用于治理水体污染的组合物或复合菌剂的制作方法

用于治理水体污染的组合物或复合菌剂的制作方法
【专利摘要】本申请提供一种组合物、复合菌剂及其应用。所述组合物或复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌中至少四种或四种以上菌株的组合，其应用包括治理水体污染。
【专利说明】
用于治理水体污染的组合物或复合菌剂
技术领域
[0001] 本申请属于环境修复技术领域。具体地，本申请涉及用于治理水体污染的组合物 或复合菌剂。
【背景技术】
[0002] 湖泊和大型的人工池塘水体多为静止或者流动性差的缓流水体，存在水体易污 染、自净能力差等问题，加上居民生活和水中鱼类的影响，极易造成水中悬浮物的增多、浊 度增大、有机物、细菌和大肠杆菌的含量增高。夏天由于温度升高，富含N、P等元素水体还会 滋生大量的藻类，藻类的异常繁殖会破坏水体的生态平衡，水体的色度升高变绿甚至变黑 变臭。
[0003] 我国湖泊水体的污染问题比较普遍，总磷、氨氮污染严重，富营养化已经成为污染 水体的首要问题。富营养化是指水体中的氮、磷营养过剩，促使水体中藻类过量生长。目前 我国26个湖泊水体污染严重，其中包括杭州西湖、山东大明湖、太湖等水体水质恶化严重， 严重影响到了人民的日常生活和水体景观。因此水体的综合治理有其必要性和紧迫性。
[0004] 目前国内外针对湖泊以及大型人工池塘污染水体的治理方式主要有以下几种：
[0005] (1)物理方式；
[0006] (2)化学方式；
[0007] (3)生物方式；
[0008] 物理方式主要有底泥疏浚法、引水换水法、控制外源污染法等。底泥疏浚能有效的 清除底泥中的营养物质，引水换水法可以快速稀释水体中的污染物，控制外源污染法可以 有效控制污染物进入水体。化学方式是指利用化学药品来治理污染水体。生物方式是通过 微生物和水生植物来治理污染水体，微生物和植物生长繁殖可以降解、转化、吸收、沉淀水 体中的污染物，从而达到污染水体治理的目的。
[0009] 水质恶化的水体中污染物难以降解的主要原因是环境体系中不存在或存在少量 可降解污染物的微生物。即使存在少量可降解污染物的微生物，也会由于竞争和捕食作用 等生态关系使其难以大量繁殖并发挥降解污染物的能力。水体的温度、pH值、盐度和溶解氧 等外部环境条件不适的情况下也不利于微生物降解能力的发挥。自然条件下微生物对水体 的自净速度是很慢的，必须采取人为的强化措施才能加快这一进程。

【发明内容】

[0010] -方面，本申请提供一种组合物，包含假丝酵母（Candida)、巨大芽孢杆菌 (Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根 瘤菌（Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和植物 乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中至少四种或至少五种。
[0011] 在一个实施方案中，所述组合物包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆 菌和嗜温鞘氨醇杆菌。
[0012] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和 解淀粉芽孢杆菌。
[0013] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、 放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌。
[0014] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、 放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌。
[0015] 另一方面，本申请提供一种复合菌剂，其成分包含假丝酵母(Candida)、巨大芽孢 杆菌（Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射 型根瘤菌（Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens^PI 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中至少四种或至少五种。
[0016] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢 杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌。
[0017] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌 和解淀粉芽孢杆菌。
[0018] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆 菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌。
[0019] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含上述六种菌株。
[0020] 在一个实施方案中，所述复合菌剂由上述六种菌株组成。
[0021] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢 杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌这四种菌株的培养物。
[0022] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌 和解淀粉芽孢杆菌这四种菌株的培养物。
[0023]在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆 菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌这五种菌株的培养物。
[0024]在一个实施方案中，所述复合菌剂包含上述六种菌株的培养物。
[0025] 任选地，所述假丝酵母为热带假丝酵母（Candida tropicalis)、解脂假丝酵母 (Candida lipolytica)或产H元假丝酵母(Candida utilis)。
[0026] 另一方面，本申请还涉及一种复合菌剂的制备方法，包括：
[0027] 将假丝酵母(Candida)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌 (Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根瘤菌(Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽 抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum)中至少 四种或至少五种，分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按照 上述组合进行混合，得到所述复合菌剂；
[0028] 任选地，上述培养为液体培养、半固体培养或固体培养。
[0029] 在一个实施方案中，将巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和嗜温鞘氨 醇杆菌这四种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按 照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0030] 在一个实施方案中，将假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和解淀粉芽孢杆 菌这四种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按照上 述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0031] 在一个实施方案中，将假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌 和解淀粉芽孢杆菌这五种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所 述培养物按照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0032] 在一个实施方案中，将上述六种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的 培养物，并将所述培养物按照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0033]另一方面，本申请还涉及一种治理或辅助治理水体污染的方法，包括：
[0034]将所述组合物或所述复合菌剂接种到待处理污染水体中进行治理至少5天、至少 10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天。
[0035] 在一个实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂接种到待处理污染水体中进行 治理至少10天、至少15天、至少20天或至少30天。
[0036] 在一些实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂接种到待处理污染水体中进行 治理，春季和秋季一般需要10~20天;夏季一般需要5~15天。
[0037] 在一个实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待处 理污染水体至少5天、至少10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天。
[0038] 在一个实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待处 理污染水体至少10天、至少15天、至少20天或至少30天。
[0039] 在一些实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待处 理污染水体，春季和秋季一般需要10~20天;夏季一般需要5~15天。
[0040] 在一个实施方案中，其中所述组合物或所述复合菌剂相对于所述待处理污染水体 的接种量为至少0.01 %、至少〇. 05%、至少0.1 %、至少0.5%、至少1 %、至少2%、至少3%或 至少5%v/v。
[0041 ]在一个实施方案中，其中所述组合物或所述复合菌剂相对于所述待处理污染水体 的接种量为至少0.05%、至少0.1%、至少0.5%、至少1 %或至少2%v/v。
[0042]在一些实施方案中，水生植物为浮水植物、挺水植物或沉水植物。
[0043]在一些实施方案中，浮水植物为凤眼蓝、睡莲、浮萍或满江红；挺水植物为芦、蒲 草、荸荠、莲、水芹、茭白荀、荷花或香蒲;沉水植物为菹草、苦草、金鱼藻、狐尾藻或黑藻。
[0044] 另一方面，本申请还涉及所述组合物或所述复合菌剂在生态环境修复中的应用。
[0045] 详述
[0046] 提供以下定义和方法用以更好地界定本申请以及在本申请实践中指导本领域普 通技术人员。除非另作说明，术语按照相关领域普通技术人员的常规用法理解。本文所引用 的所有专利文献、学术论文及其他公开出版物，其中的全部内容整体并入本文作为参考。
[0047] 定义
[0048] 如本文所用术语"组合物"，是指包含两种或两种以上微生物菌种的混合物，或者 由所述微生物菌种组成。如果需要，所述组合物还可以包括其他的有利于所述菌株保存的 物质，例如，培养基、微量元素、维生素、氨基酸、肉汤等。
[0049] 如本文所用术语"复合菌剂"，是指包含两种或两种以上且互不拮抗的微生物菌种 制成的微生物制剂，所述复合菌剂以所述菌种为活性成分，还可以另外包含载体或赋形剂， 也可以包含其他的有利于所述菌株保存的物质，例如，培养基、微量元素、维生素、氨基酸、 肉汤等。在一个实施方案中，所述菌剂配伍合理、具有协同作用等优点。
[0050] 如本文所用术语"培养物"，是指在特定工艺条件控制下由微生物菌种在特定的培 养基上经过发酵后形成的微生物制品，它主要包含发酵后微生物菌种细胞群、微生物菌种 细胞代谢产物和培养基。
[0051] 如本文所用术语"水体污染"，是指水体因某种物质的介入，超过了水体的自净能 力，导致其物理、化学、生物等方面特征的改变，从而影响到水的利用价值，危害人体健康或 破坏生态环境，造成水质恶化的现象。
[0052]如本文所用术语"富营养化"，是指由于大量的氮、磷、钾等元素排入到流速缓慢、 更新周期长的地表水体，使藻类等水生生物大量地生长繁殖，使有机物产生的速度远远超 过消耗速度，水体中有机物积蓄，破坏水生生态平衡的过程。
[0053] 如本文所用术语"水生植物"，是指能在水中生长的植物。
[0054] 如本文所用术语"浮水植物"，也称浮叶植物，是指生于浅水中，叶浮于水面，根长 在水底土中的植物，一般因为缺乏氧气，所以可以无氧呼吸产生醇类物质;此外，通过叶柄 也能由叶供给氧气，叶柄与水深相适应可伸得很长。
[0055] 如本文所用术语"挺水植物"，是指植物的根、根茎生长在水的底泥之中，茎、叶挺 出水面;其常分布于0~1.5米的浅水处，其中有的种类生长于潮湿的岸边;这类植物在空气 中的部分，具有陆生植物的特征;生长在水中的部分(根或地下茎），具有水生植物的特征。
[0056] 如本文所用术语"沉水植物"，是指植物体全部位于水层下面营固着生存的大型水 生植物;它们的根有时不发达或退化，植物体的各部分都可吸收水分和养料，通气组织特别 发达，有利于在水中缺乏空气的情况下进行气体交换，这类植物的叶子大多为带状或丝状。 [0057]如本文所用术语"生态环境修复"，是指对生态系统停止人为干扰，以减轻负荷压 力，依靠生态系统的自我调节能力与自组织能力使其向有序的方向进行演化，或者利用生 态系统的这种自我恢复能力，辅以人工措施，使遭到破坏的生态系统逐步恢复或使生态系 统向良性循环方向发展;主要指致力于那些在自然突变和人类活动影响下受到破坏的自然 生态系统的恢复与重建工作，恢复生态系统原本的面貌。
[0058]如本文所用术语"氨氮"，是指水中以游离氨(NH3)和铵离子(NH4+)形式存在的氮， 常被用来表示水体受营养物质污染的程度。
[0059]如本文所用术语"总磷"，是指水样经消解后将各种形态的磷转变成正磷酸盐后测 定的结果，以每升水样含磷毫克数计量。
[0060] 如本文所用术语"化学需氧量(C0D)"，是指在一定条件下，用一定的强氧化剂处理 水样时所消耗的氧化剂的量，以氧的毫克/升表示，利用化学氧化剂，将水样中的还原物质 加以氧化，然后从剩余的氧化剂的量计算出氧的消耗量。
[0061] 如本文所用术语"色度"，是指水体颜色强度的物理量，是表征水质好坏的很重要 的一个参数。我国现行水体色度测量的国家标准方法(GB/T 11903-1989)是铂钴比色法和 稀释倍数法，其中铂钴比色法是国际上公认的测量透明液体色度的方法，已被国际标准化 组织（IS0)推荐为测量透明液体色度的标准方法。
【具体实施方式】
[0062] 一方面，本申请提供一种组合物，包含假丝酵母（Candida)、巨大芽孢杆菌 (Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根 瘤菌（Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和植物 乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中至少四种或至少五种。
[0063] 在一个实施方案中，所述组合物包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆 菌和嗜温鞘氨醇杆菌。
[0064] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和 解淀粉芽孢杆菌。
[0065] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、 放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌。
[0066] 在一个实施方案中，所述组合物包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、 放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌。
[0067]另一方面，本申请提供一种复合菌剂，其成分包含假丝酵母(Candida)、巨大芽孢 杆菌（Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射 型根瘤菌（Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中至少四种或至少五种。
[0068] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢 杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌。
[0069] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌 和解淀粉芽孢杆菌。
[0070] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆 菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌。
[0071 ]在一个实施方案中，所述复合菌剂包含上述六种菌株。
[0072] 在一个实施方案中，所述复合菌剂由上述六种菌株组成。
[0073] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢 杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌这四种菌株的培养物。
[0074] 在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌 和解淀粉芽孢杆菌这四种菌株的培养物。
[0075]在一个实施方案中，所述复合菌剂包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆 菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌这五种菌株的培养物。
[0076]在一个实施方案中，所述复合菌剂包含上述六种菌株的培养物。
[0077]在一些实施方案中，所述组合物中或所述复合菌剂中的总有效活菌数多IX 108cfu/mL〇
[0078]在一些实施方案中，以所述菌株培养物的体积计，其中所述复合菌剂中所述假丝 酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉 芽孢杆菌培养物和植物乳杆菌培养物中至少四种、至少五种或六种的体积份为：
[0079] 假丝酵母培养物3~6 [0080]巨大芽孢杆菌培养物1~3 [0081 ]嗜温鞘氨醇杆菌培养物1~3 [0082]放射型根瘤菌培养物1~3
[0083]解淀粉芽孢杆菌培养物1~3 [0084]植物乳杆菌培养物6~10;
[0085]任选地，所述培养物包含菌株和载体；
[0086]任选地，所述假丝酵母培养物中所述假丝酵母的有效活菌数为多1 X 107cfu/mL; 所述巨大芽孢杆菌培养物中所述巨大芽孢杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述嗜温 鞘氨醇杆菌培养物中所述嗜温鞘氨醇杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述放射型根 瘤菌培养物中所述放射型根瘤菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述解淀粉芽孢杆菌培 养物中所述解淀粉芽孢杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述植物乳杆菌培养物中所 述植物乳杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;
[0087] 任选地，所述载体包含液体培养基、半固体培养基或固体培养基。
[0088] 在一个实施方案中，所述组合物中或所述复合菌剂中巨大芽孢杆菌培养物、放射 型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌培养物和嗜温鞘氨醇杆菌培养物之间的体积比为1:1:1: 1〇
[0089] 在一个实施方案中，所述组合物中或所述复合菌剂中假丝酵母培养物、巨大芽孢 杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1。
[0090] 在一个实施方案中，所述组合物中或所述复合菌剂中假丝酵母培养物、巨大芽孢 杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间 的体积比为2:1:1:1:1。
[0091] 在一个实施方案中，所述组合物中或所述复合菌剂中六种菌株培养物之间的体积 比为 2:1:1:1:1:2。
[0092] 任选地，所述假丝酵母为热带假丝酵母（Candida tropicalis)、解脂假丝酵母 (Candida lipolytica)或产H元假丝酵母(Candida utilis)。
[0093] 另一方面，本申请还涉及一种复合菌剂的制备方法，包括：
[0094] 将假丝酵母（Candida)、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌 (Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根瘤菌(Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽 抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum)中至少 四种或至少五种，分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按照 上述组合进行混合，得到所述复合菌剂；
[0095]任选地，上述培养为液体培养、半固体培养或固体培养。
[0096] 在一个实施方案中，将巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和嗜温鞘氨 醇杆菌这四种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按 照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0097] 在一个实施方案中，将假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和解淀粉芽孢杆 菌这四种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按照上 述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0098]在一个实施方案中，将假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌 和解淀粉芽孢杆菌这五种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的培养物，并将所 述培养物按照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0099]在一个实施方案中，将上述六种菌株分别进行培养；以及获得所述菌株的各自的 培养物，并将所述培养物按照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂。
[0100] 在一些实施方案中，所述复合菌剂的制备方法中，以所述菌株的各自的培养物的 体积计进行混合，混合时所述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养 物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌培养物和植物乳杆菌培养物中至少四种、至少五 种或六种的体积份为：
[0101] 假丝酵母培养物3~6
[0102] 巨大芽孢杆菌培养物1~3 [0103]嗜温鞘氨醇杆菌培养物1~3
[0104] 放射型根瘤菌培养物1~3
[0105] 解淀粉芽孢杆菌培养物1~3
[0106] 植物乳杆菌培养物6~10;
[0107] 任选地，所述培养物包含菌株和载体；
[0108] 任选地，所述假丝酵母培养物中所述假丝酵母的有效活菌数为多1 X 107cfu/mL; 所述巨大芽孢杆菌培养物中所述巨大芽孢杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述嗜温 鞘氨醇杆菌培养物中所述嗜温鞘氨醇杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述放射型根 瘤菌培养物中所述放射型根瘤菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述解淀粉芽孢杆菌培 养物中所述解淀粉芽孢杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;所述植物乳杆菌培养物中所 述植物乳杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL;
[0109] 任选地，所述复合菌剂中的总有效活菌数彡1 X 108cfu/mL;
[0110] 任选地，所述载体包含液体培养基、半固体培养基或固体培养基。
[0111] 在一个实施方案中，所述复合菌剂的制备方法中，以所述菌株的各自的培养物的 体积计进行混合，混合时所述巨大芽孢杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌 培养物和嗜温鞘氨醇杆菌培养物之间的体积比为1:1:1:1。
[0112] 在一个实施方案中，所述复合菌剂的制备方法中，以所述菌株的各自的培养物的 体积计进行混合，混合时所述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养 物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1。
[0113] 在一个实施方案中，所述复合菌剂的制备方法中，以所述菌株的各自的培养物的 体积计进行混合，混合时所述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养 物、放射型根瘤菌培养物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1:1。
[0114] 在一个实施方案中，所述复合菌剂的制备方法中，以所述菌株的各自的培养物的 体积计进行混合，混合时所述六种菌株培养物之间的体积比为2:1:1:1:1: 2。
[0115] 本申请所用菌种均为已知菌种，可通过常规筛选、商业手段或其它途径获得。
[0116] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如假丝酵母可以是 热带假丝酵母(Candida tropical is)，可选择地，可从西安紫瑞生物科技有限公司（地址： 陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0117] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如巨大芽孢杆菌可 以是巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，可选择地，可从西安紫瑞生物科技有限公司 (地址:陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0118] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如解淀粉芽孢杆菌 可以是解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，可选择地，可从西安紫瑞生物科 技有限公司(地址:陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0119] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如植物乳杆菌可以 是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，可选择地，可从西安紫瑞生物科技有限公司 (地址:陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0120] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如嗜温鞘氨醇杆菌 可以是嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)，可选择地，可从西安紫瑞生物 科技有限公司(地址:陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0121] 在一个实施方案中，可通过商业途径获得本文所述的菌种，例如放射型根瘤菌可 以是放射型根瘤菌(Rhizoblum radiobacter)，可选择地，可从西安紫瑞生物科技有限公司 (地址:陕西省眉县滨河新区眉坞大道东段，邮编:722300)获得上述菌株。
[0122] 在一些实施方案中，用于培养所述菌种的液体培养的液体培养基中，假丝酵母可 以使用PDA液体培养基、麦芽汁培养基或豆芽汁培养基;巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放 射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌可以使用牛肉膏蛋白胨液体培养基、LB培养基或肉汤培养 基;植物乳杆菌可以使用MRS液体培养基或玉米粉综合培养基。
[0123] 在一些实施方案中，用于培养所述菌种的半固体培养的半固体培养基可为在液体 培养基中加入少量的凝固剂(如〇. 2 %~0.5 %的琼脂)制备而成。
[0124] 在一些实施方案中，用于培养所述菌种的固体培养的固体培养基可为麸皮培养 基、马铃薯培养基、米糠培养基、豆饼粉培养基或花生饼粉培养基。
[0125] 培养物主要由微生物菌种细胞、微生物菌种细胞外代谢产物(例如酶、多糖、脂类、 有机酸等)和发酵后的培养基。
[0126] 在一个实施方案中，所述复合菌剂的制备方法包括如下至少一种方法或步骤：
[0127] (1)试管斜面培养:热带假丝酵母采用PDA培养基，28°C~30 °C培养24小时，获得热 带假丝酵母试管斜面菌种;巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆 菌采用牛肉膏蛋白胨培养基，32 °C~35 °C培养24小时，分别获得巨大芽孢杆菌斜面菌种、嗜 温鞘氨醇杆菌斜面菌种、放射型根瘤菌斜面菌种和解淀粉芽孢杆菌斜面菌种;植物乳杆菌 采用MRS培养基，35 °C~40°C培养24小时，获得植物乳杆菌试管斜面菌种。
[0128] (2)摇瓶培养:热带假丝酵母的摇瓶培养基是PDA液体培养基，巨大芽孢杆菌、嗜温 鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌摇瓶培养基均为牛肉膏蛋白胨液体培养基， 热带假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌的培养条 件均为28°C~32°C，转速150~180r/min，培养24小时，分别获得热带假丝酵母种子液、巨大 芽孢杆菌种子液、嗜温鞘氨醇杆菌种子液、放射型根瘤菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液； 植物乳杆菌采用MRS液体培养基，30~40°C条件下静止24~48小时，获得植物乳杆菌种子 液。
[0129] (3)发酵培养:将步骤(2)中的各菌株的种子液按10%的体积比接种到发酵罐中进 行液体发酵培养，巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌的发酵 培养基均为在牛肉膏蛋白胨液体培养基中，3 2 °C~3 5 °C培养24~48小时，分别获得巨大芽 孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培养物和解淀粉芽孢 杆菌发酵培养物;热带假丝酵母的发酵培养基为在葡萄糖-蔗糖培养基中，28 °C~30°C培养 24~48小时，获得热带假丝酵母发酵培养物;植物乳杆菌为玉米粉培养基中，35 °C~40°C培 养48~72小时，发酵液的pH<4，获得植物乳杆菌发酵培养物。
[0130] 热带假丝酵母发酵培养物中含有热带假丝酵母细胞群、热带假丝酵母代谢产物 (例如纤维素酶、果胶酶和4-氧代脱酸酶)和发酵后的培养基;巨大芽孢杆菌发酵培养物中 含有巨大芽孢杆菌细胞群、巨大芽孢杆菌代谢产物(例如葡萄糖异构酶、淀粉酶、生物质絮 凝剂)和发酵后的培养基;嗜温鞘氨醇杆菌发酵培养物中含有嗜温鞘氨醇杆菌细胞群、嗜温 鞘氨醇杆菌代谢产物(例如生物质絮凝剂和纤维素酶)和发酵后的培养基;放射型根瘤菌发 酵培养物中含有放射型根瘤菌细胞群、放射型根瘤菌代谢产物(例如细胞黏液)和发酵后的 培养基;解淀粉芽孢杆菌发酵培养物中含有解淀粉芽孢杆菌细胞群、解淀粉芽孢杆菌代谢 产物(例如α-淀粉酶、蛋白酶、抑菌蛋白、抗生素)和发酵后的培养基;植物乳杆菌发酵培养 物中含有植物乳杆菌细胞群、植物乳杆菌代谢产物(例如乳酸、乙酸)和发酵后的培养基;热 带假丝酵母发酵培养物中热带假丝酵母的有效活菌数为多1 X 107cfu/mL，巨大芽孢杆菌发 酵培养物中所述巨大芽孢杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL，嗜温鞘氨醇杆菌发酵培养 物中所述嗜温鞘氨醇杆菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL，放射型根瘤菌发酵培养物中所 述放射型根瘤菌的有效活菌数为多1 X 108cfu/mL，解淀粉芽孢杆菌发酵培养物中所述解淀 粉芽孢杆菌的有效活菌数为多IX 108cfu/mL，植物乳杆菌发酵培养物中所述植物乳杆菌的 有效活菌数为彡1 X 108cfu/mL。
[0131] 4)将上述热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌 发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳杆菌发酵培 养物中至少四种、至少五种或六种进行混合，得到复合菌剂。
[0132] 在一个实施方案中，将巨大芽孢杆菌发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀 粉芽孢杆菌发酵培养物和嗜温鞘氨醇杆菌发酵培养物按照体积百分比1:1:1:1进行混合， 得到复合菌剂。复合菌剂中的总有效活菌数多1 X 108cfu/mL。
[0133] 在一个实施方案中，将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温 鞘氨醇杆菌发酵培养物和解淀粉芽孢杆菌发酵培养物按照体积百分比2:1:1:1进行混合， 得到复合菌剂。复合菌剂中的总有效活菌数多1 X 108cfu/mL。
[0134]在一个实施方案中，将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温 鞘氨醇杆菌发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培养物和解淀粉芽孢杆菌发酵培养物按照体积 百分比2:1:1:1:1进行混合，得到复合菌剂。复合菌剂中的总有效活菌数彡1 X 108cfu/mL。
[0135] 在一个实施方案中，将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温 鞘氨醇杆菌发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳 杆菌发酵培养物按照体积百分比2:1:1:1:1: 2进行混合，得到复合菌剂。复合菌剂中的总有 效活菌数彡1 X 108cfu/mL。
[0136] 另一方面，本申请还涉及一种治理或辅助治理水体污染的方法，包括：
[0137] 将所述组合物或所述复合菌剂投放入待处理污染水体中进行治理至少5天、至少 10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天。
[0138] 在一个实施方案中，将所述组合物，或所述复合菌剂投放入待处理污染水体中进 行治理至少10天、至少15天、至少20天或至少30天。
[0139] 污染水体是指富营养化的湖泊、水库或人工池塘。富营养化一般采用的指标是:水 体中氮含量大于ο. 3mg/L，磷含量大于Ο. Olmg/L，化学需氧量大于lOmg/L，pH值7~9的淡水 中细菌总数每毫升超过10万个，表征藻类数量的叶绿素-a含量大于10ymg/L。
[0140] 在一个实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待处 理污染水体至少5天、至少10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天。
[0141] 在一个实施方案中，将所述组合物或所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待处 理污染水体至少10天、至少15天、至少20天或至少30天。
[0142] 在一个实施方案中，其中所述组合物或所述复合菌剂相对于所述待处理污染水体 的接种量为至少0.01 %、至少〇. 05%、至少0.1 %、至少0.5%、至少1 %、至少2%、至少3%或 至少5%v/v。
[0143] 在一个实施方案中，其中所述组合物或所述复合菌剂相对于所述待处理污染水体 的接种量为至少0.05%、至少0.1%、至少0.5%、至少1 %或至少2%v/v。
[0144] 在一些实施方案中，水生植物为浮水植物、挺水植物或沉水植物。
[0145] 在一些实施方案中，浮水植物为凤眼蓝、睡莲、浮萍或满江红;挺水植物为芦、蒲 草、荸荠、莲、水芹、茭白荀、荷花或香蒲;沉水植物为菹草、苦草、金鱼藻、狐尾藻或黑藻。
[0146] 在一些实施方案中，在生长有水生植物的污染水体处，或在污染水体上先定植水 生植物，形成例如生态浮岛、浮床或浮筏，再将复合菌剂投加在水生植物生长区。
[0147] 在一些实施方案中，可以将水生植物在其它的水体中进行种植生长或者种子进行 萌发然后移栽到待处理的污染水体中。
[0148] 在一些实施方案中，复合菌剂与水生植物共同使用可以是将适合在污染水体中生 长的水生植物根系在复合菌剂菌液中浸泡后共同加入待处理污染水体中进污染水体处理。
[0149] 在一个实施方案中，污染水体中生长有水生植物，将复合菌剂采用无菌水稀释10 倍，得到复合菌剂稀释液，将复合菌剂稀释液通过喷雾器均匀撒入水面或水生植物生长区， 复合菌剂稀释液投加量为待处理污染水体体积的〇. 5%。
[0150] 在一些实施方案中，也可将复合菌剂按照待处理污染水体体积的至少0.5%、至少 1 %或至少2%通过喷雾器均匀撒入待处理污染水体中。
[0151] 在一个实施方案中，治理或辅助治理水体污染的方法中，温度为10~40°C，待处理 污染水体的pH值为6.5~8.0。
[0152] 在一个实施方案中，治理或辅助治理水体污染的方法中，温度为15°C~20°C，待处 理污染水体的pH值为7.4或7.8。
[0153] 在一个实施方案中，水生植物每隔1~2个月收割生长面积的20~50%。
[0154]定期对治理后的水体中的氨氮含量、总磷含量、C0D和色度进行检测。
[0155] C0D根据GB11914-1989中的重铬酸盐法进行测定；总磷根据GB11893-1989中的钼 酸铵分光光度法进行测定；色度根据GB11903-1989中的铂钴比色法进行测定；氨氮根据 HJ535-2009中的纳氏试剂分光光度法进行测定；水体治理标准为《地表水环境质量标准 GB3838-2002》。
[0156] 另一方面，本申请还涉及所述组合物，或所述复合菌剂在生态环境修复中的应用。
[0157] 因此，本申请提供的用于治理水体污染的组合物或复合菌剂，具有以下至少一种 优势：
[0158] (1)本申请的组合物或复合菌剂中，各菌株能适应自然环境，接种到污染水体中， 所选育菌株可以存活，进行代谢活动和污染水体治理。
[0159] (2)本申请的组合物或复合菌剂中，各菌株能快速生长繁殖，在接种到污染水体中 2~3天，各菌株的有效活菌数即可达到IX 105cfu/mL以上，能够达到快速治理水体污染目 的。
[0160] (3)本申请的组合物或复合菌剂中，各菌株生长迅速，能适应污染水体环境，其代 谢产物，例如乳酸、乙酸、抑菌蛋白、抗生素、淀粉酶、蛋白酶等能够抑制其他杂菌的生长，更 有利于污染水体治理的进行。
[0161] (4)本申请的组合物或复合菌剂中，各菌株配比科学合理，能够发挥各自的降解优 势。
[0162] (5)本申请的组合物或复合菌剂中，各菌株能够协同作用，降解速度增快，缩短处 理时间。
[0163] (6)本申请选育的复合菌群可以高效地产生生物絮凝剂，对于水体中的微生物菌 体和难以生物降解的颗粒可以起到显著的沉淀效果，从而达到快速净化水体的目的。
[0164] (7)本申请巧妙的将微生物菌群和水生植物进行结合，微生物菌群和水生植物相 互协同作用，促使水体中氮、磷元素含量降低，从根本上解决水体污染的问题。沉淀到底泥 中的微生物菌体，利用底泥中的污染物作为营养物质，进行生长繁殖，防止底泥污染水体。 水生植物可以为微生物提供附着点，从而保证微生物可以在水体中长期存在。
[0165] (8)本申请治理水体污染是一种高效、无害、低成本、推广性强的生物治理水体污 染的方法，可以从本质上解决水体污染问题。
[0166] (9)本申请的治理污染水体的方法同时增加了水体的生物多样性，改善了水体的 生态环境，提高了水体的自净能力。
[0167] 在一些实施方案中，本申请提供的用于治理水体污染的组合物或复合菌剂，获得 以下至少一种效果：
[0168] (1)使用本申请的组合物或复合菌剂治理污染水体后，水体中的氨氮含量、总磷含 量、C0D和色度均降低，具体数据参见实施例。其中，氨氮含量降低至少35%，总磷含量降低 至少20%，C0D降低至少20%，色度降低至少10%。
[0169] (2)使用本申请的组合物或复合菌剂与水生植物共同治理污染水体后，水体中的 氨氮含量、总磷含量、C0D和色度均显著降低，具体数据参见实施例。其中，氨氮含量降低至 少75%，总磷含量降低至少50%，C0D降低至少70%，色度降低至少60%。
[0170] 以下实施例仅用于说明而非限制本申请范围的目的。
[0171] 实施例
[0172] 实施例1
[0173] 本实施例中的污染水体的水质基本状况如下：氨氮为1.32mg/L、总磷为0.264mg/ L、C0D 为 59.8mg/L、色度为 50。
[0174] 处理时间：2014年7月
[0175] 将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳杆菌发酵培养物按 照体积比为2:1:1:1:1:2进行混合，制成复合菌剂。
[0176]准备5个塑料桶，每个塑料桶装入100升污染水体，对照组不作任何处理，其余4桶 每桶分别按照待处理污染水体体积的ο. 1 %、〇. 5%、1 %和2%加入复合菌剂，分别标记为处 理组1、处理组2、处理组3和处理组4。监测水质的频率为每5天一次，检测15天，分别进行水 体中氨氮、总磷、COD和色度的测定。
[0177] 水质监测结果见表1:
[0178] 表1不同处理组的水质监测结果
[0181] 处理结束后，处理组1中的氨氮含量降低60.91 %，总磷含量降低35.61 %，C0D降低 32.78 %，色度降低20.00 % ;处理组2的氨氮含量降低77.50 %，总磷含量降低63.26 %，COD 降低38.63%，色度降低30.00% ;处理组3的氨氮含量降低76.74%，总磷含量降低59.47%， COD降低49.50 %，色度降低40.00 % ;处理组4的氨氮含量降低68.18%，总磷含量降低 75.76%，COD降低50.50%，色度降低30.00% ;对照组的氨氮含量增加1.52%，总磷含量降 低1.51 %，COD降低8.86%，色度增加20.00% ;与对照组相比，各处理组均表现出污染水体 的治理能力，处理组2和处理3的处理效果较突出。
[0182] 实施例2
[0183] 本实施例中的污染水体的水质基本状况如下：氨氮为1.87mg/L、总磷为0.176mg/ L、C0D 为 184mg/L、色度为 70。
[0184] 处理时间：2014年8月
[0185] 将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳杆菌发酵培养物按 照体积比为2:1:1:1:1:2进行混合，制成复合菌剂。
[0186] 准备4个塑料桶，每个塑料桶装入100升污染水体，对照组不做任何处理，处理组1 只加入待处理污染水体体积0.5%的复合菌剂，处理组2只接种水生植物-凤眼蓝(水萌芦）， 处理组3加入待处理污染水体体积0.5%的复合菌剂和水生植物-凤眼蓝(水萌芦）。监测水 质的频率为每5天一次，检测15天，分别进行水体中氨氮、总磷、C0D和色度的测定。
[0187] 水质监测结果见表2:
[0188] 表2不同处理组的水质监测结果
[0190] 处理结束后，处理组1中的氨氮含量降低58.29%，总磷含量降低55.11 %，COD降低 73.46%，色度降低71.43% ;处理组2中的氨氮含量降低23.12%，总磷含量降低19.32 %， C0D降低25.81 %，色度降低42.86% ;处理组3中的氨氮含量降低77.42%，总磷含量降低 63.64%，C0D降低83.91 %，色度降低85.71 % ;对照组中的氨氮含量降低3.21 %，总磷含量 降低16.48%，C0D降低3.26%，色度不变。与对照组相比，各处理组均对污染水体具有处理 作用，在治理期间，随着时间延长，治理效果越来越明显，处理组3的治理效果最佳，处理组1 次之，处理组2较弱。复合菌剂单独治理污染水体，显示出较明显的效果;复合菌剂与水生植 物共同使用，相互协同作用，治理效果更加显著。
[0191] 实施例3
[0192] 针对四川省隆昌县莲峰公园水质严重污染的问题，利用本发明技术清除水体中的 污染物，改善水质，提高水的自净能力。莲峰公园水面约1500平方米，水深1.5~2米，温度15 ~20°C，pH值7.8,水面种植有水生植物一一凤眼蓝(水萌芦），水面有一座饭店，水体污染严 重。
[0193] 处理时间：2015年4月。
[0194] 将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳杆菌发酵培养物按 照体积比为2:1:1:1:1:2进行混合，制成复合菌剂。
[0195] 由于水面已经存在水生植物，因此不需要在水面上定植适合当地水体生长的水生 植物。
[0196] 首先在水池中做一个围挡将水面分成两部分，处理组和对照组。处理组将复合菌 剂采用无菌水稀释10倍，得到复合菌剂稀释液，将复合菌剂稀释液按照待处理污染水体体 积的0.5%通过喷雾器均匀撒入水生植物生长区水面;对照组不做任何处理。监测水质的频 率为每5天一次，检测30天，分别进行水体中氨氮、总磷、C0D和色度的测定。
[0197] 水质监测结果见表3:
[0198] 表3莲峰公园不同时间水质监测结果
[0199]
[0200] 处理结束时，处理组中的氨氮含量降低82.04 %，总磷含量降低60.58 %，C0D降低 73.14%，色度降低75.00 %;对照组中的氨氮含量升高11.24%，总磷含量升高3.30%，C0D 升高24.95%，色度不变。处理5天时，处理组的水体中的氨氮含量、总磷含量、COD和色度已 经明显降低，相对于对照组，处理组有效地清除了水体中的污染物，改善了水质，提高了水 体的自净能力。
[0201] 实施例4
[0202] 针对四川省隆昌县北关景区池水污染的问题，利用本发明技术清除水体中的污染 物，改善水质，提高水的自净能力。北关景区水面约有450平方米，水深0.5~0.8米，pH值 7.4,处理期间温度15~20°C，水体污染严重，水面存在水生植物凤眼蓝(水萌芦）。
[0203] 处理时间：2015年6月15日。
[0204]将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物、放射型根瘤菌发酵培养物、解淀粉芽孢杆菌发酵培养物和植物乳杆菌发酵培养物按 照体积比为2:1:1:1:1:2进行混合，制成复合菌剂。
[0205]由于水面已经存在水生植物，因此不需要在水面上定植适合当地水体生长的水生 植物。
[0206]首先在水池中做一个围挡将水面分成两部分，处理组和对照组。处理组将复合菌 剂采用无菌水稀释10倍，得到复合菌剂稀释液，将复合菌剂稀释液按照待处理污染水体体 积的0.5%通过喷雾器均匀撒入水生植物生长区水面;对照组不做任何处理。监测水质的频 率为每5天一次，检测30天，分别进行水体中氨氮、总磷、COD和色度的测定。
[0207]水质监测结果见表4:
[0208] 表4四川省隆昌县北关景区不同时间水质监测结果
[0209]
[0211] 处理结束时，处理组中的氨氮含量降低81.82 %，总磷含量降低56.77%，C0D降低 76.90%，色度降低66.67% ;对照组中的氨氮含量降低0.75%，总磷含量降低2.78%，C0D降 低2.64%，色度降低14.29%。处理5天时，处理组的水体中的氨氮含量、总磷含量、C0D和色 度已经明显降低，相对于对照组，处理组有效地清除了水体中的污染物，改善了水质，提高 了水体的自净能力。
[0212] 实施例5
[0213]本实施例中的污染水体的水质基本状况如下：氨氮为1.87mg/L、总磷为0.176mg/ L、C0D 为 184mg/L、色度为 70。
[0214] 处理时间：2014年8月
[0215] 将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物、放射型根瘤菌发酵培养物和解淀粉芽孢杆菌发酵培养物按照体积比为2:1:1:1:1进 行混合，制成复合菌剂。
[0216] 准备2个塑料桶，每个塑料桶装入100升污染水体，对照组不作任何处理，处理组按 照待处理污染水体体积的0.5%加入复合菌剂。监测水质的频率为每5天一次，检测10天，分 别进行水体中氨氮、总磷、C0D和色度的测定。
[0217] 水质监测结果见表5:
[0218] 表5不同处理组的水质监测结果
[0219]
[0221] 处理结束时，处理组中的氨氮含量降低51.34%，总磷含量降低36.36%，COD降低 45.11 %，色度降低28.57% ;对照组中的氨氮含量降低11.76%，总磷含量降低5.11 %，C0D 降低10.33%，色度不变。加入本实施例的复合菌剂，相对于对照组，处理组对污染水体具有 修复效果。
[0222] 实施例6
[0223] 本实施例中的污染水体的水质基本状况如下：氨氮为1.87mg/L、总磷为0.176mg/ L、C0D 为 184mg/L、色度为 70。
[0224] 处理时间：2014年7月
[0225] 将巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培养物、放射型根瘤菌发酵培 养物和解淀粉芽孢杆菌发酵培养物按照体积比为1:1:1:1进行混合，制成复合菌剂。
[0226] 准备2个塑料桶，每个塑料桶装入100升污染水体，对照组不作任何处理，处理组按 照待处理污染水体体积的〇 . 5 %加入复合菌剂，。监测水质的频率为每5天一次，检测10天， 分别进行水体中氨氮、总磷、C0D和色度的测定。
[0227] 水质监测结果见表6:
[0228] 表6不同处理组的水质监测结果
[0229]
[0230] 处理结束时，处理组中的氨氮含量降低37.97 %，总磷含量降低27.27%，C0D降低 33.70%，色度降低14.29% ;对照组中的氨氮含量降低11.76%，总磷含量降低5.11 %，C0D 降低10.33%，色度不变。加入本实施例的复合菌剂，相对于对照组，处理组对污染水体具有 治疗的效果。
[0231 ] 实施例7
[0232] 本实施例中的污染水体的水质基本状况如下：氨氮为1.87mg/L、总磷为0.176mg/ L、C0D 为 184mg/L、色度为 70。
[0233] 处理时间：2014年8月
[0234] 将热带假丝酵母发酵培养物、巨大芽孢杆菌发酵培养物、嗜温鞘氨醇杆菌发酵培 养物和解淀粉芽孢杆菌发酵培养物按照体积比为2:1:1:1进行混合，制成复合菌剂。
[0235] 准备2个塑料桶，每个塑料桶装入100升污染水体，对照组不作任何处理，处理组按 照待处理污染水体体积的0.5%加入复合菌剂。监测水质的频率为每10天一次，检测20天， 分别进行水体中氨氮、总磷、C0D和色度的测定。
[0236] 水质监测结果见表7:
[0237] 表7不同处理组的水质监测结果
[0238]
[0239] 处理结束时，处理组中的氨氮含量降低42.25 %，总磷含量降低22.73%，C0D降低 23.37%，色度降低14.29% ;对照组中的氨氮含量降低12.83%，总磷含量降低5.11 %，C0D 降低4.89 %，色度不变。加入本实施例的复合菌剂，相对于对照组，处理组对污染水体具有 治理的效果。
[0240] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种组合物，包含假丝酵母(Candida)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、嗜温 鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根瘤菌（Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌（Bacillus amyloliquefaciens)和植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)中至少四种或至少五种，例如，巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、 解淀粉芽孢杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌，假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和解淀粉芽 孢杆菌，或，假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌； 优选地包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和 植物乳杆菌； 任选地，所述假丝酵母为热带假丝酵母（Candi da tropical is)、解脂假丝酵母 (Candida lipolytica)或产H元假丝酵母(Candida utilis)。2. -种复合菌剂，其成分包含假丝酵母（Candida)、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium)、嗜温鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium thalpophilum)、放射型根瘤菌 (Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽抱杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和植物乳杆 菌(Lactobaci Ilus plantarum)中至少四种或至少五种，例如，巨大芽孢杆菌、放射型根瘤 菌、解淀粉芽孢杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌，假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和解淀 粉芽孢杆菌，或，假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆 菌;优选地包含假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌 和植物乳杆菌或由上述六种菌株组成;或者包含上述至少四种或至少五种菌株或六种菌株 的培养物； 任选地，所述假丝酵母为热带假丝酵母（Candi da tropical is)、解脂假丝酵母 (Candida lipolytica)或产H元假丝酵母(Candida utilis)。3. 如权利要求2所述复合菌剂，其中所述复合菌剂中的总有效活菌数多I X 108cfu/mL; 或者，以所述菌株培养物的体积计，其中所述复合菌剂中所述假丝酵母培养物、巨大芽 孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌培养物和植 物乳杆菌培养物中至少四种、至少五种或六种的体积份为： 假丝酵母培养物3~6 巨大芽孢杆菌培养物1~3 嗜温鞘氨醇杆菌培养物1~3 放射型根瘤菌培养物1~3 解淀粉芽孢杆菌培养物1~3 植物乳杆菌培养物6~10， 优选地，上述巨大芽孢杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌培养物和嗜 温鞘氨醇杆菌培养物之间的体积比为1:1:1:1; 优选地，上述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物和解淀粉 芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1; 优选地，上述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型 根瘤菌培养物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1:1; 优选地，上述六种菌株培养物之间的体积比为2:1:1:1:1:2; 任选地，所述培养物包含菌株和载体； 任选地，所述假丝酵母培养物中所述假丝酵母的有效活菌数为多I X IO7CfVmL;所述巨 大芽孢杆菌培养物中所述巨大芽孢杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述嗜温鞘氨醇 杆菌培养物中所述嗜温鞘氨醇杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述放射型根瘤菌培 养物中所述放射型根瘤菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述解淀粉芽孢杆菌培养物中 所述解淀粉芽孢杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述植物乳杆菌培养物中所述植物 乳杆菌的有效活菌数为彡I X 108cfu/mL; 任选地，所述载体包含液体培养基、半固体培养基或固体培养基。4. 一种复合菌剂的制备方法，包括： 将假丝酵母（〇311(1丨(13)、巨大芽孢杆菌（1^〇；[11118 1116〖3丨61'；[11111)、嗜温鞘氨醇杆菌 (Sphingobacterium thalpophiIum)、放射型根瘤菌(Rhizoblum radiobacter)、解淀粉芽 抱杆菌（BaciIlus amyIoIiquefaciens)和植物乳杆菌（LactobaciIlus pIantarum)中至少 四种或至少五种，例如，巨大芽孢杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和嗜温鞘氨醇杆菌， 假丝酵母、巨大芽孢杆菌、嗜温鞘氨醇杆菌和解淀粉芽孢杆菌，或，假丝酵母、巨大芽孢杆 菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌和解淀粉芽孢杆菌;优选地包含假丝酵母、巨大芽孢杆 菌、嗜温鞘氨醇杆菌、放射型根瘤菌、解淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌，分别进行培养;以及获 得所述菌株的各自的培养物，并将所述培养物按照上述组合进行混合，得到所述复合菌剂； 任选地，上述培养为液体培养、半固体培养或固体培养。5. 如权利要求4所述的方法，其中以所述菌株的各自的培养物的体积计进行混合，混合 时所述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型根瘤菌培养 物、解淀粉芽孢杆菌培养物和植物乳杆菌培养物中至少四种、至少五种或六种的体积份为： 假丝酵母培养物3~6 巨大芽孢杆菌培养物1~3 嗜温鞘氨醇杆菌培养物1~3 放射型根瘤菌培养物1~3 解淀粉芽孢杆菌培养物1~3 植物乳杆菌培养物6~10， 优选地，上述巨大芽孢杆菌培养物、放射型根瘤菌培养物、解淀粉芽孢杆菌培养物和嗜 温鞘氨醇杆菌培养物之间的体积比为:1:1:1:1; 优选地，上述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物和解淀粉 芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1; 优选地，上述假丝酵母培养物、巨大芽孢杆菌培养物、嗜温鞘氨醇杆菌培养物、放射型 根瘤菌培养物和解淀粉芽孢杆菌培养物之间的体积比为2:1:1:1:1; 优选地，上述六种菌株培养物之间的体积比为2:1:1:1:1:2; 任选地，所述培养物包含菌株和载体； 任选地，所述假丝酵母培养物中所述假丝酵母的有效活菌数为多IX IO7CfVmL;所述巨 大芽孢杆菌培养物中所述巨大芽孢杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述嗜温鞘氨醇 杆菌培养物中所述嗜温鞘氨醇杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述放射型根瘤菌培 养物中所述放射型根瘤菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述解淀粉芽孢杆菌培养物中 所述解淀粉芽孢杆菌的有效活菌数为多I X 108cfu/mL;所述植物乳杆菌培养物中所述植物 乳杆菌的有效活菌数为彡I X 108cfu/mL; 任选地，所述复合菌剂中的总有效活菌数彡I X 108cfu/mL; 任选地，所述载体包含液体培养基、半固体培养基或固体培养基。6. -种治理或辅助治理水体污染的方法，包括： 将权利要求1所述组合物，或权利要求2或3所述复合菌剂接种到待处理污染水体中进 行治理至少5天、至少10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天，优选为至少10天、至 少15天、至少20天或至少30天； 优选地，所述污染水体是指富营养化的湖泊、水库或人工池塘。7. 如权利要求6所述的方法，其中所述方法包括： 将权利要求1所述组合物，或权利要求2或3所述复合菌剂与水生植物共同使用治理待 处理污染水体至少5天、至少10天、至少15天，至少20天、至少25天或至少30天，优选为至少 10天、至少15天、至少20天或至少30天； 优选地，水生植物为浮水植物、挺水植物或沉水植物； 更优选地，浮水植物为凤眼蓝、睡莲、浮萍或满江红;挺水植物为芦、蒲草、荸#、莲、水 芹、茭白荀、荷花或香蒲;沉水植物为菹草、苦草、金鱼藻、狐尾藻或黑藻。8. 如权利要求6或7所述的方法，其中所述组合物或所述复合菌剂相对于所述待处理污 染水体的接种量为至少〇 .01%、至少0.05%、至少0.1%、至少0.5%、至少1%、至少2%、至 少3%或至少5%v/v，优选为至少0.05%、至少0.1%、至少0.5%、至少1%或至少2%v/v。9. 权利要求1所述组合物，或权利要求2或3所述复合菌剂在生态环境修复中的应用。
【文档编号】C12R1/41GK105886437SQ201610307698
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】陈五岭, 黄敏刚, 谷亚楠
【申请人】陈五岭