专利名称：快速测定黄姜的薯蓣皂甙元的制作方法
一.技术背景本发明涉及在测定黄姜的薯蓣皂甙元过程中简化薯蓣皂甙元提取及测定程序。薯蓣皂甙元的测定一直是生产和科研上的难题。目前，所有的薯蓣皂甙元测定方法如重量法，分光光度法，库仑滴定法，薄层扫描法，比色法，液(气)相色谱法等都必须经过对待测样品先回流提取后才能进入下一步测定，过程繁琐，一般一人一天只能测定1-2个样品。而皂素厂家在收购黄姜干片和黄姜育种工作者检测大批样品时都需要快速测定样品的薯蓣皂甙元含量，每个样品的测定价格目前在400元左右。目前通用的复杂测定方法成为黄姜产业的一大障碍。本法操作简单，测定结果精确，与其他传统测定方法所测得的结果无显著差异，一人一天能检测十几个样品，且所需仪器药品少，价格便宜。
二.本发明技术方案1.浸提方法取少量盾叶薯蓣根状茎切碎80℃烘干4小时，粉碎，过40目筛，再80℃烘干至恒重，精确称取根粉100mg，用1M硫酸沸水浴酸解4小时，抽滤，用1M氢氧化钠调至中性，滤渣80℃烘干2小时，加入100ml无水酒精，震荡0.5小时，静止15分钟，作为待测溶液。
2.测定取0.5ml待测溶液于10ml具塞试管中沸水浴迅速挥干，然后加入5％的香兰素冰醋酸新鲜溶液1ml和浓硫酸1ml摇匀后塞紧试管塞80℃水浴15分钟，20--25℃水冷1分钟左右，每管加入冰醋酸2ml，静置25-30分钟，在460nm处测其吸光度3.计算公式(依据标准样测定算得)0.1-10.0％含量范围内的回归方程Y(百分含量％)＝10×(0.0523+1.3781X-0.2747X2)(X为吸光度。回归方程根据不同的分光光度计的参数不同而不同)三.本发明的积极效果1.免去回流提取过程，简化设备，降低成本2.与目前通用的测定方法相比，本法在相同的时间内可测定大批样品3.所需样品极少，因此可用来检测微量实验材料的薯蓣皂甙元含量4.精确度高四.应用举例(传统测定方法与浸提法比较)1.传统方法测定取4年生盾叶薯蓣根状茎洗净切碎，在80℃下烘干4小时，粉碎，过40目筛，在80℃烘干至恒重，精确称取10克(另精确称取50毫克作为浸提法测定之用)，1M硫酸沸水浴酸解4小时，0.1M氢氧化钠中和至中性，抽滤，滤渣80℃烘干2小时，置于索氏提取器中以石油醚在80℃水浴中回流提取20小时左右，用0.1克活性炭脱色，过滤，用新鲜石油醚反复冲洗活性炭4～6次，滤液定容至200ml作为待测液。取0.5ml待测液于10ml刻度试管中沸水浴挥干，先后加入5％的香兰素冰醋酸新鲜溶液1ml和浓硫酸1ml摇匀后塞紧试管塞80℃水浴15分钟，20--25℃水冷1分钟，每管加入冰醋酸2ml，静置25-30分钟，在460nm处测其吸光度。经测定得平均吸光度为0.1738，根据公式(2)算出该样品的薯蓣皂甙元含量为2.835％。剩下的199.5ml待测液回收石油醚后在105℃下烘干至恒重，精确称重并减去容器的重量得到0.2865克，计算得百分含量为2.865％。因为重量法测的是甾体总皂甙元，而分光光度法是专一测定薯蓣皂甙元，所以重量法测定的结果较高。
2.浸提法测定用上述精确称取的50毫克烘干样品粉末加入1.0M的硫酸10ml沸水浴酸解4小时，用0.1M氢氧化钠中和，抽滤，滤渣80℃烘干2小时，再对滤渣连同滤纸一起用50ml无水酒精震荡浸泡0.5小时，取0.5ml溶液沸水浴挥干，按上述“浸提方法”测其吸光度。测定重复5次得平均吸光度为0.1788，计算得该样品的薯蓣皂甙元百分含量为2.899％。由于没有经过活性炭脱色，所以皂甙元没有损失，因而测定结果较高。
权利要求
1.薯蓣皂甙元的测定用微量浸提法其特征是在提取薯蓣皂甙元时取酸解后的烘干样品用无水酒精，乙醚，石油醚，氯仿等有机溶剂浸提。
2.根据权利要求1所述，在测定过程中分离皂甙元用微量样品(50mg)，而其他所有测定方法如重量法，气相色谱法，液相色谱法，分光光度法等都用大量样品(5g以上)。
3.在提取薯蓣皂甙元时，本法采用有机溶剂浸提，而其他方法均采用回流法提取。
4.本法使用对象范围是含有薯蓣皂甙元的植物根，茎，叶，果实和种子，且专一性测定样品中含有的薯蓣皂甙元。
全文摘要
黄姜的薯蓣皂甙元的测定一直是生产和科研上的难题。目前，所有的薯蓣皂甙元测定方法如重量法，分光光度法，库仑滴定法，薄层扫描法，比色法，液(气)相色谱法等都必须经过对待测样品先回流提取后才能进入下一步测定，过程繁琐，一般一人一天只能测定1－2个样品。本法使用微量的黄姜样品，避免烦琐的回流提取，对样品酸解后直接采用无水酒精，乙醚，石油醚，氯仿等有机溶剂浸提，然后用分光光度法测定浸提液的吸光值，再根据标准工作曲线即可算出样品的含量。该方法简便快速，在黄姜薯蓣皂甙元的测定上尚无先例。
文档编号G01N1/28GK1740774SQ20041004669
公开日2006年3月1日 申请日期2004年8月24日 优先权日2004年8月24日
发明者易自力, 董静洲, 蒋建雄, 黄丽芳 申请人:易自力, 董静洲, 蒋建雄