巧光测定。通过调整30mmol/L憐酸盐缓冲溶液的抑 为4. 0~7. 5,研究抑值对巧光巧灭效率的影响。结果如图6所示，抑值在4. 0~6. 0范 围内巧光巧灭效率随着其值的增加而逐渐增加，在抑=6. 0时巧灭效率达到最大，抑值超 过6. 0后，其巧灭效率反而下降，因此选择抑=6. 0作为最佳抑值。 阳化日]1. 2最优碳量子点用量的考察
[0056] 将500yL抑=6. 0的憐酸盐缓冲溶液、100ymol/L巧樣黄溶液400yL，W及不同 体积的碳量子点溶液依次加入5mL的离屯、管中，并用超纯水定容至4mU然后摇匀在5°C下 平衡5min，W441nm作为激发波长进行巧光测定。通过调整碳量子点溶液的体积为300~ 700y以研究碳量子点用量对巧光巧灭效率的影响。结果如图7所示，巧光巧灭效率在碳量 子点用量为450yL时达最大值，故选择450yL为最佳碳量子点用量。
[0057] 1. 3最佳反应溫度考察
[0058]将 450yLC-dots溶液、100ymol/L巧樣黄溶液 400yL^及 500yLpH= 6. 0 的憐酸盐缓冲溶液依次加入5mL的离屯、管中，并用超纯水定容至4mU然后摇匀分别在在 (TC~35°C下平衡5min，W441nm作为激发波长进行巧光测定。结果如图8所示，巧光巧灭 效率在反应溫度为5°C时达最大值，故选择5°C为最佳反应溫度。
[0059] 1.4最佳反应时间考察
[0060]将450yL C-dots溶液、100ymol/L巧樣黄溶液400 yL^及500 y LpH= 6.0 的憐酸盐缓冲溶液依次加入5mL的离屯、管中，并用超纯水定容至4mU然后摇匀在5°C下平 衡0~lOmin，W441nm作为激发波长进行巧光测定。结果如图9所示，巧光巧灭效率立即 就达到了最大值，为了实验过程保持一致性，我们最终选择5min为最佳反应时间。
[0061] 2、校准曲线的绘制
[0062] 体系在选择的最佳条件即抑为6.0的憐酸盐缓冲溶液，碳量子点体积用量为 450yL反应溫度为5°C，作用时间为5min下，加入不同体积的巧樣黄溶液，使其最终浓 度a到 1 分别为 0. 00,0. 25,0. 75, 2. 50, 3. 75, 5. 00, 7. 50,12. 50,17. 50, 22. 50, 27. 50， 32. 50ymol/l，测定其巧光强度。W巧樣黄浓度为横坐标，巧光强度巧灭程度（F。/巧为纵 坐标绘制标准曲线，结果如图10所示，图中a到1巧樣黄的浓度依次为0. 00,0. 25,0. 75， 2. 50, 3. 75, 5. 00, 7. 50,12. 50,17. 50, 22. 50, 27. 50, 32. 50ymol/L;图 11 为碳量子点巧光 强度与巧樣黄浓度的线性关系。得到的回归方程为F〇/F= 0. 9604+0. 0577X(R2= 0. 9986)。 表明巧樣黄浓度在0. 25~32. 50ymol/L范围内与巧光强度的变化呈良好的线性关系，检 测限（30/K)为73nmol/L。将该方法与其他检测巧樣黄的方法相比，结果如表2所示，本方 法有较宽的线性范围，检出限虽然不是最低的，但能够满足实际检测巧樣黄的需要。且该方 法不需要昂贵复杂的仪器，操作简单，结果较可靠。
[0063] 表2该方法与其他检测巧樣黄的方法比较
[0064]
W65] 实施例3
[0066] 食品中常见物质对巧樣黄检测的影响
[0067] 体系在选择的最佳条件即抑为6.0的憐酸盐缓冲溶液，碳量子点体积用量 为450yL巧樣黄浓度为5.00ymol/l，反应溫度为5°C，作用时间为5min下，分别加入 500ymol/L的葡萄糖、乳糖、淀粉、巧樣酸、酒石酸、抗坏血酸、N02、肥〇3、Ca2\化2+和K+， 250ymol/L的谷氨酸和苯丙氨酸，25ymol/L的化和亮蓝，5ymol/L的日落黄和宽菜红， 结果如图12所示，图中（1)葡萄糖、（2)乳糖、（3)淀粉、（4)巧樣酸、（5)酒石酸、（6)抗坏 血酸、（7)谷氨酸、做苯丙氨酸、（9)N02、（10)肥〇3、（ll)Ca2\ (。)化2+、（u)K\ (14)化心、 (15)日落黄、（16)亮蓝、（17)宽菜红，常见的实际样品中存在的干扰物质对巧樣黄的定量 检测几乎没有影响。 W側实施例4
[0069] 1、实际样品的处理
[0070] 分别称取10.Og粉碎后的玉米糖果和蜂蜜，于一定量60°C超纯水中溶解后转移至 5〇mL容量瓶中，定容后过0. 45ym滤膜，将溶液保存待用。
[0071] 称取10.Og玉米慢头样品于lOOmL烧杯中，加入适量水后用电动揽拌机揽拌均匀 再超声萃取15min，将样品于ISOOOrmp离屯、lOmin，转移上清液至50血容量瓶中，定容后过 0. 45ym滤膜，将溶液保存待用。
[0072] 2、样品中巧樣黄的检测 阳07引将450yLC-dots溶液、500yL抑为6. 0的憐酸盐缓冲溶液，W及1000yL实际 样品溶液，依次加入5mL的离屯、管中，并用超纯水定容至4mU然后摇匀在5°C下平衡5分 钟，最后在A 441皿时测定其巧光强度。
[0074] 通过对实际样品的分析测定，结果发现，实际样品玉米糖果中含有一定量的巧樣 黄，而蜂蜜和玉米慢头中并没有发现巧樣黄的存在，因此，本实验将巧樣黄的标准样品加入 到实际样品中，对其进行回收率实验。
[0075] 回收率试验：450yLC-dots溶液，500yLpH为6. 0的憐酸盐缓冲溶液，1000yL 处理后的实际样品，再加入不同体积的巧樣黄储备液，定容至4mU使蜂蜜、玉米慢头样品液 加入的巧樣黄低、中、高S个水平的最终浓度分别为1. 00,5. 00,7. 00ymol/l，玉米糖果样 品中加入的巧樣黄最终浓度分别为3. 00, 5. 00, 7. 00ymol/l，每个浓度平行5份，5°C平衡 5min后测定。没有加实际样品和巧樣黄储备液的作为空白组。
[0076] 精密度试验：将上面回收率试验中的样品日内重复测定5次，置于4°C冰箱中保 存，连续5天进行测定，计算日内精密度和日间精密度，结果见表3。 阳077] 本实验得到日内和日间回收率范围分别为88. 6~103. 4%和87. 3~106. 6%，回 收率结果较好。日内和日间的相对标准偏差巧SD)分别为0. 2~3. 9%和0. 4~5. 8%，表 明本文建立的方法可应用于实际食品样品中巧樣黄含量的测定。
[0078] 表3实际食品样品中巧樣黄的回收率和精密度试验结果（n= 5)
[0079]
[0080] 本发明的利用芦苔为碳源制备碳量子点及巧樣黄检测方法，碳量子点的合成方法 简单、经济、绿色，且具有强而稳定的巧光性质。利用巧樣黄分子对碳量子点选择性高效的 巧光泽灭效应，建立了一种简单、绿色、灵敏、快速的食品中巧樣黄的检测方法，可用于食品 中巧樣黄的常规分析。与现有方法相比，碳量子点的合成原料廉价易得、方法简单、绿色环 保、所得碳量子点巧光量子产率高，该量子点在巧樣黄的检测中所用仪器相对便宜、试剂耗 费少、耗时少、方法准确度和重现性均很好。
[0081] 本文虽然已经给出了本发明的一些实施例，但是本领域的技术人员应当理解，在 不脱离本发明精神的情况下，可W对本文的实施例进行改变。上述实施例只是示例性的，不 应W本文的实施例作为本发明权利范围的限定。
【主权项】
1. 利用芦荟为碳源制备碳量子点的方法，其特征在于，包括以下步骤，向反应釜中加入 新鲜芦荟和超纯水，180°C反应11个小时，自然冷却至室温后过滤，向滤液中加入等体积二 氯甲烷除去未反应有机物，收集上层浅黄色水溶液，将所述浅黄色水溶液装入透析袋中纯 化，即得碳量子点水溶液，置于4°C保存备用。2. 如权利要求1所述的利用芦荟为碳源制备碳量子点的方法，其特征在于，所述芦荟 用量为5g，所述超纯水用量为25ml。3. 如权利要求2所述的利用芦荟为碳源制备碳量子点的方法，其特征在于，所述透析 袋的截留分子量为3500。4. 如权利要求3所述的利用芦荟为碳源制备碳量子点的方法，其特征在于，所述过滤 为使用〇. 22 y m微孔滤膜过滤。5. 柠檬黄检测方法，其特征在于，取碳量子点溶液、pH缓冲溶液和样品溶液，依次加入 同一离心管，用超纯水定容，摇匀后平衡，然后测定其荧光强度。6. 如权利要求5所述的柠檬黄检测方法，其特征在于，所述测定荧光强度的条件为A M =441nm〇7. 如权利要求6所述的柠檬黄检测方法，其特征在于，所述pH缓冲溶液为pH = 6. 0的 磷酸盐缓冲液。8. 如权利要求7所述的柠檬黄检测方法，其特征在于，所述平衡条件为5°C下平衡 5min〇9. 如权利要求8所述的柠檬黄检测方法，其特征在于，所述碳量子点溶液为450 y I、pH 缓冲溶液为500 y 1、样品溶液为1000 y 1。10. 如权利要求5-9任一项所述的柠檬黄检测方法，其特征在于，所述碳量子点的制备 方法为，向反应釜中加入5g洗净新鲜的芦荟和25ml超纯水，于180°C条件下反应11个小 时，自然冷却至室温后，过0.22 ym微孔滤膜，再向滤液中加入等体积二氯甲烷除去未反应 有机物，收集上层浅黄色水溶液，将所述浅黄色水溶液装入截留分子量为3500的透析袋中 纯化，即得碳量子点水溶液。
【专利摘要】本发明公开了一种利用芦荟为碳源制备碳量子点的及柠檬黄检测方法，碳量子点制备方法包括以下步骤，向反应釜中加入新鲜芦荟和超纯水，180℃反应11小时，自然冷却至室温后过滤，向滤液中加入等体积二氯甲烷除去未反应有机物，收集上层浅黄色水溶液，装入透析袋中纯化后,即得碳量子点水溶液，置于4℃保存备用。本发明的利用芦荟为碳源制备碳量子点及柠檬黄检测方法，碳量子点的合成方法简单、经济、绿色，原料廉价易得、方法简单、绿色环保、所得碳量子点荧光量子产率高且具有强而稳定的荧光性质。利用柠檬黄分子对碳量子点选择性高效的荧光淬灭效应，该量子点在柠檬黄的检测中所用仪器便宜、试剂耗费少、耗时少、方法准确度和重现性均很好。
【IPC分类】C09K11/65, C01B31/02, G01N21/64
【公开号】CN105001862
【申请号】CN201510456220
【发明人】杨秀培, 许华, 李固, 高焕焕, 廖祥军
【申请人】西华师范大学
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月30日