新的盐酸乐卡地平结晶多晶形物及其制备方法

专利名称：：新的盐酸乐卡地平结晶多晶形物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及盐酸乐卡地平(lercanidipinehydrochloride)的新粗形(crudeform)和晶形(crystallineform),和这些形式的制备方法。还涉及了含有所述新晶形的药物组合物。
背景技术：
：乐卡地平(l，l，N-三甲基-N-(3，3-二苯基丙基)-2-氨基乙基1，4-二氢-2，6-二曱基-4-(3-硝基苯基)吡啶-3,5-二甲酸甲酯)是一种具有长作用时间和高血管选择性的高亲脂性二氢吡啶钙拮抗剂。其抗高血压活性的机理归因于对血管平滑肌的直接松弛效应，由此降低总的外周阻力。作为单一疗法乐卡地平的推荐起始剂量是经口服途径每天给药10mg，并且必要时药物滴定度((drugtitration)为每天20mg。乐卡地平在口服给药后被快速吸收且在给药后2-3小时出现峰值血浆水平。排除基本上是经过肝脏途径。由于其高亲脂性和高膜系数，乐卡地平结合了血浆半寿期短与作用时间长。事实上，该药物在平滑肌细胞的膜内的优先分布得到特征在于药理学作用延长的膜控制药物动力学。与其他钙拮抗剂相比，乐卡地平特征在于逐步启动且作用长时间维持，尽管血浆水平逐渐降低。体外研究证明，分离的大鼠主动脉对高K+的反应可以被乐卡地平衰减,即使该药物从主动脉组织的环境中已经除去6小时之后也如此。乐卡地平可商购自RecordatiS.p.A.(Milan，意大利)并且业已与其制备和拆分为单一对映体的方法一起公开在美国专利4，705，797;5,767，136;4,968，832;5,912，351;和5,696，139中。美国专利4，705，797中公开的一种乐卡地平制备方法涉及下面方案一*乐卡地平(1):二甲苯回流；(2):甲苯，85°C;(3)HC1+CHC13;0"C;(4)HO-CH(CH3)2回流。粗乐卡地平是油性残余物，其须通过快速(flash)色谱用含递增量丙酮的氯仿作为洗脱剂提纯。此后将溶剂蒸发至干且将残余物溶于甲醇，加入略微过量的乙醇中的盐酸。溶剂蒸发后，通过用稀盐酸在氯化钠的存在下处理来制备半水合、盐酸盐。美国专利4,705,797中所述的乐卡地平的制备方法的缺点在于，所公开的环化反应生成多种副产物，这导致目的产物的产率较低。此外，由该反应化合物纯化和分离乐卡地平相当复杂，因为这需要用不同的溶剂进行多种处理。最后，由于纯化产物必须通过柱色谱，所迷的提纯和分离步骤难于以工业规模进行。U.S.专利5，912,351描述了一种简单的盐酸乐卡地平的制备方法。它包括1,4-二氢-2，6-二甲基-5-甲氧基羰基-4-(3-硝基苯基)吡啶-3-甲酸与二氯甲烷和二甲基甲酰胺中的亚疏酰氯在-4至+rc的温度下的反应并且随后所得的酰基氯用2，N-二甲基-N-(3-二苯基丙基)-1-氨基-2-丙醇在-io-ox:的温度下酯化。该方法得到无水非吸湿性晶形的盐酸乐卡地平，并且避免不希望的副产物的生成和在色谱柱上的后续纯化。然而，晶形的盐酸乐卡地平的分离也相当复杂。蒸发该反应混合物中的溶剂，并将由此得到的残余物溶解在乙酸乙酯中之后，该溶液首先用盐水洗涤，洗涤液进一步用10%碳酸钠溶液洗涤5次，用1Nii盐酸洗涤5次，并且最后用盐水洗涤l次。所以，所属
技术领域：
需要一种制备晶形的盐酸乐卡地平的方法，该方法避免现有方法存在的任何缺陷。此外，发现按照上述第二种方法制备的乐卡地平虽然仔细控制过程但仍表现出批次与批次之间的变异性，并且熔点的实际观察结果确信是USP5,767，136的实施例3所述方法获得的固体产物的特征186-188K。这种变异性表现在似乎不可预见地出现(或消失)产物外观(例如颜色)、熔点和溶解度中的一种或多种差异。由此带来的问题在于是否纯度和/或再现性的保证(例如管理机构)就可以使产品始终相同。此外本发明人的研究揭示了批次与批次在动物生物利用度中的差异，和在晶体大小上的不同。在研究变异性问题的原因的过程中，发明人惊奇地发现了新的盐酸乐卡地平多晶型物。他们还发现更加适合制备和从反应混合物分离晶体盐酸乐卡地平产物的方法。意外地测定出盐酸乐卡地平具有多晶型特征，并且根据所采用的方法和溶剂结晶成为不同的晶形。而且，各种单独结晶多晶型物的分离变为可能，由此减小乐卡地平的批次与批次间变异性的可能性，本发明人测定出这种变异性归因于同一批次中存在不同固体晶形的混合物，并且不同组成的此类混合物具有介于与单独晶形相同的窄范围内的熔点。因此，需要更适合大批生产和质量控制更高再现性批次的乐卡地平。
发明内容本发明提供新的盐酸乐卡地平的粗形和晶形以及它们的制备方法。在一种实施方案中，本发明提供新的粗盐酸乐卡地平形(A),它具有约150-152C(DSC峰)的熔点并含有约3-4。/o(w/w)乙酸乙酯.在另一种实施方案中，本发明提供新的粗盐酸乐卡地平形(B)，它具有约131-135X:(DSC峰)的熔点并含有约0.3-0.7。/。(w/w)乙酸乙酯。提供了合成粗盐酸乐卡地平形(A)和粗盐酸乐卡地平形(B)的独立合成方法，可能得到分离状态的粗形。在另一种实施方案中，提供分离的盐酸乐卡地平晶形(I)，它具有下面的在波长Ka处的X射线衍射图，其中峰之间的距离(D在X中)、相对强度比(I/Io)比例和显著性峰的角度(29)是<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>当熔点根据DSC峰测定时，盐酸乐卡地平晶形(l)具有约197-201'C的熔点。在另一种实施方案中，提供了分离的盐酸乐卡地平晶形(II)，它在波长Ka下具有下面的X射线衍射图，其中间距、(1/10)比例和显著峰的26角是<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>当熔点根据DSC峰测定时，盐酸乐卡地平晶形(II)具有约207-211x:的熔点。因此本发明能够得到晶形I和晶形II的混合物，该混合物具有预定和再现含量的各种晶形，和选择性地具有乐卡地平的其他形式，例如非晶形。还提供合成的方法，在这些方法中可以从盐酸乐卡地平粗形(A)或粗形(B)的原料独立地获得各种分离的盐酸乐卡地平晶形(I)和晶形(11)。还提供药物组合物，其中含有(l)晶体盐酸乐卡地平和选择性的乐卡地平的其他形式，例如非晶形，其中该晶体盐酸乐卡地平选自盐酸乐卡地平晶形(I)、盐酸乐卡地平晶形(II)，和其含有预定含量的各晶形的组合，和(2)至少一种选自以下物质的成分药学可接受载体或稀释剂、矫味剂、增甜剂、防腐剂、染料、粘合剂、助悬剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、润滑剂、成形剂(plasticizer)和可食用油。在某些实施方案中上述药物组合物是以含有盐酸乐卡地平晶形(I)或晶形(II)或含预定配方的各晶形的组合的剂型提供。在另一实施方案中，本发明还提供治疗患有动脉高血压受试者的方法，该方法包括给需要该治疗的受试者施用治疗有效量的盐酸乐卡地平晶形(I)、盐酸乐卡地平晶形(II)，或其含有预定含量的各种晶形的组合。在其他实施方案中，提供治疗或预防受试者动脉中的动脉粥样硬化损害的方法，该方法包括给需要此治疗的受试者施用治疗有效量的盐酸乐卡地平晶形(l)、盐酸乐卡地平晶形(II)，或其含有预定量的各种晶形的组合。在优选方面，需要治疗的受试者是哺乳动物。最优选的该需要治疗的受试者是人。本发明的这些和其他方面对于所属领域普通技术人员来说在本说明书、权利要求书和附图的教导下是显而易见的。附图简述图1是对于晶形(I)按照实施例12所述的工作条件进行的DSC分析图。纵坐标是指以mW计的热流和横坐标是指C计的温度。图2是对于晶形(II)按照实施例12所述工作条件进行的DSC分析图。纵坐标是指以mw计的热流和横坐标是以x:计的温度。图3是按照实施例13所述分别对晶形(I)和晶形(II)进行的热重量试验的结果图。横坐标是指以x:计的温度和纵坐标是指百分质量变化。图4是25X:下晶形(I)和(II)在；醇中在递增水浓度下的溶解度图。该试验在实施例15中加以描述。纵坐标是指％溶解度表示为w/w和横坐标表示乙醇中水的重量％。图5是40。C下晶形(I)和(II)在乙醇中在递增水浓度下的溶解度图。该试验在实施例15中加以描述。纵坐标是指。/。溶解度表示为w/w和横坐标表示乙醇中水的重量％图6表示固相的晶形(I)的13CNMR光谱。相应碳原子的信号和属性可以参见表4.图7表示固相的晶形(II)的"CNMR光谱。相应碳原子的信号和属性可以参见表5。图8表示晶形(1)的IR光谱。信号和相应属性可以参见表6。图9表示晶形(II)的IR光谱。信号和相应属性可以参见表7。图IO代表当晶形(I)和晶形(II)以3mg/kg的量以硬明胶胶嚢的形式给药后盐酸乐卡地平在狗血浆内的百分平均浓度。纵坐标是指血浆浓度的平均值和横坐标是指时间(以分钟计).图11和12分别表示晶形(I)和(II)在波长Ka下的X射线衍射光谱。X中的间距(d),(I/Io)比例和最显箸峰的2e角值可以参见下表l和2。纵坐标表示计数/秒和横坐标表示20角的值。图13和14是对盐酸乐卡地平的晶形(I)和(II)分别进行的吸湿性试验中百分质量变化作为时间的函数的曲线。左方纵坐标是指百分质量变化，右方纵坐标是指百分相对湿度；横坐标是指以分钟计的时间。吸湿性试验的方案描述在实施例14中图15和16表示在波长Ka下粗盐酸乐卡地平形(A)和粗盐酸乐卡地平形(B)各自的X射线衍射光谱。图17和18表示粗盐酸乐卡地平形(A)和粗盐酸乐卡地平形(B)各自的拉曼光谱。其中纵坐标表示拉曼单位和横坐标代表波数(cnT1).图19和20表示分别对粗盐酸乐卡地平形(A)和粗盐酸乐卡地平形(B)进行的热重量分析的结果。在这些图中，横坐标表示温度(以x:计)和纵坐标是指百分质量变化。15■，*.发明详述本发明公开了新的盐酸乐卡地平的粗形和晶形及其制备方法。申请人测定出盐酸乐卡地平存在多晶现象，并根据所采用的方法和溶剂，尤其对于结晶法来说，结晶成为不同的形式。此外，多种新晶形具有不同的化学和物理性质，并且在包括人的动物中具有不同的生物利用度，如本文所述。制备粗盐酸乐卡地平的新方法适合盐酸乐卡地平的可再现固体组合物的高重现性产业化规模生产。所述的方法适于生产盐酸乐卡地平的粗形(A)和(B),其还表现出工业应用所希望的特性。粗形(A)和(B),例如，具有比先前报导的其它盐酸乐卡地平粗形更高的溶解度和更快的干燥速率。粗形(A)和(B)进一步使结晶过程简化以适用于生产新的盐酸乐卡地平的分离晶形。本发明的新的盐酸乐卡地平的分离晶形可以得自盐酸乐卡地平粗形(A)和(B)，并且称作盐酸乐卡地平晶形(I)和晶形(II)。分离的晶形(I)或分离晶形(11)可以按照下面所述通过改变结晶条件再现地得自(A)和(B)中间体。晶形(I)和(II)还可以利用其它起始原料获得。晶形(I)和(II)两者可以利用，例如，粗乐卡地平形(C)作为起始原料按照本文所述获得。晶形(II)也可以利用晶形(I)作为起始原料按照本文所述获得。盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)两者都具有良好的稳定性。晶形(I)特征在于是浅黄色，晶体大小较小，在水性介质中的溶解度较高(均与晶形(n)对比)，并且熔点(dsc峰)在约197x:-约2orc的范围内，更具体地，约198.7C，并且X射线衍射图如上所述。晶形(II)特征在于更明显的黄色，晶体大小较大，在水性介质中溶解度略低(均与晶形(I)比较)，并且熔点(DSC峰)在约207-211"C的范围内，更具体地约209.3x:。晶形(i)和晶形(n)皆稳定。晶形ii在狗中表现出更高的生物利用度，并且在人体中也不等效于晶形I,与晶形(I)相比，显示出更高的血浆浓度(AUCo-t)和最大浓度的时间延迟(tmax)。早先制备晶体盐酸乐卡地平的已知方法在具有可预测物理和化学特性的盐酸乐卡地平的制备中不一致。因此，先前的已知方法存在制备盐酸乐卡地平所不希望的性质，例如，在批次与批次之间，甚至在通过相同方法和相同条件下生产的批次之间，物理-化学性质上有所改变。本发明人发现，盐酸乐卡地平的先前已知制备方法出现不一致性的原因在于存在不同且无法确定量的晶体盐酸乐卡地平晶形(II)。与制备盐酸乐卡地平的先前已知方法相反，本发明提供新的晶形(I)和(II)，其代表着纯度且均匀性是先前获得的盐酸乐卡地平的固体形式无法达到的盐酸乐卡地平的晶形。晶形(I)和(II)的纯度和均匀性使乐卡地平剂型的生产更加容易，因为，例如，更加精确的物理-化学特性，譬如提高了微粉化后微粒大小的均匀性和更可再现的溶解度。与早先获得的批次与批次间其物理-化学特性改变的剂型相比，晶形(I)和(II)还提供了具有更精确药理学特性的剂型，例如，生物利用度。在男子中进行的人体研究中，其中乐卡地平的血浆水平是在施用单剂量的盐酸乐卡地平晶形(I)或(II)之后进行评估，相对于晶形(II)来说，晶形(I)达到最大血浆浓度的时间较短。所以，晶形(I)更加适合于即释制剂和剂型。从相同的研究可知，晶形(II)与晶型(I)相比，表现出更高的生物利用度，并且因此适合于控释制剂和剂型。所以，可获得纯净晶形(I)和(II)使得可将两种多晶型物混合成具有新的控制特性的剂型，例如，一种同时具备快速启动和持续生物学作用的剂型。在此使用的术语〃粗形〃是指沉淀的固体形式，其包括未经洗涤和/或重结晶除去可能存在的杂质(包括但不限于溶剂)的化合物的晶体。在本说明书中，所述的粗形是指盐酸乐卡地平的形式(A)和(B)。在此使用的术语〃晶形〃是指已经被洗涤且重结晶除去杂质的化合物的晶体。在本发明中，术语晶形是指盐酸乐卡地平的晶形(I)和(II)。这些晶形具有HPLC纯度299.5%并且残余溶剂含量<3000ppm。在此使用的术语〃多晶现象〃是指化合物结晶为具有不同结果的两种或多种形式的性质。不同晶形可以通过结晶学技术直接检测或通过17与各种特定多晶型物相关的物理和/或化学性质上的差异评估来间接检测。在此使用的术语〃需要治疗的受试者〃是指患有被治疗具体病症或存在发展被治疗具体病症危险性的哺乳动物(例如，人)受试者，例如，原发性高血压、继发性高血压、孤立的收缩期高血压、冠心病(例如，慢性稳定的心绞痛，心梗)、充血性心衰。需要治疗动脉高血压的受试者可以利用所属领域的熟知方法来鉴定，例如，通过用手动血压计、自动/电子装置或移动血压监测直接测量血压。本发明涉及了任何可以用于制备本发明所述盐酸乐卡地平的新粗形的方法。与其他已知方法制备的盐酸乐卡地平的粗形相比，这些形式具有不同的物理-化学性质，例如，熔点(其可以通过DSC分析法测定)，例如通过美国专利5,912,351所述的方法制备；称作形(C)的粗形。形(A)的熔点为约150。C-约152"C(DSC峰)，形(B)具有的熔点为约131。C-约135C(DSC峰)，并且形(C)具有的熔点为约186C-约(DSC峰)。另夕卜，热重量研究证明形(A)含有3-4%残余乙酸乙酯，形(B)含有0.3-0.7%残余乙酸乙酯，以重量计。相对地，已确定形(C)中存在的残余的溶剂是0-0.1%。本发明涉及制备盐酸乐卡地平的方法，各方法得到产物的不同粗形。制备两种粗形的头两个步骤相同并且是(a)2，6-二甲基-5-甲氧基羰基-4-(3-硝基笨基)-l，4-二氢吡啶-3-甲酸(按照德国专利DE2847237所述方法制备)与亚石危酰氯或草酰氯在非质子偶极溶剂和非质子极性溶剂的混合物中反应生产氯化物化合物，和(b)上述步骤得到的氯化物与2，N-二甲基-N-(3，3-二苯基丙基)-l-氨基-2-丙醇，优选在-5至+5X:的温度下，在非质子偶极溶剂和非质子极性溶剂的混合物中就地反应。在一个优选实施方式中，非质子偶极溶剂和非质子极性溶剂的混合物是比例为4:1的乙酸乙酯和二甲基甲酰胺。该就地反应之后，从混合物中分离并回收该盐酸乐卡地平。使用18的分离方法决定了所得盐酸乐卡地平的粗形。按照下面的方案(a方案)生成形(A):i)洗涤步骤(b)的混合物，优选用水，ii)除去步骤i)的反应混合物中的水，优逸通过在200-300mmHg的真空下于低于约60t)(优选40-50'C)的温度下共沸蒸馏；iii)在与步骤(ii)相同的温度和压力下浓缩步骤ii)的混合物，优选达到约1/3的初始体积，加入新溶剂(例如，乙酸乙酯)优选达到初始体积，由此得到按照KarlFischer(U.S.Pharmacopoeia25，方法921)测定的含水量优选为0.10-0.15%的混悬液；iv)冷却步骤iii)的混悬液优选达到0-5匸；v)过滤步骤iv)的固体；vi)优选在乙酸乙酯中重新悬浮步骤v)的固体，并优选在60-65C下搅拌约1小时;和vii)冷却至5-10°C，过滤和干燥所得的固体(例如，在约70。C的烘箱内)。第二种方法(P方案；用于制备形(B))利用下列步骤进行i')洗涤步骤(b)的混合物，优选用水，ii')除去步骤i')中的水，优选用DeanStark装置通过共沸回流步骤i')的产物直至使含水量为约2%(按照KarlFischer测定)；iii')浓缩步骤ii')的混合物至优选3/4的初始体积并向该混合物加入新溶剂(乙酸乙酯)优选直至(1)达到初始体积和(2)按照KarlFischer所述测定，含水量为0.9-1.1%;iv')冷却步骤iii')的溶液优选至0-5°C得到固体；v')过滤步骤iv')的固体；vi')优选在乙酸乙酯中重新悬浮步骤v')的固体并优选在60-65°C下搅拌约1小时;和vii')冷却步骤vi')的混悬液优选至5-10X:，过滤并干燥得到的固体,优选在约70"C的烘箱内.步骤vii')的温度应小心控制在5-iox:以使收率最大。19i^些新的盐酸乐卡地平粗形与形(C)相比具有溶解度悉高和干燥速度更快的优点，并且使进一步的结晶过程简化(这适宜用来制备晶形(I)或晶形(II))。与U.S.专利No.5，912，351的方法制备的粗形相比，这些粗形允许使用较少的溶剂来重结晶该化合物。通过减少化合物的损失也提高了收率。此外，用于制备这些粗形的方法更加适用于大规模环境和商业化情形。令人惊奇地发现粗盐酸乐卡地平形(A)和形(B)各自在进行不同纯化处理时，生成两种新的和不同的盐酸乐卡地平的晶形。研究表明这些新晶形具有不同的物理和化学性质。晶形(I)的DSC分析表明它具有约197。C-约20rC的熔点峰，具体地约198.7C。晶形(II)的DSC分析表明它具有约207X:-约211TC的熔点峰，具体地约209.3'C。一种能够生成新晶形之一(晶形(I))的纯化方法(Y方法)包括下列步骤制备晶形(I)的方法d)将异丙醇加入到粗盐酸乐卡地平(形(A)或形(B))并在回流下加热且搅拌生成溶液(如果该溶液不澄清，应当热过滤)；e)冷却步骤d)的溶液优选至30-40'C的温度，且搅拌优选12-48小时生成固体;和f)过滤由步骤e)得到的固体，该固体用异丙醇洗涤，再次过滤该固体，并且将该固体(例如，在烘箱内)优选在70。C干燥优选12-48小时。粗形(C)也可以用作步骤d)中的起始原料。然而，在这样的情况中，存在产物产率降低的危险，因为该溶液应当热过滤，导致步骤d)中盐酸乐卡地平的损失增加。在步骤e)中，当溶液的含量2%乐卡地平HC1时认为结晶完全。其他醇也可以在步骤d)中用作溶剂。另一种优选的溶剂是最多含有5%水的C广Cs醇，例如，无水乙醇。可以在步骤(e)中加入晶形(I)作为进一步促进晶体形成的晶种。另一种制备晶形(I)的方法本申请还涉及另一种制备具有晶形(I)的盐酸乐卡地平的方法，其包括步骤20發，d')将乙醇加入粗盐酸乐卡地平，优选盐酸乐卡地5#溶剂的重量/体积比为1:4-1:6，最优选1:4，搅拌下回流从而得到一溶液(如果该溶液不澄清则应当优选热过滤)，搅拌下冷却，优选至20°C，并且加入晶形(I)的晶种；e')冷却步骤d')的接种混合物，优选至10-15°C，并且在该温度下搅拌优选24-96小时形成固体；和f)过滤并干燥步骤e')的固体，优选在烘箱内并优选于7(TC下得到盐酸乐卡地平晶形(I)。在步骤e')中，当溶液的含量《2%盐酸乐卡地平时认为结晶完全。在步骤e')中也可以加入晶形(I)的晶种来进一步促进晶体形成。制备晶形(H)的方法第二种纯化方法(S方法)，它生成晶形(II)，包括步骤d〃)将乙腈加入到粗盐酸乐卡地平(形(A)或形(B))并回流下加热该混合物且搅拌，e〃)冷却步骤d〃)的混合物至室温并搅拌优选至24小时形成固体，f〃)过滤步骤e〃)得到的固体并优选在烘箱内干燥。在步骤e〃)中，当溶液的含量《2V。乐卡地平HC1时认为结晶完全。本申请还考虑了两种其他制备晶形(II)的方法第一种制备晶形(II)的另外方法第一种另外的方法包括步骤d〃')向盐酸乐卡地平加入异丙醇或乙醇，优选乙醇，其含水量优选是5-10%(重量)，回流并搅拌生成一溶液；e〃')冷却该混合物优选至20-40°C且搅拌优选24-96小时形成固体；f')过滤该固体和在(例如，在烘箱内)优选70。C下干燥12-18小时生成盐酸乐卡地平晶形(II)。在步骤e〃')中，当溶液的含量《2%乐卡地平HC1时认为结晶完全。第二种制备晶形II的另外方法第二种得到晶形(n)多晶型物的另外方法包括步骤21d〃〃)将粗盐酸乐卡地平或其晶形(I)溶解在质矛极性或非质子偶极溶剂中，所述的溶剂优选含有至多50。/。(重量)水并优选20-70。C，生成一溶液；e〃〃)优选在20-25C下搅拌d〃〃)的溶液生成固体；f〃〃)过滤e〃〃)的固体和优选在(例如，在烘箱内)70"下干燥优选12-18小时。第二种另外的方法可以选择性地包括在步骤e〃〃)之前向步骤d〃〃)的溶液内加入至多60%水的步骤。该第二种另外的方法可以进一步包括用超声照射和/或向步骤e〃〃)中加入优选可靠的晶形(II)晶种。在步骤e〃〃)中，当溶液的含量《2%乐卡地平HC1时认为结晶完全。在一个优选实施方式中，质子极性溶剂是醇溶剂，例如但不限于甲醇，乙醇，正丙醇，异丙醇。在另一优选实施方式中，非质子偶极溶剂是N-甲基p比咯烷酮。制备晶形(I)的优选方法是y方法，并且制备晶形(II)的优选方法是5方法。申请人已确定，通过使用Cl-C5无水醇(优选无水乙醇或异丙醇)或含有至多5%水的醇在受控条件d'-f')下可以定量得到晶形(I)。事实上，上述方法，尤其是Y和S方法可以用于再现且一致的制备所需多晶型物。除了熔点不同，这两种晶形在X射线结构、溶解度和生物利用度上也不同。溶解度研究证明，晶形(i)比晶形(n)更易溶于水、乙醇及其混合物(参见表2和3)。在狗和人体中的生物利用度研究表明，晶形(II)比晶形(I)更加为生物利用。然而，人体中的研究还表明，晶形(I)达到最大浓度的时间较短并由此适合于即释制剂和剂型。最后，X射线衍射研究证明这两种晶形具有不同的衍射图案(参见图11和12和实施例20),晶形I具有较小的晶体且微粉化之前的粒度也如此，由此比晶形II容易和更快地加工，晶形II是较大的晶体.本申请进一步公开了药物制剂和单位剂型，其含有本发明的分离的多晶型物之一或其预定多晶型物含量的混合物。本发明还涉及治疗患有高血压(例如，原发性高血压、继发性高血22压或孤立收缩期高血压)、冠心病(例如，慢性稳定心绞痛、心梗)或充血性心衰的受试者的方法，该方法包括给需要该治疗的受试者施用治疗有效量的分离的盐酸乐卡地平晶形(I)、盐酸乐卡地平晶形(II),或其预定多晶型物含量(可选地与乐卡地平的其他形式，例如非晶形)的组合。本发明还考虑治疗和预防受试者动脉中的动脉粥样硬化损害的方法，该方法包括给需要该治疗的受试者施用治疗有效量的分离的盐酸乐卡地平晶形(I)、分离的盐酸乐卡地平晶形(II)，或其组合。药物组合物本发明的化合物和多晶型物可以配制为药物组合物。本发明的药物组合物可以含有盐酸乐卡地平(I)、(II)或其混合物。当该组合物含有所述晶形的混合物时，晶形(I):(II)的重量比优选为1:9-9:1，该药物组合物的更优选实施方案是那些其中(I):(II)重量比选自9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的混合物。该药物组合物还可以含有选择性的添加剂，例如药学可接受载体或稀释剂、矫味剂、增甜剂、防腐剂、染料、粘合剂、助悬剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、成膜剂、润滑剂、成形剂、可食用油或上述两种或多种的任何组合。两种晶形可以采用所属领域4^阿已知方法进行孩^H匕。通itil种方法产生的微粒的平均大小优选D(50y。)(即:D5。)2-8nm，D(^%)^P:D9G)<15jim。适当的药学可接受载体或稀释剂包括，但不限于，乙醇；水；甘油；丙二醇，芦蕙凝胶(aloeveragel);尿囊素；丙三醇；维生素A和E油；矿物油；PPG2丙酸肉豆蔻酯(PPG2myristylpropionate);碳酸镁；磷酸钟；植物油；动物油；和solketal。适当的粘合剂包括，但不限于，淀粉；明胶；天然糖，例如葡萄糖蔗糖和乳糖；玉米增甜剂；天然和合成树胶，例如阿拉伯胶，西黄蓍胶，植物胶,和藻酸钠；羧甲基纤维素；羟丙基曱基纤维素；聚乙二醇;聚乙烯吡咯烷酮(povidone);蜡;等等。适当的崩解剂包括，但不限于，淀粉，例如，玉米淀粉，甲基纤维素，琼脂，皂土，黄原胶，羟乙酸淀粉钠，交联聚乙烯吡咯烷酮等。适当的润滑剂包括，但不限于，油酸钠、硬脂酸钠、硬脂基富马酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。适当的助悬剂是，但不限于，皂土，乙氧基化异硬脂基醇，聚氧化乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯，微晶纤维素，偏氢氧化铝(aluminummetahydroxide)，琼脂和西黄蓍胶，或这些物质的两种或多种的混合物，等等。适当的分散剂和助悬剂包括，但不限于，合成和天然树胶，例如植物胶、黄蓍胶、阿拉伯胶、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和明胶。适当的成膜剂包括，但不限于，羟丙基甲基纤维素，乙基纤维素和聚甲基丙烯酸酯。适当的成形剂包括，但不限于，不同分子量的聚乙二醇(例如，200-8000Da)和丙二醇。适当的着色剂包括，但不限于，氧化铁类，二氧化钛和天然和合成色淀。适当的可食用油包括，但不限于，棉籽油、芝麻油、椰子油和花生油。附加添加剂的实例包括，但不限于，山梨糖醇、滑石粉、硬脂酸、磷酸钙和聚葡萄糖。单位剂型所述的药物组合物可以配制为单位剂型，例如片剂、丸剂、胶嚢剂、嚢形片、大药丸、粉剂、颗粒剂、灭菌非肠道溶液、灭菌非肠道混悬剂、灭菌非肠道乳剂、酏剂、酊剂、计量气雾剂和液体喷雾剂、滴剂、安瓿剂、自动注射装置或栓剂。单位剂型可以用于口服、非肠道、鼻内、舌下或直肠给药，或者用于通过吸入、吹入、透皮贴剂和冻干组合物给药。通常，可以使用任何产生活性成分系统有效性的活性成分的给药。优选的单位剂型是口服剂型，最优选固体口服剂型，因此有效的剂型是片剂、丸剂、嚢形片和胶嚢剂。也优选非肠道制剂(例24如，可注射制剂和粉末喷射系统的制剂)、固体单位剂型可以通过将本发明的活性剂与药学可接受载体和任何上述其他所需添加剂混合来制备。该混合物通常混合至本发明的活性剂与栽体和其他所需添加剂形成均勻混合物为止，即直至活性剂均匀分散在整个组合物中。在这样的情况中，该组合物可以形成干或湿颗粒。具有预定量的盐酸乐卡地平的剂型可以由含有已知量的盐酸乐卡地平的组合物起始、利用所属领域的熟知方法配制。在一个优选实施方案中，通过混合含有已知量的晶体盐酸乐卡地平，例如，剂型(I)或(11)，选择性地包括非晶体盐酸乐卡地平的组合物来制备一种剂型。还优选配制含有预定量的晶体盐酸乐卡地平的剂型，这是通过将含有基本纯的晶体盐酸乐卡地平的组合物混合形成含有预定比例的晶体晶形(I)和(II)。片剂或丸剂可以包衣或另外化合形成具有延迟和/或延长作用的单位剂型，例如定时释放(timerelease)和緩释单位剂型。例如，片剂或丸剂可以含有内部剂量和外部剂量组分，后者是包围前者的层或包封的形式。两种组分可以通过肠溶层分开，其发挥抵抗在胃中分解并允许内部组分完整通过进入到十二指肠或延迟释放的作用。控制活性剂释放的生物可降解聚合物包括，但不限于，聚乳酸、聚s己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃类、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。对于液体剂型，活性物质或其生理可接受盐选择性地与常用物质一起成为溶液、混悬剂或乳剂，常用物质例如增溶剂、乳化剂或其他助剂。活性组合和相应生理可接受盐的溶剂可以包括水、生理盐水或醇，例如乙醇，丙二醇或甘油。此外，可以使用糖溶液例如葡萄糖或甘露糖醇溶液。上述多种溶剂的混合物也可以用于本发明中。本发明也考虑了透皮剂型。透皮剂型可以是利用液体贮库(fluidreservoir)的扩散驱动透皮系统(透皮贴剂)或含药物粘合基质体系。其他透皮剂型包括，但不限于，局部凝胶，洗剂，软膏，经粘膜25体系和装置，和离子电渗(电扩散>给药体系。透皮剂型可以用于本发明活性剂的定时释放和緩释。本发明用于非肠道并特别是通过注射给药的药物组合物和单位剂型，一般包括上述药学可接受载体。优选的液体栽体是植物油。注射可以是例如经静脉内、鞘内、肌肉内、intraruminal、气管内或皮下。活性剂也可以以脂质体给药体系的形式给药，例如小单层嚢、大单层嚢和多层嚢。脂质体可以由多种磷脂形成，例如胆固醇，硬脂酰胺或磷脂酰胆碱。本发明的多晶型物也可以与可溶性聚合物偶联成为定向药物。此类聚合物包括，但不限于，聚乙烯-吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚鞋丙基甲基丙烯酸基-酰胺酚，聚羟基-乙基天冬酰胺酚(polyhydroxy陽ethylaspartamidephenol)，和棕榈酖基取代的polyethyl-eneoxideopolylysine。给药本发明的药物组合物或单位剂型可以通过多种途径给药，例如静脉内、气管内、皮下、口服、粘膜非肠道、经颊、舌下、经眼、经肺、经粘膜、透皮和肌肉内。单位剂型也可以以鼻内形式经局部使用适当鼻内装置给药，或者经透皮途径给药，利用那些所属领域普通技术人员已知的透皮贴剂的形式。优选口服给药。本发明的药物组合物或单位剂型可以施用给需要抗高血压治疗的动物，优选人。本发明的药物组合物或单位剂型可以按照通过常规试验确定的剂量和给药方案根据上面给出的指导来给药，从而获得最佳抗高血压作用，降低血压同时减小在特定患者中的毒性或副作用。然而，按照上面的教导对治疗方案的精细调整是常规性的。含有本发明多晶型物或混合物的組合物的剂量根据许多因素改变，例如所处的疾病状态、个体条件、体重、性别和年龄以及给药的方式。对于口服给药，所述的药物组合物可以以带刻痕(scored)或未刻痕(unscored)固体单位剂型的形式提供。药物组合物含有(l)盐酸乐卡地平，其中盐酸乐卡地平选自分离的盐酸乐卡地平晶形(I)、分离的盐酸乐卡地平晶形(II)，或其预定多晶型物组成的组合；和(2)至少一种选自药学可接受载体或稀释剂、矫味剂、增甜剂、防腐剂、染料、粘合剂、助悬剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、润滑剂、成形剂和可食用油的组分。在一个优选实施方案中，该药物组合物或剂型含有0.1-400mg盐酸乐卡地平。优选地，该组合物或剂型含有1-200mg盐酸乐卡地平。更优选地，该组合物或剂型含有5-40mg盐酸乐卡地平.所述的药物组合物或单位剂型可以以单一日剂量给药，或者总的日剂量可以分开的剂量给药。此外，可能希望其他活性剂的联合给药或顺序给药。本发明的多晶型物及其混合物可以与任何已知药物疗法结合，优选用于高血压的治疗。例如，本发明考虑包括添加利尿剂、P-受体阻滞剂、ACE抑制剂或血管紧张素II受体拮抗剂的双峰疗法(参见，例如，U.S.临时申请No.60/344,601,2001年10月23日提交和意大利申请No.MI2001A002136,2001年10月21曰提交)。对于联合疗法，所述的化合物可以首先作为分开的剂型提供直至获得最佳剂量组合和给药方案。因此，患者可能被滴定测定至适合他/她特定高血压状况的适当剂量。当测定出各化合物达到降低血压同时没有副作用的适当剂量之后，则患者可开始使用含有适当剂量的各种活性剂的单一剂型，或者可继续双重剂型。本发明的联合疗法所利用的精确剂量和给药方案根据多种因素选择，包括患者的类型、种类、年龄、体重、性别和医学条件；被治疗高血压的严重性和病因；给药的途径；患者的肾和肝功能；患者的治疗史；和患者的响应能力。获得化合物介于产生效能但无毒性的范围内的浓度的最佳精确度需要基于药物在靶位的可利用性的动力学的方案。这包括考虑药物吸收、分布、代谢、排泄，和患者对该剂量方案的响应能力。然而，按照上面的教导对治疗方案的精细调整是常规性的。非肠道给药的药物组合物含有不低于0.1%，优选约0.5%-约2730%(重量)的本发明的多晶型物或混合物，基于药物组合物的总重量计。单独分离的多晶型物优选用于非肠道给药。通常，透皮剂型含有约0.01%-约100%(重量)的活性剂，基于该剂型的100%总重量。在本发明的优选实施方案中，所述的组合物每天给患者施用。优选在该实施方案中，该药物组合物是含有0.1-400mg盐酸乐卡地平的剂型。更优选，该组合物或剂型含有1-200mg盐酸乐卡地平。特别优选，该组合物或剂型含有5-40mg盐酸乐卡地平。实施例现在说明性而非限定目的的公开下列制备盐酸乐卡地平粗形(A)和(B)和晶形(I)和(II)的实施例，以及DSC分析和溶解度、稳定性和吸湿性试验的结果；还公开的新晶形的生物利用度试验。实施例1起始制备保持温度在-1至+rC之间，将在乙酸乙酯(25g)中稀释的亚碌u酰氯(36g)緩慢加入到2，6-二甲基-5-甲氧基羰基-4-(3-硝基苯基)-1，4-二氢吡啶-3-甲酸(90g在二甲基甲酰胺(115g)和乙酸乙酯(396g)中)的溶液内。将2，N-二甲基-N-(3,3-二苯基丙基)-l-氨基-2-丙醇(84g)在乙酸乙酯(72g)中的溶液緩慢加入到所得的混合物中。全部混合物在同样的温度下保持搅拌3小时。随后将该混合物加热至20-25。C且在搅拌下保持12小时。此后加入水(340ml)，整体搅拌30分钟且在静置后弃去水相。有机相再次用水(340ml)洗涤。实施例2粗盐酸乐卡地平形(A)实施例1得到的有机相随后在约250mmHg的真空下共沸蒸馏，温度不超过60t:。除去约50ml的水之后，在相同的温度和压力条件下浓缩该溶液至约1/3的初始体积且随后加入新乙酸乙酯至初始体积，直至K.F.值(KarlFisher值)约0.10-0.15%。最终的混悬液冷却至0-5X:。将固体过滤，悬浮在乙酸乙酯(350g)中，在60-65L下搅拌1小时。整体冷却至5-10匸且随后过滤。将该固体于70X:烘箱内干燥。得到133g的干燥粗盐酸乐卡地平形(A)(75。/。收率)，DSC峰150-152。C.实施例3粗盐酸乐卡地平形(B)将实施例1最后得到的有机相在回流下加热(70-75。C)并用DeanStark装置(SpazianiRolando，Nettuno，Rome,Italy)除去溶液中含有的水直至得到的K.F.值为约2%。此后整体在常压下蒸馏达到3/4的初始体积。加入新乙酸乙酯使该溶液达到其初始体积。该处理结束时的K.F.值是0.9-1.1%。将终溶液冷却至0-5t:。緩慢沉淀固体，将其过滤。由此得到的固体悬浮在乙酸乙酯(350g)中，并在60-65。C下搅拌1小时。整体冷却至5-iox:，此后过滤并于70x:烘箱内干燥，由此得到133g的粗盐酸乐卡地平形(B)，DSC峰131-135X:;75%收率.实施例3A粗盐酸乐卡地平形(B)将实施例1最后得到的有机相在回流下加热(70-75。C)且用DeanStark装置除去溶液中所含的水直至得到的K.F.值是约2%。整体在常压下蒸馏达到3/4的初始体积。加入新乙酸乙酯使该溶液达到其初始体积。该处理结束时的K.F.值为0.9-1.1%。将该终溶液冷却至20°C，接种0.1。/。粗盐酸乐卡地平形(B)并冷却至0-5"C。固体緩慢沉淀出来且随后过滤，将由此得到的固体悬浮在乙酸乙酯(350g)和在60-65'C下搅拌1小时。整体在5-10'C下冷却，随后过滤并于70'C烘箱内干燥24小时，由此得到133g的粗盐酸乐卡地平形(B)，DSC峰131-135C;75%收率。实施例4盐酸乐卡地平晶形(I)的制备在单独的代表性试验中，将100g的粗盐酸乐卡地平形(A)、(B)、或(C)加入到反应器中，随后加入400ml的2-丙醇。该混合物在强回流和搅拌下加热，由此达到粗物质几乎完全溶解。将该混合物热过滤以消除轻微的乳色，并且该澄清溶液在搅拌下冷却至40t:。随后温度设定在35'C。整体35"C下保持搅拌24小时，此后将温度设定在30^，并且在该温度下搅拌24小时。该固体在30匸下过滤并用50ml的2-丙醇洗涤，此后于70"C烘箱内真空下干燥24小时。在各种情况中干燥产物的重量为(乐卡地平HC1(I))卯g(晶形(I)的产物的HPLC纯度>99.5%)。实施例4A盐酸乐卡地平晶形(I)的制备在单独的代表性试验中，将100g的粗盐酸乐卡地平形(A)、(B)、或(C)加入到反应器中，随后加入400ml的2-丙醇。该混合物在强回流和搅拌下加热，由此达到粗物质几乎完全溶解。将该混合物热过滤以消除轻微的乳色，并且该澄清溶液在搅拌下冷却至40"C。此后用100mg的盐酸乐卡地平晶形(I)引发沉淀并将温度设定在35匸，该混合物保持搅拌。整体在35。C下保持搅拌24小时，此后将温度设定在30X:，并且在该温度下搅拌24小时。该固体在30。C下过滤并用50ml的2-丙醇洗涤，此后于70X:烘箱内真空下干燥24小时。干燥产物的重量为(乐卡地平HC1(1))90g(晶形(I)的产物的HPLC纯度>99.5%)0实施例5盐酸乐卡地平晶形(I)的制备在独立制备中，加入25kg的粗盐酸乐卡地平，形(A)或(B)，并且随后加入100L的95%乙醇且在搅拌下强回流。20X:搅拌下使该溶液冷却，且此后接种晶形(I)。此后整体冷却至10-15X:的温度，该反应混合物保持搅拌4天。将由此得到的固体过滤并用95%乙醇洗涤，将沉淀过滤且于70X:真空烘箱内干燥24小时。得到20.2kg的产物，相当于收率为81%;晶形(I)的HPLC纯度〉99.5%。用形(C)作为原料时可以达到相当的结果。实施例6盐酸乐卡地平晶形(II)的制备将100g的粗盐酸乐卡地平形(C)和然后将200ml的乙腈加入到反30应器内。该混合^捧在强回流和搅拌下加热，由此达到完全溶解。在轻微搅拌下使该混合物达到并在该温度下保持24小时。将沉淀过滤和于70D烘箱内干燥24小时。得到95g的干燥产物，相当于95%收率；盐酸乐卡地平晶形(II)的HPLC纯度>99.5%。当用盐酸乐卡地平形(A)或(B)作为原料时可以得到相当的结果。实施例7盐酸乐卡地平晶形(II)的制备在单独代表性试验中，将100g存在于200ml95%乙醇中的粗盐酸乐卡地平形(A)、(B)、或(C)加入到反应器内，由此得到的混合物在搅拌和强回流下加热，且随后在25。C和持续搅拌下冷却。该溶液在该温度和搅拌下保持24小时。由此得到的沉淀随后被过滤和在7(TC烘箱内下干燥24小时。得到90g的晶形(II)，HPLC纯度>99.5°/。。实施例7A盐酸乐卡地平晶形(II)的制备将25g的乐卡地平HCl粗物质或形(C)在6(TC溶解在100ml的乙醇-1120(8:2)的混合物中。利用重力全部过滤消除可能的不溶部分，并用100ml的H2O稀释。由此得到的溶液在25。C下搅拌，或加入O.lg的盐酸乐卡地平晶形(II)或在20kHz和100Watts下超声6秒，上述处理均在25。C下。无论上述何种选择，搅拌48小时后，收集由此生成的沉淀并在70。C烘箱内干燥24小时，得到收率80-85%的晶形(11)。利用粗形(A)或(B)或盐酸乐卡地平晶形(I)作为原料也获得相当的结果。作为另一种方式，该起始澄清的溶液用100ml的乙醇稀释并接种盐酸乐卡地平晶形(II)(O.lg)。25。C下搅拌48小时后，得到收率80%的化学计算的盐酸乐卡地平晶形(II)。实施例8.盐酸乐卡地平晶形(II)在含水甲醇中的制备在代表性独立实施例中，30"C下将40g的盐酸乐卡地平粗形(Q或晶形(l)溶解在100ml的甲醇中。利用重力全部过滤以消除可能的不溶部分，并加入25ml的水。由此得到的溶液在25。C下搅拌，或与O.lg的盐酸乐卡，地平晶形(II)混合，或在20kHz和lOOWatts下超声6秒，上述处理均在25t:下。无论上述何种选择，搅拌48小时后收集形成的沉淀并干燥，收率为80-85%化学计算的盐酸乐卡地平晶形(11)。利用粗形(A)或(B)得到相当的结果。实施例9.盐酸乐卡地平晶形在含水1-丙醇中的制备60C下将60g的乐卡地平HC1粗形(C)溶解在100ml的1-丙醇-H20(8:2)。通过重力除去可能的不溶部分之后将该溶液在2小时内冷却至25^且在该温度下搅拌120小时，采用或不采用在20kHz和100Watts下超声6秒。收集由此得到的沉淀，干燥步骤后得到90%的收率的化学计算的盐酸乐卡地平晶形(II)。利用粗形(A)或(B)或盐酸乐卡地平晶形(I)作为原料可以获得相当的结果。实施例IO.盐酸乐卡地平晶形(IT)在含水2-丙醇中的制备6(TC下将30g的盐酸乐卡地平粗形(C)溶解在100ml的2-丙醇-H20(8:2)。通过重力除去可能的不溶部分之后将该溶液在2小时内冷却至25。C且在该温度下搅拌72小时，采用或不采用在20kHz和100Watts下超声6秒。收集由此得到的沉淀，干燥步骤后得到85%的收率的化学计算的盐酸乐卡地平晶形(II)。通过在l(TC下搅拌168小时也可以得到同样的结果。利用粗形(A)或(B)或盐酸乐卡地平晶形(I)作为原料可以获得相当的结果。实施例11盐酸乐卡地平晶形(II)在含水N-曱基吡咯烷酮中的制备将50g的盐酸乐卡地平粗形(C)在30ml的N-甲基吡咯烷酮/水(l:1)中的混悬液在20-25X:下搅拌12天。通过过滤收集由此形成的固体并干燥，得到40g的盐酸乐卡地平晶形(H)。用粗形(A)或(B)或盐酸乐卡地平晶形(I)作为原料可以得到相当的结果。实施例12.盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)的DSC分析DSC分析法测量加热下指定样本出现的变化，其中所述变化确定跃迁相。在曲线下面积的基础上计算发生在跃迁相的焓变(enthalpyvariation).最常见的跃迁相是熔化和升华。跃迁开始的温度，启始T,是由曲线开始偏离基线处的点(折点)确定。晶形(I)的DSC:将3.8mg的晶形(I)置于装置PerkinElmerDSC7的金盘内。该试验期间的加热速度是lOC/分钟。晶形(II)的DSC:将4.6mg的晶形(II)置于装置PerkinElmerDSC7的金盘中。试验期间的加热速度是10X:/min。数据如图1和2所示，这些图的特征点简单概括在下表1中。表1.<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>在晶形(I)或(II)溶化后立刻观察到盐分解引起的放热现象。实施例13.热重量分析法利用与光谱计FTIRBrukerVector22联合的NetschThermomicrobalance209对晶形(I)和(11)，以及粗盐酸乐卡地平粗形(A)和粗盐酸乐卡地平形(B)进行与IR分析有关的重量分析。试验根据下列工作条件进行2-5mg的样本在钢坩埚中氮气氛下加热，并且加热速度为10X:/min。由晶形(I)和(II)得到的结果如图3所示，由这些结果可以推断，高达其熔点时可以观察到两种晶形没有重量损失(即，直至约l卯-200x:)。在发生在上述熔化后降解过程中，可以观察到失去C02。由粗盐酸乐卡地平形(A)获得的结果如图19所示，其中可以在25-153X:的温度范围内观察到3.4%的重量损失。挥发性化合物通过其相应的IR光谱鉴定并且是乙酸乙酯。在降解过程中(T〉170"C)，可以观察到少量气相的乙酸乙酯。w由粗盐酸乐卡地平粗形(B)获得的结果如图20所示，可以在25-153x:的温度范围内观察到0.5%的重量损失。利用相应IR光谱鉴定的挥发性化合物是乙酸乙酯(0.4%)和水(0.1%)。该降解过程中(T〉1701:)，可以观察到少量气相的乙酸乙酯。实施例14.晶形(I)和(II)的吸湿性两种晶形(I)和(II)的吸湿性是利用DVS分析法、通过吸水分析仪(SURFACEMEASUREMENTSYSTEM,Marion,Buckinghamshire,UK)按照下列工作条件测量将10-15mg的晶形(I)和(II)分别置于石英样本容器内，依次置于微量天平上，并且使该样本经受0-95%的湿度循环，由50%相对湿度开始(25。C，相对湿度(RH):50-95-95-0-50%，以RH/h:5%)。该试验的结果如图13和14的图表所示。14-1由晶形(l)得到的结果晶形(I)暴露在DVS分析仪中的湿度下导致在95%RH下质量改变+0.15%,并且在0。/。RH下质量改变-0.3V。，在质量增加和损失过程中几乎没有滞后现象。这些轻微的改变可能归因于水的可逆性表面吸收。14-2晶形(II)得到的结果晶形(II)暴露在DVS中的湿度下在整个试验RH范围内只产生可忽略的质量变化(<0.05%)。实施例15.晶形(I)和(II)的溶解度15.1室温下在水中和在乙醇中的溶解度通过UV可见光谱术在双蒸水中(体系自发达到该pH值)和在无水乙醇中评估23C下两种晶形(I)和(II)的溶解度。预先测定出在乙腈中的摩尔吸光系数。考虑用同样的摩尔吸光系数在水和乙醇中测定。在水中的溶解度某种程度上取决于pH。混悬液过滤后得到的残余固体立刻用拉曼光谱分析。结果如下表2和3所示。表2.在水中的溶解度(约40mg/ml作为起始条件).<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>晶形(n)在两种溶剂中比晶形(i)可溶性低.15.225。C下和40。C下随着水的浓度的增加，在水-乙醇的混合物中的溶解度图4和5表示晶形(I)和晶形(II)在25。C和40。C下在水-乙醇中的溶解度。当水的浓度为20%时，在两种温度下，两种晶形达到最大溶解度。在这种情况中晶形(I)的溶解度也高于晶形(II)的溶解度。实施例16.固相"C-NMR研究使用带有7mm转子附件的Bmker，ASX300仪、利用多种联合技术来进行高分辨13C-NMR固相光谱幻角自旋(MAS).约300mg的样本置于转子中在4.3kHz下围绕与磁场成幻角(54。70')的定向轴自旋以克服CSA(化学位移各向异性)引起的偶极bradening。该试验在室温下进行。偶极偶合.由于在有机固体的13C光谱中许多的谱线增宽归因于与质子偶合，所以通过异核去偶来消除(去偶力水平为约1千瓦)。交叉极化(CP).交叉极化通过偶极偶合使碳磁化离开较大的质子磁化增加信号强度。边带的全部抑制(TOSS).TOSS利用与样本旋转同步的自旋回波来进行，从而自旋边带的相改变，当将连续光谱加合在一起时消除了边带。晶形(I)和(II)在固体相中具有不同的"C-NMR光谱。相应碳原子的信号(化学位移)和属性(如下面所示盐酸乐卡地平的结构式中编号)分别如下表4和5所示。29表4.盐酸乐卡地平晶形(I)<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>表5.盐酸乐卡地平晶形(II)化学位移(,ppm)碳原子分布168.1;166.69;11或11;9151.9-121.96和20-37104.0;102.83;5或5;3,79.01266.0;58.0(弱)15;17或17;1549.71048.81644.31940.5429.81827.6;23.513;14或14;1319.6;18.38或8口实施例17.IR研究PerkinElmerSpectrum-one设备来记录。IR光谱，其波长和相应属性如下表6和7所示，显然新晶形(I)和(II)不相同。表6.盐酸乐卡地平晶形(I)的KBr粉末的IR光谱波长(cm—"属性3186NH拉伸3100-2800烷基和苯基拉伸2565N+H拉伸1673c=o拉伸1525;1348N02基团的不对称和对称拉伸"05;1386成对甲基的偏移(bending)785-685芳环上5和3相邻氢的面外偏移表7.盐酸乐卡地平晶形(II)的KBr粉末的IR光谱波长(cm'1)属性3183NH拉伸3100-2800烷基和苯基拉伸2684N+H拉伸1705;1675C-O拉伸1526;1350N02基团的不对称和对称拉伸37<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>实施例18:拉曼光谱在下列典型条件下使用BrukerFT-RamanRFS100分光光度计:约10mg样本(没有任何预处理)，64扫描2cm"分辨率，100mW激光源，Ge-检测器。下表8和9分别表示晶形(I)和晶形(II)的拉曼光谱的最显著峰。表8.晶形(I)的拉曼光谱<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>表9.晶形(II)的拉曼光谱<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>*M=中；S=强，Vs-极强实施例19.晶形(I)和(II)的生物利用度实施例19a-狗在6只Beagle犬上进行晶形(I)和(II)的生物利用度的评估研究。微粉化形式的产物利用填充活性剂的硬明胶胶嚢经口服结药剂量为3mg/kg的晶形(I)和(II)，试验的每天清晨给药1次。在指定时间采集血样并用立体选择性分析法HPLC-MS/MS按照下列工作条件测定乐卡地平的血浆浓度；用正己烷和乙醚的混合物通过液-液萃取的方式萃取狗血浆中的乐卡地平。将有机相的干燥残余物溶于甲醇和水的混合物并进行液相色谱分离(LC);在CHIROBIOTICV柱(Vancomycin)(粒度5m，柱尺寸150x4.6mm(ASTEC,NJ，USA))上分离乐卡地平的两种对映体，并用质量光谱计(MS/MS)通过电子喷雾技术检测。该分析法确定两种对映体的血浆浓度为0.1-20ng/ml。该方法是特异的，精确度为15%。乐卡地平在片剂中的平均浓度代表两种对映体之和。39有关乐卡地平两种晶形的平均浓度的特征(profiles)如图10所示。下表10和11给出有关AUC、Tmax、Cm和血浆浓度的单一值。表IO.盐酸乐卡地平(S+R)晶形(I)和晶形(II)在狗中以3mg/kg的剂量口服给药后的AUCo-t、Cmax和Tmax的平均值(n-5)晶形(I)参数狗1狗2*狗3狗4狗5狗6平均SDAUC(mng/hAnl15.41263.8327,54446.5770.3928.7237.7319.12T腿(h)2.00楊6.003.003.006.00楊1.67(ng/ml)8.29128.8711.6227.1722.5817.8317.506.91晶形(II)参数狗1狗2*狗3狗4狗5狗6平均SDAUC(mng/h/ml54.59119.7775.62173.82142.3461.91104.6843.99T腿(h)3.00L501.504.002.006.003.001.61(ng/ml)18.4652.1919.7852.6455.3818.5636.1717.27*没有包括在平均值的计算中表ll.盐酸乐卡地平(S+R)晶形(I)和晶形(II)在狗中以3mg/kg的剂量口服给药后的平均血浆浓度晶形(I)时间(h)狗1狗2*狗3狗4狗5狗6平均SD00.000.000.000.000.000.000.000.000.50.10.200.000.000.000.000.000.02<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>*没有包括在平均值的计算中在6条动物的5条中，含有晶形(II)的制剂比含有晶形(I)的制剂生物利用高。为了简化对比，评估中排除狗2，因为在晶形(I)给药后狗2表现出血浆AUC为264ng/h/ml，而其他5条狗的平均值为38土19(SD)。另一方面，其在给药晶形(I)后的AUC类似于其他动物，该值是120相对于105±44ng/h/ml。盐酸乐卡地平(晶形(II))的生物利用度，表现为在晶形(II)给药后得到的乐卡地平(R+S)的AUC增加，比晶形(I)得到的AUC的高约3倍。两种晶形的血浆浓度的平均特征如图IO所示。这些结果的分析证明，晶形(II)给药后被吸收的乐卡地平(S+R)的量比晶形(I)的高3倍，而表示为Tmax的吸收速率实际上没有改变给药后6小时的血浆浓度(末次取样时间)相似，该浓度在晶形(I)给药后是j5土6.5ng/ml，在晶形(II)给药后是10.9±6.8ng/ml。实施例19b-人在16名健康志愿者中进行盐酸乐卡地平晶形(I)和晶形(II)的相对生物利用度的评估研究。晶形(I)用Zanedip⑧的片剂代表，其相当于10mg的盐酸乐卡地平(参考-R)。晶形(II)是以10mg片剂形式给药，该片剂是完全以与乙3116(11@(101118)相同的方式和相同的组成、但由具有与晶形I的粒度相同的微粉化晶形(II)起始制备(试验-T)。在给药后0-24小时内的15个时间点采集血样并通过立体选择性分析法HPLC-MS/MS测定乐卡地平的血浆浓度。所得药物动力学参数如下表所示形(i)几何最小平方平均值形(II)几何最小平方平均值点评估(T/R)90%C.LAUC0-t8.8210.361.170.93-1.48(ng/mL)3.183.221.010.73-1.42tmax(h)1.50*0.75"0.00-1.250.386A0.329A0.850.69-1.02*中值**中值差A最小平方平均值所得结果表明，盐酸乐卡地平晶形(II)并非生物等效(bioequivalent)于晶形I，晶形(II)获得更高的血浆水平，盐酸乐卡地平晶形(I)具有比晶形(II)短的tmax，暗示其在即释制剂中的用途。实施例20.X射线衍射研究在下列典型条件下使用PhilipsPW1710和PhilipsXpertPW3040粉末衍射仪(CopperKaradiation):约5-70mg样本(无需任何预处理)并且施加轻压得到平面。环境气压，0.02°20步幅，2秒/步，2-504220"m所得光谱如图11和12所示且相应的主要峰如表12和13所述。新的分离的晶形(I)和(II)的数据显然不同。表12.盐酸乐卡地平晶形(I)的XRD光谙D(A)相对强度(1/1。)26角16.3835.46.24714.24.782918.64.106321.7楊3621.93.9010022.8表13.盐酸乐卡地平晶形(II)的XRD光谱D(A)相对强度(1/1。)26角9.3359.56.04514.75.496516.14.655219.14.277420.83.814123.43.7710023.63.584424.83.542925.2实施例21.盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)的不同混合物的熔点测定手工测定由已知比例的盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)组成的组合物的熔点。条件是使用177X:的设定点并将毛细管引入到仪器中(熔点仪535型,BiichiLabortechnikAG,FIawil，Switzerland)在低于炫点约5t:下进行。结果如表14所示。43表14.由已知比例的盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)组成的组合物的熔点。系列A和系列B中的样本分别以1X:/min和0.5X:/min的梯度加热。结果表示为t:。样本诚乐卡地,二晶形(i>晶形(n)的比,(n)9:17:31:13:71:9系列A18d818&01895細191219421943系列Bl醇18d8184."8dl1845>187.01867-187.41865"1狄418&7-1905190.6492.9美国专利5,767，136公开了具有186-188°C熔点的晶体盐酸乐卡地平。表14表示，该熔点是晶形(I)和晶形(II)的混合物的熔点，其中晶形(I):晶形(II)的比例是在9:1-3:7之间变化。Bianchi等(DrugsoftheFuture,1987,12:1113-1115)报告了熔点是186-188。C(非DSC)的乐卡地平产物，其特征是〃晶体〃。所以，盐酸乐卡地平制剂的熔点本身不足以区分本发明的特定形式，并且许多不同组成的混合物具有同样的熔点范围。实施例22.盐酸乐卡地平的微粉化微粉化是通过喷射磨(jet-m川)法利用NUOVAGUSEO(Villanovasull'Arda-PC-意大利)的MICRONETTEM300进行。参数如下所述注射压，5Kg/cmq;微粉化压力，9Kg/cmq;和旋流压力，2.5Kg/cmq。微粉化容量为16Kg/h。通过激光散射法利用GALAICIS1激光器(GALAI，Haifa,Israel)测定粒度。微粉化得到平均粒度为D(50%)2-8拜和D(90%)<15,本发明范围不受所述具体实施方案的限定。事实上，除本文所述的以外多种改进方案根据上述描述和附图对于所属领域技术人员来说是显而易见的。此类改进属于所附权利要求书的范围内。44本申请引用了专利、专利申请、出版物、规程等，它们的内容在此全文引入作为参考。权利要求1.粗盐酸乐卡地平固体形(A)，具有约150-152℃DSC峰的熔点并且含有约3-4％w/w乙酸乙酯。2.粗盐酸乐卡地平固体形(B)，具有约131-135X:DSC峰的熔点并含有约0.3-0.7%w/w乙酸乙酯。3.制备权利要求l的粗形盐酸乐卡地平的方法，包括步骤a)2，6-二甲基-5-甲氧基羰基-4-(3-硝基苯基)-l，4-二氢吡啶-3-甲酸^中反应生成相应的羰:氯化物；b)步骤a)的氯化物就地与2，N-二甲基-N-(3，3-二苯基丙基)-l-氨基-2-丙醇反应生成粗盐酸乐卡地平;和c)分离步骤b)的粗盐酸乐卡地平并回收粗盐酸乐卡地平形(A)，其中步骤(c)基本上由下列步骤組成i)用水洗涤步骤(b)的粗盐酸乐卡地平，ii)除去f^i)中的水生成混合物；iii)浓缩步骤ii)的混合物并且加入溶剂生成体积大约与步骤ii)的混合物的初始体积相同的混悬液，其含水量为0.10-0.15%;iv)冷却步骤iii)的混悬液得到固体；v)过滤步骤iv)的固体；W)在乙酸乙酯中重新悬浮步骤v)的固体；vii)冷却该步骤vi)的混悬液，和；viii)过滤和干燥vii)所得的沉淀生成粗盐酸乐卡地平形(A)。4.权利要求3的方法，其中该反应步骤b)在-5至+5C的温度下进行。5.权利要求3的方法，其中步骤a)中所述的氯化物是亚硫酰氯。6.权利要求3的方法，其中步骤c)ii)包括通过在200-300mmHg的真空下，于不高于60C的温度下共沸蒸馏来除去步骤c)i)中的水生成混合物o7.权利要求3的方法，其中重新悬浮步骤c)vi)包括在60-65"C下搅拌约1小时。8.权利要求3的方法，其中步骤c)viii)中的干燥是在70X:烘箱内进行。9.权利要求3的方法，其中洗涤步骤c)i)使用水；步骤c)iii)中的混合物浓缩为其初始体积的1/3并且加入溶剂生成混悬液，该混悬液具有大约与该混合物初始体积相同的体积；和该混悬液的含水量是0.1-0.15%。10.权利要求3的方法，其中步骤c)iv)中的冷却达0-5匸的温度。11.权利要求3的方法，其中步骤vii)中的冷却达5-10X:的温度。12.制备权利要求2的粗盐酸乐卡地平形(B)的方法，包括步骤:a)2，6-二甲基-5-甲氧基羰基-4-(3-硝基苯基)-l，4-二氢吡啶-3-甲酸^中反应生成相应的羰基氯化物；b)步骤a)的氯化物就地与2，N-二甲基-N-(3，3-二苯基丙基)-l-氨基-2-丙醇反应生成粗盐酸乐卡地平;和c)分离步骤b)的粗盐酸乐卡地平并回收粗盐酸乐卡地平形(B)，其中步骤(c)基本上由下列步骤组成i')用水洗涤步骤(b)的粗盐酸乐卡地平，ii')除去步骤i')中的水生成一种混合物，其具有约2%的含水量；iii')浓缩步骤ii')的混合物并加入溶剂得到体积大约与步骤ii')的混合物的初始体积相同的溶液，和含水量为0.9-1.1%;iv')冷却步骤iii')的溶液得到固体；v')过滤步骤iv')的固体；vi')在溶剂中重新悬浮步骤v')的固体；vii')冷却该步骤vi')的混悬液；和viii')过滤并干燥所得的固体生成粗盐酸乐卡地平形(B)。13.权利要求12的方法，其中反应步骤b)在-5至+5匸的温度下进行。14.权利要求12的方法，其中所述的氯化物是亚硫酰氯。15.权利要求12的方法，其中步骤c)ii')包括通过共沸回流除去步骤i')的水生成所述的混合物。16.权利要求12的方法，其中步骤c)iii')包括浓缩该混合物至其初始体积的3/4。17.权利要求12的方法，其中步骤c)iii')和vi')的溶剂是乙酸乙酯。18.权利要求12的方法，其中步骤c)iv')包括冷却该溶液至0-5X:的温度。19.权利要求12的方法，其中该步骤c)vi')进一步包括将该混悬液在60-65r下搅拌约1小时。20.权利要求l2的方法，其中该步骤c)vii')进一步包括冷却该固体至5-10匸的温度。21.权利要求12的方法，其中步骤viii')中的干燥是在烘箱内约70匸下进行。22.权利要求3-!21任一项的方法，其中该非质子偶极溶剂是二曱基曱酰胺，该非质子极性溶剂是乙酸乙酯。23.分离的盐酸乐卡地平晶形(II)，其在波长Ka下具有如图12所示的X射线衍射图案。24.权利要求23的乐卡地平晶形，其中图12中显著峰的间距、I/Io比和29角是<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>25.制备权利要求23和24任一种的盐酸乐卡地平晶形(II)的方法,该晶形在波长Ka下具有如图12所示的X射线衍射图案，该方法包括:d〃)将乙腈加入到盐酸乐卡地平中并加热由此得到的混合物生成溶液；e〃)冷却步骤d〃)的溶液并搅拌直至盐酸乐卡地平溶解在结晶溶剂中的浓度《2%;和f〃)回收步骤e")的固体并干燥该固体生成盐酸乐卡地平形(II)。26.权利要求25的方法，其中该步骤d〃)包括回流下加热该混合物同时搅拌。27.权利要求25的方法，其中该步骤e〃)包括冷却该溶液至室温。28.权利要求25的方法，其中该步骤e〃)包括室温下搅拌该溶液24小时。29.权利要求25的方法，其中干燥步骤f〃)在烘箱内进行。30.权利要求25的方法，其中所述的粗形是盐酸乐卡地平粗形(A)、盐酸乐卡地平粗形(B)或乐卡地平粗形(C)。31.制备按照权利要求23和24任一项所述盐酸乐卡地平晶形(II)的方法，该晶形在波长Ka下具有如图12所示的X射线衍射图案，该方法包括d'〃)加入含水量小于10%重量的乙醇或异丙醇至盐酸乐卡地平并回流生成溶液；e〃')冷却该溶液至20-401C,并搅拌直至盐酸乐卡地平溶解在结晶溶剂中的浓度《2%;和f〃')回收步骤e'〃)的固体得到盐酸乐卡地平形(II)。32.权利要求31的方法，其中将乙醇加入到步骤d'〃)中。33.权利要求31的方法，其中在步骤d〃')中溶剂的含水量是5-10%。34.权利要求31的方法，其中步骤f〃')包括过滤该固体并在烘箱内干燥。35.制备按照权利要求23和24任一项所述盐酸乐卡地平晶形(II)的方法，该晶形在Kot下具有如图12所示的X射线衍射图案，该方法包括d〃〃)使粗盐酸乐卡地平或盐酸乐卡地平晶形(I)溶解在含有高达50%重量水的质子极性或非质子偶极溶剂中生成溶液；e〃〃)搅拌步骤d〃〃)的溶液直至盐酸乐卡地平溶解在结晶溶剂中的浓度《2%;和f〃〃)回收步骤e〃〃)的固体得到乐卡地平形(II)。36.权利要求35的方法，进一步包括用超声照射和/或向步骤e'〃')加入形(II)的晶种。37.权利要求35的方法，进一步包括向步骤d〃〃)的溶液内加入高达60%水。38.权利要求35的方法，其中所述的质子极性溶剂是醇溶剂。39.权利要求35的方法，其中该醇溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇。40.权利要求35的方法，其中所述的非质子偶极溶剂是N-曱基-p比咯烷酮。41.权利要求35的方法，其中所述步骤d"〃)的温度为20-70X:。42.权利要求35的方法，其中该步骤e'〃')中搅拌在20-25匸的温度下进行。43权利要求35的方法，其中步骤f〃')的干燥在7or;下进行。44.抗高血压药物组合物，其含有(l)结晶盐酸乐卡地平和选择性地乐卡地平的其他形式，其中所述的结晶盐酸乐卡地平选自盐酸乐卡地平晶形(ii)、和其含预定量的各种晶形的盐酸乐卡地平晶形(n)与盐酸乐卡地平晶形(1)的组合，和(2)至少一种选自药学可接受载体或稀释剂、矫味剂、增甜剂、防腐剂、染料、粘合剂、助悬剂、分散剂、着色剂、崩解剂、赋形剂、润滑剂、成形剂和可食用油的组分；其中盐酸乐卡地平晶形(n)如权利要求i中所述，盐酸乐卡地平晶形(i)在波长Ka下的X射线衍射图案中显著峰的间距、i/io比和29角是<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>45.含有权利要求44的抗高血压药物组合物的单位剂型。46.权利要求45的单位剂型，其中该剂型是乐卡地平即释剂型47.权利要求45的单位剂型，其中该剂型是乐卡地平緩释剂型48.权利要求47的单位剂型，其中该剂型包括乐卡地平即释相和乐卡地平緩释相。49.权利要求48的单位剂型，其中该组合物含有0.1-400mg盐酸乐卡地平。50.权利要求49的单位剂型，其中该组合物含有l-200mg盐酸乐卡地平。51.权利要求50的单位剂型，其中该组合物含有5-40mg盐酸乐卡地平。52.权利要求23和24的任一项的分离的乐卡地平晶形，具有D502-8pm和D90<15(im的平均粒度。53.权利要求44的抗高血压药物组合物，其中该盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)每种均具有D50%2-8nm和D90%<15|im的平均粒度。全文摘要本发明描述了新的乐卡地平粗形(A)和(B)、由所述粗形得到的盐酸乐卡地平新晶形(I)和(II)、含有至少一种盐酸乐卡地平晶形(I)和(II)作为活性剂的抗高血压药物组合物及其使用方法。文档编号B01D9/02GK101475524SQ20081018123公开日2009年7月8日申请日期2002年8月5日优先权日2001年8月6日发明者A·莱昂纳迪,F·博尼法斯欧,F·卡姆帕纳,艾斯G·德申请人:雷康达蒂爱尔兰有限公司