，化合物2为2-吡啶甲醛，化合物4为溴乙酰溴，制备方法 同实施例1。
[0071] 产物为黄色固体，收率为84%，m.p. :185-186°c。
[0072] ΧΗ NMR(400MHz,DMS0)5l0.80(s,lH),8.70(d ,J = 3.6Hz,lH) ,8.16(t ,J= 11.4Hz , 3H),8.04-7.67(m,6H),7.45(d ,J = 4.1Hz,lH),4.11(s,2H).