硫酸盐还原菌测试瓶的制作方法

专利名称：硫酸盐还原菌测试瓶的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种细菌的测试器具，特别是涉及一种水 质、污泥、沉积物等其它物质中硫酸盐还原菌的测试瓶。
二、 背景技术
硫酸盐还原菌是一类有机化能异养细菌，在自然界分布极广。在厌氧条件 下，硫酸盐还原菌更多的存在于供水、排水管道中水、污泥和沉积物中，它能 够利用附着于金属表面的有机物作为碳源，并利用细菌生物膜内产生的氢，将 硫酸盐还原成硫化氢。硫化氢腐蚀性极强，能与金属基体发生化学反应，导致 化学腐蚀。反应生成的铁硫化物沉积于金属表面，改变了基体金属的表面性质。
同时，在环境中离子(尤其是cr)的协同作用下，可能引起更严重的腐蚀。因 此，人们普遍认为硫酸盐还原菌能诱发腐蚀，在金属细菌腐蚀中占主导地位。
国内外针对硫酸盐还f、菌的生理、生态和生化特征及其腐蚀机理和防护措 施等开展了一系列的研究，但目前，水质样品中硫酸盐还原菌的测试方法尚无 国家标准方法，大多数采用传统的多管发酵法，多管发酵法中涉及到的主要仪
器为高压蒸气灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台、电子天平、酒精灯、镍铬
丝接种棒、培养皿、试管、吸管、烧杯、锥形瓶和采样瓶等。
多管发酵法的主要操作步骤为
第一步采集水样以无菌操作方法用灭菌吸管吸取一定量的水样； 第二步无菌水的制备；
第三步器皿、试剂灭菌将各种器皿清洗后放入高压蒸汽灭菌器内，灭 菌一定时间；
第四步培养基的配制检验并称量各种试剂，以无菌水溶解配制； 第五步逐级稀释和接种水样； 第六步 细菌的培养； 第七步菌落计数与报告。
传统的测定方法多管发酵法，该方法对实验室环境及操作人员要求极为严
格，包括从采样技术、实验室条件、仪器设备、器皿、试剂质量、操作人员的 专业知识、操作技能、实际经验直至质量控制等全部监测过程及控制程序。操 作程序繁琐、复杂、冗长，任何一个环节的不慎都有可能造成测试结果的误差。
该多管发酵法测定过程一般需要20天。 三、实用新型内容
本实用新型的目的克服现有技术中硫酸盐还原菌测试方法中的不足，提 供一种高选择性、快速、具有较长储存期的简易硫酸盐还原菌测试瓶。 本实用新型的技术方案
本实用新型提供一种硫酸盐还原菌测试瓶，该测试瓶为带胶塞和铝皮盖的 无菌、无色透明玻璃瓶，测试瓶中装有硫酸盐还原菌测试液，测试液在瓶中的 高度a和留空高度H2之比为Hp H2=l: 0.3 0.8。
所述的硫酸盐还原菌测试瓶，其中所述的测试液以重量含量为单位，由乳 酸盐2 10%。，氯化物3 10%o，硫酸盐1 10%。，酵母浸膏l 3%o，亚铁盐0.1 1.0%。，维生素0.1 0.5%0,乙酸或乙酸盐1.0 10%0和蒸馏水955.5 991.8%0组 成。
所述的硫酸盐还原菌测试瓶，其中所述的测试液由乳酸盐2 10%。，氯化物 3 10%。，硫酸盐1 5%。，酵母浸膏1 3%。，亚铁盐0.1 0.5%。，维生素0.1 0.5%。，乙酸或乙酸盐5 10%0和蒸馏水962 987.8%。组成。
所述的硫酸盐还原菌测试瓶，其中所述的测试液由乳酸盐2 10%。，氯化.物 3 跳，硫酸盐5 10%。，酵母浸膏1 3%。，亚铁盐0.5 1.0%。，维生素0.1 0.5%o，乙酸或乙酸盐1 5%0和蒸馏水961 987.4%。组成。
所述的硫酸盐还原菌测试瓶中乳酸盐为乳酸钠或乳酸韩；氯化物为氯化钠 或氯化钾；硫酸盐为硫酸镁或硫酸亚铁铵；亚铁盐为硫酸亚铁铵；维生素为维 生素C;乙酸盐为乙酸钠。
本实用新型的测试瓶可以选用5 15毫升西林瓶或口服液瓶。
使用本实用新型用来测定水质时的操作方法为用无菌注射器将水质样品 吸取l.O (或0.5)毫升，注入到测试瓶中，摇匀后放置于35i:干燥箱或水浴锅 中14天，根据瓶中液体的变化来判断阴性或阳性反应。瓶中液体本身无颜色，
若无变化为阴性，出现黑色沉淀为阳性，此为定性分析；按此方法做2组或3 组平行样，按逐级稀释法査MPN表，即可进行定量测试。污泥等其它固体样品 则须用水溶解或浸提，处理成液体后再按上述方法进行测定。 本实用新型的积极有益效果
1. 本实用新型的测试液密封贮存于玻璃瓶中，有较长贮存期，省去多管发 酵法第二、三、四的操作步骤，只须配置无菌注射器即可完成全部操作，检测 时间仅需14天，大大减轻了劳动强度，縮短了测试时间。
2. 本实用新型若与硫化氢试验测试管配合使用，则检测时间可以减少至3 5天。
3. 本实用新型免除了传统方法中必须的无菌环境条件，使得生化检验可以 在一般环境中进行，节省大量的基础建设投资。
4. 细菌代谢产物与本实用新型中测试液的特征沉淀反应是在无菌的细菌测 试瓶中自动进行，可避免传统方法多步骤操作过程中易引起的污染和干扰，从 而大大提高捡测结果的准确可靠性；本方法的最低检出限符合国家水质标准要 求。
5. 本实用新型可应用于各种水质中硫酸盐还原菌的简易快速测试，非专业 人员数分钟即可学会操作。
6. 本实用新型将细菌检测技术产品化、商品化，将预先配置好的测定液封 装于透明玻璃瓶中，可直接用于细菌的测定，携带、使用方便，测定简单快速'、 准确，保存时间长。可用于水质、食品、药品、化妆品等多种物质的细菌定性、 定量检测。
四、

图l:硫酸盐还原菌测试瓶的结构示意图
五、 .具体实施方式
下面的实施例仅为了进一步说明本实用新型，而不是限制本实用新型的范围。
实施例一
硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，.3
为等截面玻璃瓶，4为测试液；H,为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例
中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H,为3厘米，留空高度H2为L5厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠2%。，氯化钠10%。，硫酸 镁1%。，酵母浸膏3%。，硫酸亚铁0.596c，维生素C0.196。，乙酸钠5%0和蒸馏水 978.4%。组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
本实用新型的操作方法用无菌注射器将水质样品吸取1.0 (或0.5)毫升， 注入到测试瓶中，摇匀后放置于35'C干燥箱或水浴锅中14天，根据瓶中液体的 变化来判断阴性或阳性反应。瓶中液体本身无颜色，若无变化为阴性，出现黑 色沉淀为阳性，此为定性分析；按此方法做2组或3组平行样，按逐级稀释法 查MPN表，即可进行定量测试。
实施例二同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3 为等截面玻璃瓶，4为测试液；Ht为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例
中测试瓶为4.5亳升，测试液的高度H,为4厘米，留空高度H2为1.2M米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钙10%o，氯化钾3%。，硫酸 镁5%0，酵母浸膏1%。，硫酸亚铁铵0.196。，维生素C0.596。，乙酸10%。和蒸馏水 970.4%。组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例三同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3为 等截面玻璃瓶，4为测试液；H,为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中 测试瓶为9.0毫升，测试液的高度Hi为3.5厘米，留空高度H2为2.8厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠6%。，氯化钾7%。，硫酸镁 3%。，酵母浸膏2%。，硫酸亚铁铵0.3%o，维生素C 0.3%。，乙酸8%。和蒸馏水973.4%。 组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶9.0毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例四同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3为 等截面玻璃瓶，4为测试液；Hi为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中 测试瓶为9.0毫升，测试液的高度H,为4.5厘米，留空高度H2为2.7厘米。.
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钙4%。，氯化钠5%。，硫酸镁 7%。，酵母浸膏3%。，硫酸亚铁铵1.0%。，维生素C 0.2%。，乙酸5%。和蒸馏水974.8%。 组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶9.0毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中,经高压灭菌即可。
实施例五同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1,图中1为铝皮盖，2为胶塞，3 为等截面玻璃瓶，4为测试液；H,为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例 中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度Hi为5厘米，留空高度H2为2厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠8%。，氯化钾8%。。硫酸镁 10%。，酵母浸膏1%。，硫酸亚铁铵0.5%。，维生素C0.496。，乙酸钠1.096。和蒸馏 水971.196o组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例六同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3 为等截面玻璃瓶，4为测试液；Hi为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例
中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H,为3厘米，留空高度H2为L5厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠2%。，氯化钠10%。，硫酸 镁5%0，酵母浸膏2%0，硫酸亚铁0.796。，维生素C0.396。，乙酸钠3%。初蒸馏水 977%。组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5亳升封装于无菌、
无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例七同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于 硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3
为等截面玻璃瓶，4为测i^液；H,为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例
中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度a为4厘米，留空高度H2为1.2厘米。 测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钙2%。，氯化钾10%。，硫酸
镁1%0,酵母浸膏3%。，硫酸亚铁铵0.1%。，维生素C0.5。/。。，乙酸10%。和蒸馏水
973.4%。组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例八同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于
硫酸盐还原菌试瓶实碓方法参见图l，图中l为铝皮盖，2为胶塞，3为-等截面玻璃瓶，4为测试液；Hi为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中 测试瓶为9.0毫升，测试液的高度H,为3.5厘米，留空高度H2为2.8厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠10%。，氯化钾3%o，硫酸 镁10%。，酵母浸膏1%。，硫酸亚铁铵1%。，维生素C 0.1%。，乙酸196。和蒸馏水 973.9%。组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶9.0毫升封装于无菌、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例九同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于-
硫酸盐还原菌试瓶实施方法参见图l，图中l为铝皮盖，2为胶塞，3为 等截面玻璃瓶，4为测试液；H,为测试液的高度，Hb为留空高度，本实施例中 测试瓶为9.0毫升，测试液的高度&为4.5厘米，留空高度H2为2.7厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钙5%。，氯化钠8%。，硫酸镁 3%。，酵母浸膏2%。，硫酸亚铁铵0.3%。，维生素C 0.2%o，乙酸3%。和蒸馏水978.5%。 组成。
将上述测试液配好后调节PH值为6.5-7.2，按每瓶9.0毫升封装于无菌、无 色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
实施例十同实施例一相同之处不再叙述，不同之处在于 硫酸盐还原菌测试瓶实施方法参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3 为等截面玻璃瓶，4为测试液；H!为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例
中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度Hi为5厘米，留空高度H2为2厘米。
测试瓶中硫酸盐还原菌测试液配方为由乳酸钠7%。，氯化钾5%。。硫酸镁
7%0，酵母浸膏3%o，硫酸亚铁铵,0.7%。，维生素C 0.3%。，乙酸钠7%0和蒸馏氷 970%。组成。
将上述il试液配好后调节PH值为6.5 7.2，按每瓶4.5毫升封装于无菌.、 无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
权利要求1.一种硫酸盐还原菌测试瓶，该测试瓶为带胶塞和铝皮盖的无菌、无色透明玻璃瓶，其特征是测试瓶中装有硫酸盐还原菌测试液，测试液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比为H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
专利摘要本实用新型提供一种硫酸盐还原菌测试瓶。硫酸盐还原菌测试瓶为带胶塞和铝皮盖的无菌、无色透明玻璃瓶，测试瓶中装有硫酸盐还原菌测试液，测试液在瓶中的高度H₁和留空高度H₂之比为H₁∶H₂＝1∶0.3～0.8。本实用新型将细菌检测技术产品化、商品化，将预先配置好的测定液封装于透明玻璃瓶中，可直接用于细菌的测定，携带、使用方便，测定简单快速、准确，保存时间长。可用于各种水质中硫酸还原细菌的定性、定量检测。
文档编号B01L3/00GK201006428SQ200620134859
公开日2008年1月16日 申请日期2006年11月30日 优先权日2006年11月30日
发明者刘五一, 崔纪周, 张玉忠, 李树华, 莉 白 申请人:莉 白