一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法
【专利摘要】本发明涉及一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法，所述方法将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱提酸沉法提取蛋白质，过滤、酶解，再将蛋白酶解液依次经过微滤膜与超滤膜高效分离纯化，最后将蛋白液和酶解液浓缩干燥，得到塔拉蛋白粉和塔拉多肽粉。本发明的方法操作简便，高收率低成本，产品质量稳定，工艺绿色环保，适合大规模生产。
【专利说明】
-种塔拉蛋白粉和多化粉及其生产方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种塔拉蛋白粉及其多肤粉的生产方法，属于食品深加工领域。
【背景技术】
[0002] 塔拉(Caesalpinia spinose Kuntze)又名刺云实(Tara)，系苏木科云实属植物， 主要分布主要在南美洲西北部的秘鲁、厄瓜多尔、哥伦比亚等国家，盛产于秘鲁。它耐干热、 速生、常绿、四季开花，是绿化荒山的优良树种之一。它的寿命长达50余年，盛产期约20年， 栽后3-4年亩产豆芙可达300余千克。是花工少，投资小，收益大，一劳多益的优良经济林树 种。上世纪90年代初，中国林业科学研究院资源昆虫研究所从南美引进了替代五倍子生产 没食子单宁及其系列产品的补充原料植物-塔拉，并在云南省干热、干暖河谷地区种植成 功。至2006年，云南已发展塔拉近1.5万亩，贵州、四川、广西及海南等省区也开始引种。塔拉 豆芙含塔拉单宁55-61%，可生产上百种医药和化工产品；其种仁含半乳葡萄糖甘露聚糖约 34%，可生产在食品、医药、纺织、造纸和石油钻井等方面有重要用途的塔拉胶，同时种仁中 含有13%脂肪酸(亚油酸占总脂肪酸的52-54%)。研究者从塔拉豆中提取了豆酱醇和谷酱 醇(两醇约占酱醇总量的90%，前者是生产云大120的主要原料，后者可生产降血脂药，价值 达1000余美元/千克）。该豆用途广，且无毒可食，是一种珍贵木本豆类。
[0003] 植物蛋白对各种年龄层次的人都是有益的，对青少年更是生长发育、增强体质不 可缺少的物质。对于中年人来说，蛋白质能使脑力劳动者增强记忆，使体力劳动者增强耐 力。对于老年人来说，补充优质蛋白质可推迟衰老，防治多种老年病的发生。随着人们生活 水平的提高，对蛋白质的需求量也不断增加。据研究表明拉豆中含有13% W上的蛋白质，是 一种重要的植物蛋白来源。由于塔拉豆中含有较多的半乳葡萄糖甘露聚糖，使用碱液提取 蛋白质时，也溶解了大量的半乳葡萄糖甘露聚糖，造成碱提液过于黏稠，加酸无法使蛋白质 沉淀下来，是目前塔拉蛋白提取的主要难点。为解决此技术问题，本专利提供了塔拉蛋白的 制备工艺，同时也提供了获得比原蛋白在营养、功能性及生物活性上更加优良的塔拉多肤 的制备方法。本专利弥补了塔拉蛋白及其多肤在制备工艺上的欠缺。
【发明内容】
[0004] 本发明公开了一种塔拉蛋白粉和多肤粉及其生产方法，将塔拉豆粉碎后，使用特 殊技术获得塔拉蛋白粉，并且通过一定工艺酶解后，获得具有生物活性的短肤。该生产方法 是经过长期的生产实践和科学研究而总结出来的，该工艺的特点在于工艺简单、经济，绿色 环保，尤其适用于大规模生产。
[0005] 为达到上述目的，本发明是通过下述方法实现的：
[0006] 本发明将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱提酸沉法提取蛋白质，离屯、过滤，得到蛋白沉 淀物;将蛋白沉淀物加水复溶、酶解，依次经过微滤膜与超滤膜高效分离纯化、浓缩，最后将 蛋白沉淀物和酶解浓缩液干燥，得到淡黄色塔拉蛋白粉和多肤粉。塔拉蛋白的收率在5~ 8wt%，含量大于70wt% ;塔拉多肤的收率在4~8wt%，肤含量不少于70wt% ,95% W上肤分 子量分布在I SOODalton W下。
[0007]其技术方案如下：
[000引（1)将塔拉豆粉碎，过40目W上筛网从而获得塔拉豆粉。将一定量的塔拉豆粉与纯 化水按质量比为1:10~1:20混合，加入豆粉质量的0.1%~1%的聚糖降解酶，调节抑至5~ 8，恒溫40°C揽拌1~化，完成后，离屯、过滤，滤液待用；
[0009] (2)将步骤（1)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节抑至8~10， 恒溫40°C提取1~化，提取完成后离屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；
[0010] (3)合并步骤（1)和（2)中的滤液，调节抑为3~5，静置1~化，弃去上清液，沉淀物 干燥后，得到纯度较高的淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5~8wt%，含量为70%wtW上；
[0011] (4)将步骤(3)中蛋白沉淀物中加入体积比为1:5~1:15的纯化水，揽拌均匀复溶， 将蛋白复溶液加热至40~55°C，加入塔拉豆粉质量的0.5~2%蛋白酶，揽拌酶解4~化后， 煮沸灭活10~30min，离屯、，上清液即为蛋白酶解液；
[0012] (5)将蛋白酶解液使用孔径为0.1~0.5WI1的微滤膜进行过滤，透过液再经2000~ 20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到淡黄色塔拉多肤粉，产率可达4~ 8wt %，并测得肤含量在70wt % W上，95 % W上肤分子量分布在1 SOODalton W下。
[0013] 所述的碱提酸沉法可包括连续逆流提取法和普通提取法。
[0014] 所述的聚糖降解酶选自食品级的0-葡聚糖酶(酶活力>2000U/g)和甘露聚糖酶 (酶活力>2000U/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用0-葡聚糖酶。
[001引所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力>20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力 >40万u/g)、渡萝蛋白酶(酶活力>30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力>20万u/g)、胃蛋白酶 (酶活力>50万u/g)、膜酶(酶活力>3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用中 性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
[0016] 所述的浓缩方法可W为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩。
[0017] 所述的干燥方法可W为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
[001引所述的蛋白粉的检测方法为国家标准GB 5009.5-2010中的凯氏定氮法。
[0019] 所述的多肤含量检测方法为国家标准GB/T 22492-2008附录B中的多肤测定法。
[0020] 所述的多肤相对分子量分布的检测方法为国家标准GB/T 22492-2008附录A中的 肤相对分子质量分布的测定法。
[0021] 优选地，本发明提供了一种塔拉多肤粉，采用GB/T 22492-2008附录B中的多肤含 量检测方法和GB/T 22492-2008附录A中的肤相对分子质量分布的测定法，测得肤含量在 70wt % W上，95 % W上肤分子量分布在1500化1 ton W下，其分子量分布如下所示：
[0022] 分子量化Iton分布
[0023]
[0024] 数均分子量范围：18~1300 [00巧]重均分子量范围：40~1300。
[0026] 优选地，所述塔拉多肤粉的制备方法，包括下述步骤:将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱 提酸沉法提取蛋白质，离屯、过滤，得到蛋白沉淀物;将蛋白沉淀物加水复溶、酶解，依次经过 微滤膜与超滤膜高效分离纯化、浓缩，酶解浓缩液干燥，得到多肤粉;其中所述碱提酸沉法 为连续逆流提取法或普通提取法。
[0027] 优选地，所述的制备方法，还包括下述步骤：
[0028] (1)将塔拉豆粉碎，过40目W上筛网从而获得塔拉豆粉；
[0029] (2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1:20混合，加入豆粉质量的 0.1 %~1 %的聚糖降解酶，调节pH至5~8，恒溫40°C揽拌1~化，完成后，离屯、过滤，滤液待 用；
[0030] (3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节抑至8~10， 恒溫40°C提取1~化，提取完成后离屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；
[0031] (4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节抑为3~5,静置1~化，弃去上清液，得到蛋 白沉淀物；
[0032] (5)将步骤(4)中的蛋白沉淀物中加入体积比为1:5~1:15的纯化水，揽拌均匀复 溶；
[0033] (6)将步骤(5)中的蛋白复溶液加热至40~55°C，加入塔拉豆粉质量的0.5~2%蛋 白酶，揽拌酶解4~化后，煮沸灭活10~30min，离屯、，上清液即为蛋白酶解液；
[0034] (7)将蛋白酶解液使用孔径为0.1~0.5皿的微滤膜进行过滤，透过液再经2000~ 20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到淡黄色塔拉多肤粉，产率可达4~ Swt % O
[0035] 优选地，所述的聚糖降解酶选自食品级的0-葡聚糖酶(酶活力>2000U/g)和甘露 聚糖酶(酶活力>2000U/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用0-葡聚糖酶。
[0036] 优选地，所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力>20万u/g)、木瓜蛋白酶 (酶活力>40万u/g)、渡萝蛋白酶(酶活力>30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力>20万u/g)、胃 蛋白酶(酶活力>50万u/g)、膜酶(酶活力>3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选地 使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
[0037] 优选地，所述的浓缩方法可W为膜浓缩、减压浓缩或常压浓缩;所述的干燥方法可 W为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥或冷冻干燥。
[0038] 优选地，本发明还提供了一种塔拉蛋白粉，其是通过下述方法制备得到：
[0039] (I)将塔拉豆粉碎，过40目W上筛网从而获得塔拉豆粉；
[0040] (2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1: 20混合，加入豆粉质量的 0.1%~1%的聚糖降解酶，调节抑至5~8,恒溫40°C揽拌1~化，完成后，离屯、过滤，滤液待 用；
[0041 ] (3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节抑至8~10， 恒溫40°C提取1~化，提取完成后离屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；
[0042] (4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节抑为3~5,静置1~化，弃去上清液，得到蛋 白沉淀物，沉淀物干燥后，得到淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5~Swt %，含量为70 %Wt W上。
[0043] 优选地，所述塔拉蛋白粉的制备方法，其于包括下述步骤：
[0044] (1)将塔拉豆粉碎，过40目W上筛网从而获得塔拉豆粉；
[0045] (2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1: 20混合，加入豆粉质量的 0.1%~1%的聚糖降解酶，调节抑至5~8,恒溫40°C揽拌1~化，完成后，离屯、过滤，滤液待 用；
[0046] (3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节抑至8~10， 恒溫40°C提取1~化，提取完成后离屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；
[0047] (4)合并步骤(2)和（3)中的滤液，调节抑为3~5,静置1~化，弃去上清液，得到蛋 白沉淀物，沉淀物干燥后，得到淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5~Swt %，含量为70 %Wt W上， 所述的蛋白粉的检测方法为国家标准GB 5009.5-2010中的凯氏定氮法。
[0048] 优选地，本发明还提供了一种组合物，其含有所述塔拉多肤粉或含有所述塔拉蛋 白粉，药物或食品上可接受的助剂。
[0049] 所述组合物的剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、 口服溶液或口服混悬液。
[0050] 所述的塔拉多肤粉可用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或 保健品的应用。
[0051] 所述的塔拉多肤粉的抗氧化活性使用自由基清除法(DPPH、ABTS)和超氧阴离子自 由基清除法(SRSA)=种方法得W验证，测试结果表明塔拉多肤具有较好的抗氧化活性。
【附图说明】
[0052] 图1:中性蛋白酶酶解后肤液相色谱图；
[0053] 图2:碱性蛋白酶酶解后肤液相色谱图。 实施例
[0054] 下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例所述方法 仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明制备方 法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例中用到的所有原料和溶剂均购自 Sigma Biochemical and Organic Compounds for 民esearch and Diagnostic Clinical 民eagents公司D
[(K)日日]实施例1:
[0056]将塔控豆（云南易口药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目W上筛网从而获 得塔拉豆粉。将IOOkg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10混合，加入豆粉质量的0.1 %的(6- 葡聚糖酶（酶活力3000U/g)，调节pH至6,恒溫40°C提取化；提取完成后，离屯、过滤，滤液待 用;再将滤渣与其质量比为1:15的纯化水混合，调节抑至9，恒溫40°C提取化;提取完成后离 屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并W上待用滤液，调节抑为3.5,静置化，弃去上清液， 不断揽拌沉淀物并加入纯化水W调节固含至7wt%，进行喷雾干燥，进口溫度为150°C，出口 溫度为50°C，得到纯度较高的淡黄色塔拉蛋白，产率为5.6%，使用凯氏定氮法测得蛋白含 量为73.9%。
[0化7]实施例2:
[0058] 将塔拉豆（云南易口药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目W上筛网从而获 得塔拉豆粉。将IOOkg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10混合，加入豆粉质量的0.1 %的0- 葡聚糖酶（酶活力3000U/g)，调节pH至6,恒溫40°C提取化；提取完成后，离屯、过滤，滤液待 用;再将滤渣与其质量比为1:15的纯化水混合，调节抑至9，恒溫40°C提取化;提取完成后离 屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并W上待用滤液，调节抑为3.5,静置化，弃去上清液， 往沉淀物中加入体积比为1:10的纯化水，揽拌均匀得到蛋白复溶液。将蛋白复溶液加热至 45 °C，加入塔拉豆粉质量的1 %中性蛋白酶(酶活力为30万u/g)，恒定抑为7，揽拌酶解4h后， 煮沸灭活30min，离屯、，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.5皿的微滤膜进 行过滤，透过液再经5000化1 ton超滤膜处理后，透过液在50°C下浓缩至固含为6. Swt %时， 进行喷雾干燥，进口溫度为160°C，出口溫度为65°C，得到高纯度、低分子量的淡黄色塔拉多 肤粉，产率6.2%，测得肤含量为72. 14wt % (如表1)，至少96.02%肤分子量分布在 ISOODaltonW下（如表 2)。
[0059] 表1中性蛋白酶所制备得塔拉肤粉中多肤的百分含量
[0060]
[0061]
[0062]
[0063] 12 实施例3: 2 将塔拉豆（云南易口药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目W上筛网从而获 得塔拉豆粉。将IOOkg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10混合，加入豆粉质量的0.1 %的0- 葡聚糖酶（酶活力3000U/g)，调节pH至6,恒溫40°C提取化；提取完成后，离屯、过滤，滤液待 用;再将滤渣与其质量比为1:15的纯化水混合，调节抑至9，恒溫40°C提取化;提取完成后离 屯、过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并W上待用滤液，调节抑为3.5,静置化，弃去上清液， 往沉淀物中加入体积比为1:10的纯化水，揽拌均匀得到蛋白复溶液。将蛋白复溶液加热至 45 °C，加入塔拉豆粉质量的1 %碱性蛋白酶(酶活力为50万u/g)，恒定抑为8，揽拌酶解地后， 煮沸灭活30min，离屯、，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.5皿的微滤膜进 行过滤，透过液再经5000化Iton超滤膜处理后，透过液在50°C下浓缩至固含为6wt %时，进 行喷雾干燥，进口溫度为160°C，出口溫度为65°C，得到高纯度、低分子量的淡黄色塔拉多肤 粉，产率5.1 %，测得肤含量为71.50wt% (如表3)，至少96.50%肤分子量分布在150(E)alton
[0067] W下(如表4)。[0066] 表3碱性蛋白酶所制备得塔抢化粉中《化的百分含量
[006引
[0069]
[0070] 活性实施例4:
[0071] 1. DPPH自由基清除实验
[0072] 1.1 DPPH乙醇溶液的配制：精密称取DPPH 4mg，置于IOOmL栋色容量瓶中，加入 50mL乙醇，超声30s，用乙醇定容至刻度，摇匀，待用。本品须现配现用。
[0073] 1.2供试品溶液的配制:配制Img/mL的塔拉多肤粉溶液，待测。
[0074] 1.3操作步骤:准确吸取2mL供试品溶液和2mL DPPH溶液混合均匀;准确吸取2mL供 试品溶液和2mL乙醇混合均匀；准确吸取2mL DPPH溶液和2mL乙醇混合均匀，室溫放置 SOmin，在515nm波长处测定吸光度，并根据W下计算公式计算自由基清除率：
[0075] IR% = [l-(Ai-Aj)/A0]*100%;
[0076] 其中，Ai表示待测溶液和DPP取昆合后溶液的吸光度；
[0077] Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
[0078] AO表示DPPH和溶剂混合后溶液的吸光度。
[0079] 2.ABTS+自由基清除实验
[0080] 2.1 PBS缓冲液的配制：称取氯化钢Sg，氯化钟0.2g，憐酸二氨钟0.24g，十二水合 憐酸氨二钢3.62g，置于1000 mL烧杯中，加入SOOmL蒸馈水，揽伴使其溶解，用盐酸或氨氧化 钢调节抑至7.4，转移至1000 mL容量瓶中，加蒸馈水稀释至刻度，摇匀，待用。
[0081 ] 2.2 ABTS+胆存溶液的配制:精密称取ABTS+78mg左右，置于20mL栋色容量瓶中，加 入15mL蒸馈水，超声5min，用蒸馈水定容至刻度，摇匀。精密称取过硫酸钟76mg左右，置于 2mL栋色容量瓶中，加入ImL蒸馈水，超声使其溶解，用蒸馈水定容至刻度，摇匀。精确吸取 352化过硫酸钟溶液加入至ABTS溶液中，摇匀，静置过夜。
[0082] 2.3 ABTS+工作溶液的配制：精确吸取胆存溶液ImL,加入65mL左右PBS缓冲液，摇 匀。
[0083] 2.4供试品溶液的配制:配制Img/mL的塔拉多肤粉溶液，待测。
[0084] 2.5操作步骤:准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL ABTS工作溶液混合均匀；准确吸 取0.5mL供试品溶液和5mL PBS缓冲液混合均匀；准确吸取5mL ABTS工作溶液和0.5mL PBS 缓冲液混合均匀，立即在734nm处测定吸光度，并根据W下公式计算自由基清除率：
[0085] IR% = [l-(Ai-Aj)/A0]*100%;
[0086] 其中，Ai表示待测溶液和ABTS混合后溶液的吸光度；
[0087] Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
[008引 AO表示ABTS和溶剂混合后溶液的吸光度。
[0089] 3.SRSA超氧阴离子自由基清除实验
[0090] 3.1 O.lmoL/L PBS缓冲液(pH 7.4)的配制：称取氯化钢80旨，氯化钟2旨，憐酸二氨 钟2.4g，S水合憐酸氨二钟23.1 g，置于1000 mL烧杯中，加入600mL蒸馈水，揽拌使其溶解，用 盐酸或氨氧化钢调节抑至7.2，转移至1000 mL容量瓶中，加蒸馈水稀释至刻度，摇匀，待用。
[0091] 3.2 150皿oL/LNBT溶液的配制:准确称取NBT 12.5mg置于100血栋色容量瓶中，加 入蒸馈水，超声使其溶解，并用蒸馈水定容至刻度，摇匀，即得。
[0092] 3.3 60皿oL/L PMS溶液的配制:准确称取PMS 18.Smg，置于1000 mL的容量瓶中，加 入蒸馈水，超声使其溶解，并用蒸馈水定容至刻度，摇匀，即得。
[0093] 3.4 46祉moL/L NADH溶液的配制:准确称取NADH 33.9mg，置于IOOmL的容量瓶中， 加入蒸馈水，超声使其溶解，并用蒸馈水定容至刻度，摇匀，即得。
[0094] 3.5供试品溶液的配制:配制Img/mL的塔拉多肤粉溶液，待测。
[0095] 3.6工作液的配制：取1血0.1111〇171?85缓冲液(9职.4)于容量瓶中，加入1血150 皿oL/L NBT溶液，加入2mL 46祉moL/L NADH溶液，加入ImL 60皿oL/L PMS溶液，揽拌均匀， 25°C下反应5min，与560nm波长处测定其吸光度值。
[0096] 3.7操作步骤:准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL上述工作溶液混合均匀;准确吸取 0.5mL供试品溶液和5mL蒸馈水混合均匀;准确吸取5mL上述工作溶液和0.5mL蒸馈水混合均 匀，立即在560nm处测定吸光度，并根据W下公式计算自由基清除率：
[0097] IR% = [l-(Ai-Aj)/A0]*100%;
[009引其中，Ai表示待测溶液和SRSA混合后溶液的吸光度；
[0099] Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
[0100] AO表示SRSA和溶剂混合后溶液的吸光度。
[0101] 分别配制中性蛋白酶解产品和碱性蛋白酶解产品浓度为Img/mL，W没食子酸为阳 性对照(浓度为Img/mL)，测试结果如下表所示：
[0102] 表5塔拉多肤粉抗氧化活性测试结果
[0103]
[0104] 由表5可知，两种酶解所得的塔拉多肤肤均有较好的抗氧化活性，在相同浓度下中 性蛋白酶的酶解产品的抗氧化活性稍高于碱性蛋白酶的酶解产品，但相差不大，可见所需 生物酶的种类不同对产品的活性影响不大。由此可知，塔拉多肤是具有开发潜力的新资源 食品和药品，因此塔拉多肤有可能防止人体中细胞老化、改善记忆力、延缓衰老、保护屯、血 管、防止老年痴呆等作用，更深层的生物活性正在研究之中。
【主权项】
1. 一种塔拉多肽粉，其特征在于:采用GB/T 22492-2008附录B中的多肽含量检测方法 和GB/T 22492-2008附录A中的肽相对分子质量分布的测定法，测得肽含量在70wt %以上， 其中95%以上分布在1500Dalton分子量以下，其分子量分布如下所不： 分子量Dal ton分布数均分子量范围：18~1300 重均分子量范围：40~1300。2. 权利要求1所述塔拉多肽粉的制备方法，其特征在于包括下述步骤:使用碱提酸沉法 得到蛋白沉淀物;蛋白沉淀物酶解，分离纯化得到多肽粉;其中所述碱提酸沉法为连续逆流 提取法或普通提取法。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于包括下述步骤： (1) 将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉； (2) 将塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1: 20混合，加入豆粉质量的0.1 %~1 %的 聚糖降解酶，调节pH至5~8,恒温40°C搅拌1~2h，完成后，离心过滤，滤液待用； (3) 将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节pH至8~10,恒温 40 °C提取1~2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用； (4) 合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3~5，静置1~2h，弃去上清液，得到蛋白沉 淀物； (5) 将步骤(4)中的蛋白沉淀物中加入体积比为1:5~1:15的纯化水，搅拌均匀形成蛋 白复溶液； (6) 将步骤（5)中的蛋白复溶液加热至4 0~5 5 °C，加入塔拉豆粉质量的0.5~2 %蛋白 酶，搅拌酶解4~6h后，煮沸灭活10~30min，离心，上清液即为蛋白酶解液； (7) 将蛋白酶解液使用孔径为0.1~0.5μπι的微滤膜进行过滤，透过液再经2000~ 20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到塔拉多肽粉。4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于:所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压 浓缩或常压浓缩;所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥或冷冻干燥。5. -种塔拉蛋白粉，其特征在于是通过下述方法制备得到： (1) 将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉； (2) 将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1:20混合，加入豆粉质量的0.1% ~1%的聚糖降解酶，调节pH至5~8,恒温40°C搅拌1~2h，完成后，离心过滤，滤液待用； (3) 将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节pH至8~10,恒温 40 °C提取1~2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用； (4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3~5，静置1~2h，弃去上清液，得到蛋白沉 淀物，沉淀物干燥后，得到塔拉蛋白粉。6. 权利要求5所述塔拉蛋白粉的制备方法，其特征在于包括下述步骤： (1) 将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉； (2) 将塔拉豆粉与纯化水按质量比为1:10~1: 20混合，加入豆粉质量的0.1 %~1 %的 聚糖降解酶，调节pH至5~8,恒温40°C搅拌1~2h，完成后，离心过滤，滤液待用； (3) 将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1:10~1:20的纯化水混合，调节pH至8~10,恒温 40 °C提取1~2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用； (4) 合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3~5，静置1~2h，弃去上清液，得到蛋白沉 淀物，沉淀物干燥后，得到塔拉蛋白粉。7. 根据权利要求3或6所述的制备方法，其特征在于:所述的聚糖降解酶选自食品级的 葡聚糖酶(酶活力多2000U/g)和甘露聚糖酶(酶活力多2000U/g)中的一种或者它们的混 合物，优选使用葡聚糖酶;所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力多20万u/g)、 木瓜蛋白酶(酶活力多40万u/g )、菠萝蛋白酶(酶活力多30万u/g )、碱性蛋白酶(酶活力多20 万u/g)、胃蛋白酶(酶活力多50万u/g)、胰酶(酶活力多3000u/g)中的一种或者它们的混合 物，优选使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。8. -种组合物，其特征在于:含有权利要求1所述的塔拉多肽粉或含有权利要求6所述 的塔拉蛋白粉，以及药物或食品上可接受的助剂。9. 根据权利要求8所述的组合物，其特征在于：其剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、 肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、口服溶液或口服混悬液。10. 权利要求1所述的塔拉多肽粉可以用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的 药物、食品或保健品的用途。
【文档编号】A23L33/185GK105925648SQ201610328837
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年5月17日
【发明人】王昭日, 刘明川, 杨胜杰, 金志强, 张丽, 钟少达, 翁玲玲
【申请人】杏辉天力（杭州）药业有限公司