嗜铁素在降低土壤重金属浓度中的应用的制作方法

文档序号:12538216阅读:916来源:国知局

本发明属于生物技术领域,特别涉及嗜铁素在降低土壤重金属浓度中的应用。



背景技术:

嗜铁素(siderophore)是一类由微生物在低铁条件下合成的小分子量的,能特异地螯合Fe3+的一种螯合因子,合成后被分泌到微生物的细胞外或细胞表面获取Fe3+,或者将铁变为可溶形式供给微生物利用。目前已发现500多种化学结构不同的嗜铁素,根据螯合基团的化学特性不同,可分为三大类:氧肟酸型(Hydroxamate)、儿茶酚型(Catechol,即邻苯二酚)和柠檬酸型(α-hydroxycarboxylic)(也称α-羟基羧酸型)。

嗜铁素具有防止病虫害、促进植物生长的作用,同时也是环境修复的一种新工具。嗜铁素作为一种铁结合能力极强的物质,在铁吸收干预方面具有巨大的应用前景。目前,去铁灵作为一种嗜铁素,已被开发作为地中海贫血病的一种辅助治疗药物。嗜铁素的种类繁多,化学结构非常复杂,人工化学合成的难度大、步骤多、产率低、成本很高。通过生物工程发酵产生嗜铁素的研究国内外已经开始起步,Calvente等人报道了利用红酵母发酵产生嗜铁素,Sarma等也报道了通过荧光假单胞菌发酵生产嗜铁素。



技术实现要素:

本发明的目的是提供嗜铁素在降低土壤重金属浓度中的应用。

将嗜铁素用于降低土壤中的重金属浓度,发现其对重金属有螯合作用,特别是对铜、铬、锌三种重金属的螯合效果最佳,重金属的降低率分别达到了84.54%、95.20%、82.89%。

具体实施方式

实施例1

1、嗜铁素来源:

本发明从杨树中分离一种能高产嗜铁素的内生菌株,经分子鉴定为吡咯伯克霍尔德氏菌(B.pyrrocinia),隶属于洋葱伯克霍尔德氏菌群(Bcc)中的基因型IX,命名为吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株,保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,编号为M209028,保藏日期为2009年2月18日。该菌株在MSA-CAS混合检测平板上有明显嗜铁圈。

2、培养基配方:

蔗糖-天冬酰胺培养基(MSA)(嗜铁素筛选培养基):蔗糖20g/L,天冬酰胺2g/L,K2HPO4 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,121℃,20min灭菌。

3、嗜铁素发酵液制备

单菌落接种于NB培养基,30℃,pH 7,1/2通气量,培养过夜,按照1%的接种量转接到20mLMSA液体培养基中,30℃,200rpm振荡培养24h,得发酵液。

4、嗜铁素对土壤重金属的螯合作用

将上述发酵液10000rpm离心5min,取上清,制备嗜铁素粗提液,作为嗜铁素制剂。根据土壤中重金属检测范围,配制重金属混合液,添加等体积嗜铁素制剂,以去离子水为空白,静置过夜后,测定样品中各重金属含量。

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