专利名称：基于核酸的新示踪剂及其应用的制作方法
技术领域：
为了防止由病人、医学干预或其它活动产生的气溶胶而引起的医院中的交叉感染，每个病房甚至每个病床都应该单独的通风。本发明提供了测定是否满足上述条件的方法。另外，本发明提供了一种新的工具用于试验模拟、测定呼吸道传染疾病爆发的传播范围和表面、地下水和空气的污染源的追踪。
本发明进一步提供了产生气溶胶的便携式轻便的仪器和方法，所述气溶胶载有病毒和细菌模拟物来模拟由人类在造成的肺部气体的喷射如咳嗽、打喷嚏的活动过程中产生的传染性气溶胶。
本发明还提供了收集周围空气样本的方法用于分析它的组成成分，特别是收集是气溶胶化的大分子，以模拟空气传播的病原体的传播，从而评价通风的充分性和来自病房和实验室的空气传播的病原体的安全性。
空气中可采集到的其它成分是空气中的稀有同位素，生物学物质(花粉、病毒、细菌、真菌孢子)、和通常不存在、但是由于自然现象(如甲烷、氧化硫、一氧化碳、二氧化碳)或人类活动(善意的目的、恶意的目的、调查研究的目的、无心的疏忽或无心的调查研究，例如调查研究时释放出的示踪气体，或者是用于研究或鉴定通风情况和疾病传播模拟时的其它类型的示踪剂分子)而释放的化学物质。
背景技术：
由于洁净水源的提供带来人类的健康状况极大的提高，因此我们呼吸的空气就成了最后的前线。室内空气的污染和恶化，呼吸道病原体引起的交叉感染现在正严重的威胁到群居的人类的健康。人与人之间传播的高传染性的空气传播疾病有着指数性感染大量人员的潜力，并且给卫生防护体系、公共健康和经济等带来了相当大的压力。
机场和火车终点站、地铁(地下的)系统、宾馆、会议室和展览中心、博物馆和公共图书馆、政府办公室和学校是一些人们大量聚集和来往的场所的例子。医院就成了为日益老化的人们解决处理复杂的疾病的物理场所，而且需要各学科之间的协作和昂贵、通常是大型的设备。
大多数医院有数百名病人和工作人员。然而，当面对空气传播病原体和室内空气污染的威胁时，大部分的医院过时了。在同一房屋的病房里不断的入住一名以上的病人，并且病床与病床之间缺少单独的通风。结果导致在危险被确定之前，空气传播的传染性疾病就有机会在病人与病人之间传播。
在空气传播的传染性疾病爆发时传染病医院或病房便成了人们的心理保障。如果这些场所对于医源性传染病是安全的，赢得这场抵抗病原体战争的信心就会增强。另一方面，如果卫生防护工作人员们都病倒了，然后是卫生防护体系，最后公众就会陷入恐慌中。
为了确保上述设施针对这些事件是安全的，今后的建筑都要进行严格的设计和检测。现在的建筑也需要针对这些事件进行安全性检测。为改进通风和排水系统所做出的任何变动都必须进行检测，以确保上述进行的工作符合预定的标准。需要一种可靠的检测方法。
现有技术示踪剂以前检测通风情况的方法依靠烟雾或气态的示踪剂及它们的检测技术，包括烟雾传感器、化学传感器和激光成像。尽管灵敏性很高，特别是使用最新的气相色谱仪进行的检测，但其灵敏度仍然不能满足传染病医院的更迫切需要。然而，时常基于防护足够的假设，也没有进行检测。
已经有超过75种的气态示踪剂(http://www.gasimaging.com/GasesDetected.html)。经常用的两种示踪剂是SF6和PFT，它们检测的灵敏度范围分别是百万兆分之一(10-12)和十亿兆分之一(10-15)。
这些灵敏度的范围远远小于基于核酸的示踪剂，单拷贝的这些示踪剂就可以被检测到。
气溶胶产生器和空气采样器在空气传播疾病，例如肺结核和病毒性呼吸道疾病传播的模拟和调查研究中，或者是在研究针对于上述空气传播疾病在病房环境中的安全性中，产生相当于由人产生的体积范围，且在尽可能类似于在打喷嚏和咳嗽时的气溶胶的能力是非常重要的。
问题的关键在于只有通过模拟人类我们才能得出对于危险的准确评估和制定用于改善医院环境的现实目标。
一些产生气溶胶的方法得到了气溶胶的偏斜的图谱，气溶胶飞沫尺寸不同于由人在咳嗽和打喷嚏时的情况。气溶胶飞沫太大以至于不能够模仿优先沉淀在肺部而不是在上呼吸道的小的飞沫。另外，非常小而均一的气溶胶飞沫，当它们与一定程度的气流结合时，由于喷射的方向和气溶胶的速度，在那些较大的飞沫可沉降的区域可能会给出错误的阴性结果。
这些气溶胶产生器通常不产生脉冲或很难设计来产生模拟人打喷嚏和咳嗽时的脉冲。相反，产生的是一股连续的气溶胶。除了不能模拟人之外，这些气溶胶产生器采用挥发性示踪剂气体，给出不可能进行解释的结果。在一个有限的空间里释放这些示踪剂气体不能模拟由气溶胶传播的病毒。这是因为气体分子通过扩散很快占领了容器的整个空间；任何示踪剂气体被引入病房时就会迅速的扩散到整个病房和外面，就不可能模拟通过气溶胶飞沫传播传染性疾病因子时的情况，由于有更多的重力作用在飞沫上，产生了不同的分布动力学情况。
许多已有的气溶胶产生器不仅体积大而且需要过多的溶液来启动机器，使得它们很难应用在特定的情况下和采用特定的反应溶液。
现在已有可以产生低压力气溶胶和较大的飞沫的便携式气溶胶产生器，主要用于传送药物到支气管粘膜治疗哮喘(4,566,452；5,007,419；5,,040,527；6,567,686；6,615,824)。低的喷射速度和大的飞沫不能完全模拟咳嗽和打喷嚏。
在没有能释放出满意的气溶胶飞沫尺寸范围和合适的喷雾速度的便携式气溶胶产生器对人的喷嚏和咳嗽的有效模拟的情况下，就不可能评价在医院病房环境中医院空气传播疾病的实际危险。
释放气溶胶后，迅速的在研究或调查地点采取空气中典型样本的能力在研究气溶胶分布的过程中是重要的一步。能够迅速的做到这一点是很重要的，因为在调查期间需要在不同的地点获取多个样本。采取这些样本的同时这些样本也提供了当时情况的“快照”。拼合多个这样的快照就能重现当时气溶胶分布的特征。
可以使用多种空气采样方法，例如通过液体介质泵入空气(6,605,446；6,619,143；6,477,906；6,550,347)，使空气流过接近于介质表面(6,446,514；6,565,638)，使空气冲击介质表面(6,514,721；6,463,814)，将气溶胶或其收集物活化成为液体流(6,506,345)或将一股气流分裂开来减速后分析其中有代表性的一部分(6,553,848)。收集所关注的成分的典型样本，然后再做微生物培养或化学分析。
所有这些方法或者是定性的或者需要太多的时间来收集样本，从而不能给出定量的数据或及时的提供给定地点准确的快照。不能提供准确的快照意味着不能够实现多个快照重现在气流的动力学评价中的系列事件。
发明概述本发明提供了依用户设计的合成寡核苷酸、天然的DNA分子、及它们的衍生物作为示踪剂和用核酸扩增及其它手段检测它们的方法。示踪剂检测的灵敏度仅仅受(从环境中)收集样本的能力的限制，而与样本的浓度和绝对数量无关。
本发明也提供了产生咳嗽和打喷嚏时由人产生的气溶胶飞沫的便携式装置和方法，能够释放出示踪剂分子附着在上述的气溶胶飞沫上和进行随后的检测，因此可以确定针对空气传播的呼吸道病原体传播而言周围环境的相对安全性。
另外，本发明提供了在目标地点迅速获取典型空气样本的方法，和分离、运送和提取目标空气中载带的物质之方法，以进行后续的实验室检测和定量分析。
本发明也提供了一种通过在一段时间内多个样本的采集重现气流的动力学的方法，同时也提供了研究在不同的通风条件和人类活动下的给定地点的气溶胶飞沫空间分布的方法。
定义“寡核苷酸”是指DNA、RNA，以及它们的单链或双链和任何的化学修饰。修饰包括，但不仅限于这些，如改变或提供其它的化学基团。
“示踪剂”是指由许多相同物品(Items)、通常是分子组成的物质，它是可以扩散的，并且在随后的采集和阳性鉴定中能够提供通过它的存在而获得的信息。
“医院性传染”是指在医院或医疗机构内传染性疾病从一个病人传染给其他的病人。
“杂交”在本申请中是指两条互补的DNA单链的融合(DNA/DNA杂交)，或互补的DNA和RNA链的融合(DNA/RNA杂交)。
“限制性位点”是指一段短的DNA序列，经常是4-8个碱基对长并且通常是回文结构的，它可以被限制性核酸内切酶所识别。
“多态性”是指在群体中以显著频率存在两个或多个变体(等位基因，表型，序列变体，染色体结构变体)。
“限制性片段长度的多态性”是指由于多态性存在或不存在特定的限制性位点所致的等位基因的限制性片段的大小的多样性差别。
“聚合酶链式反应(PCR)”是关于一种在试管中产生一段DNA片段的大量拷贝的技术。它采用重复的热循环，包括DNA双链的降解，合适的寡核苷酸引物的退火和通过聚合酶使引物的延伸。
“GeneBank”-GeneBank是NIH遗传学序列数据库，是所有公众可以获得的DNA序列的有注解的汇集物。
附图的简要说明
图1描述的是医院病房里有六张病床的房间。
图2显示了准备在病床中的一张回收示踪剂的情况。
图3描述了作为模拟空气传播的传染性疾病源向另一个病床以气溶胶的形式示踪剂的释放。
图4是人工操作的空气采样装置的示意图，这里是通过拉动活塞来采集周围环境的空气。
图5描述了一种空气采样装置的另一种实施方案，当用一根中空的针管瞬时刺穿橡皮塞时被橡皮塞住的真空管就吸入了空气。
附图的详述图1-3在实施例2中详细叙述(参见以下部分)图4显示了空气采样装置一种实施方案的主要成分。在使用前容器(10)在入口孔(11)处是密封的。活塞(12)沿着容器的内壁运动，它是气密的。当解除入口孔(11)处的密封时，拉动活塞将空气抽入到容器内。容器内有预定量的不含脱氧核糖核酸酶的缓冲电解质溶液(13)。当采样到空气后，再将入口孔(11)处密封直到带回实验室分析。
图5A描述了空气采样装置的另一种实施方案，包括仅一端开口的容器(10)，被橡皮塞(14)所密封。示意性弯曲的橡皮塞(14)表明容器内部是真空的。该装置含有预定体积的不含脱氧核糖核酸酶的缓冲电解质溶液(13)。
图5B说明了用中空的针(15)刺穿橡皮塞(14)而收集的空气样本，在这种情况下，容许对存在于空气中的示踪剂分子(16)进行采样。
图5C.拔掉中空的针后，容器内的空气就与外界的空气隔离了。示踪剂分子(16)进入到溶液中，准备在实验室提取出用于分析。
优选实施方案的详述示踪剂本发明给出了作为示踪剂的合成寡核苷酸、天然DNA分子、及其衍生物的新用途(实施例1-3)。这些分子载有序列信息，这些序列可以经过特定的设计使其成为独特的，可以和编录在目的生物天然存在的DNA数据库(GeneBank)作比较。每段寡核苷酸的长度都可以不同，但是优选在30-150个核苷酸之间，更优选50-120个核苷酸之间，进一步更优选60-80个核苷酸之间。合成的寡核苷酸也可以连接起来形成较长的示踪剂。天然的DNA分子可以为不同的长度，优选是在100-3,000个核苷酸之间。
寡核苷酸示踪剂的设计设计这样的的寡核苷酸可以通过以下的方法实现1.敲击键盘随机的生成一段A、T、G和C的字串2.随机的改变天然存在的DNA序列或3.在一篇英语文章里删除空格和标点符号，然后提取出所有的As、Ts、Gs和Cs以构成寡核苷酸序列
4.任何其它的生成随机寡核苷酸序列的方法。
可以使用没有经过化学修饰的寡核苷酸。或者，它们可以通过在合成的过程中引入其它的部分、改变成其它的形式如硫逐磷酸酯(phosphorothioates)、或者在骨架中使用不同于脱氧核糖或核糖的其它糖类物质来进行化学修饰。这些修饰必须不使分子变的不稳定或在扩增步骤中不被聚合酶所阅读。
寡核苷酸可以是单链的或双链的DNA或RNA，DNA/RNA杂合体，或嵌合的DNA/RNA分子。DNA寡核苷酸(脱氧寡核糖核苷酸)可以做成双链的然后嵌入到载体或质粒中，就可以在细菌、酵母或其它细胞中增殖。DNA寡核苷酸也可以引入到生物体的基因组中，如大肠杆菌，酵母，或其它的细胞，可从上述生物体中提取出来总DNA并用作示踪剂。
寡核苷酸及其衍生物可以以裸DNA或RNA使用，但优选是被脂质体、人乳头瘤L1病毒样自组装蛋白或其它蛋白、或具有相对为中性的电荷的其它自组装生物分子或聚合物包被。这使得寡核苷酸不会过强地粘附到物体上，而是更加稳定，更好的模拟病毒或其它致病菌，更易于从环境中回收来进行分析。
怎样确定寡核苷酸示踪剂是独特的为保证序列是独特的，且通常在周围的环境中是不存在的，有两种方法可以使用。
1.在NCBI BLAST主页上访问几个工具进行检索(http://www.ncbi.nlm nih.gov/BLAST)。用来检索数据库的这些工具包括标准核苷酸-核苷酸BLAST，MEGABLAST和“近于精确匹配的简称检索”。将序列信息输入到数据库的查询栏里(BLAST)，可以将该序列相对于生物圈中任何已知的序列来对准排列，修饰后使它成为独特的序列。事实上可设计出无限数量的独特序列，因为在寡核苷酸序列实际有无限长度的条件下，组成寡核苷酸的4种核苷酸(腺嘌呤、胸腺嘧啶(在RNA中是尿嘧啶)、鸟嘌呤和胞嘧啶)的排列组合实际上是无限的。可能的组合数量与寡核苷酸的长度之间的关系，由下述的方程式来表示C＝4n，这里C表示组合的数量，n表示组成寡核苷酸的核苷酸的数目。
将与任何已知的序列不明显匹配的寡核苷酸示踪剂输入被本申请的发明者保存的一个新的数据库中。以后当需要时，对它们之间进行相互的对比。
2.为了确定在周围环境中不存在所述寡核苷酸示踪剂，一种可选择的步骤是进行实地检测。为此，提供了一种检测的方法。一种检测寡核苷酸存在的方法是使用聚合酶链式反应(PCR)的技术。设计一对引物来扩增寡核苷酸区域。从周围环境中采集到样本，带回实验室用这些引物来检测。还针对寡核苷酸来检测这些引物。如果在存在寡核苷酸的条件下检测到反应产物但在示踪剂散布之前没有在周围环境样本中检测到寡核苷酸扩增产物的存在，那么这样的寡核苷酸就是独特的，可以用作示踪剂。
关于可编码寡核苷酸的信息关于示踪剂的信息，例如制造商、生产日期、序列识别码和批号可以编码到由引物扩增的区域内或区域之外。举例来说，由两种核苷酸组成7位的序列，例如用腺嘌呤和胸腺嘧啶分别代表0和1，使用美国信息交换标准码(ASCII)，下述的序列则表示数字8ATTTAAA(0111000)。大写字母T用下述的序列表示TATATAA(1010100)。数字条形码的开头可以是4个连续的G，或其它的序列组合，结尾可以设计成其它的序列。或者，使用10个核苷酸的编码来表示英语单词，可以编码1,048,576(410)个不同的单词。不需使用很长的句子，一个英语单词，例如名字“Richard”可以指定来代表寡核苷酸，其由XXX公司在2003年9月1日生产，序列ID号是238888、生产批号是238。
作为示踪剂的天然核酸来自任何生物的由天然序列组成的DNA或RNA分子也可以用作示踪剂。可以由PCR、限制酶切消化、转录、化学合成等方式产生这些核酸分子。在使用天然的核酸作为示踪剂之前，使用上述的方法可确定这些分子不在待检测的环境存在。另外，从生物体分离出来的DAN或RNA也可以用作示踪剂，只要在检测的场所不存在这样的核酸。
使用示踪剂作为周围环境的调查工具为了作为示踪剂使用，将寡核苷酸、天然的核酸或它们的包被形态溶解或悬浮在对环境友好的液体中，如水溶液或缓冲液中。寡核苷酸、天然的DNA或它们的衍生物也可以溶解在明胶、甘油或其它物质的溶液中，使它们具有一定的粘性以便更好的模拟当释放到环境中时体液中存在的病毒。
寡核苷酸或天然的核酸示踪剂的典型备用液可具有的浓度范围是1-1000毫摩尔/L，但优选10-100毫摩尔/L。在使用前这种备用液通常稀释10-106倍。
存在的其它成份包括稳定剂，用来防止脂质体或病毒样颗粒的凝集；防腐剂，用来抑制细菌、藻类或真菌的生长；缓冲盐，用于维持预先确定的pH值。
重要的是溶液中不能含有DHase、Rnase、脂肪酶和蛋白酶，要在没有这些污染物的容器和水中小心的制备混合物。
使用前，在实验室稀释备用液，要特别的防范上述强调的。应当在特殊的防护罩和房间里处理寡核苷酸和天然的核酸，以防止实验室、不同的备用液瓶和个人的污染或疏忽的将寡核苷酸或天然核酸排放到外部环境中。
另外，在实地的检测以确定寡核苷酸或天然的核酸示踪剂的存在及其浓度之前要采样。
一个增加的预防措施是，在实地试验后将一部分示踪剂溶液保持在容器中并带回实验室，以确定寡核苷酸或天然的核酸示踪剂在全部实地试验中是否仍然是稳定的和可测的。
为了研究通风情况，在研究的地点将寡核苷酸或天然的核酸示踪剂释放到空气中，例如医院的病房。为此，需要将寡核苷酸或天然的核酸以溶液的形式悬浮在空气中。
作到这一点的一个办法是，使用产生尺寸大小均一的飞沫、其直径范围在1-5微米的机器，依赖于是模拟空气传播疾病还是通过飞沫传播的疾病。这是因为空气传播疾病通常由等于或小于1微米的小微粒引起，而通过飞沫传播的疾病依赖于尺寸范围在5微米内的较大的飞沫。
可以使用多种技术在险测地点产生气溶胶，包括简单的沸腾(适合于裸露的寡核苷酸或天然核酸-脂质体和蛋白质，其在100℃的条件下降解或分解但仍能将寡核苷酸和天然的核酸装入病毒样颗粒)，超声气溶胶，压电晶体(喷墨打印机)，简单的机械搅动，或通过有预定深度(压力)的容器起泡空气。在模拟的条件下，允许气溶胶的散布。
如果在较远的位置回收到寡核苷酸示踪剂或天然的核酸(在实验室可检测到)，这就构成由于附近位置释放了天然的核酸或空气传播的寡核苷酸在较远的位置存在着交叉污染的证据。如果在上述试验之前已起动或已存在通风和其它屏障来阻止这样的情形出现，则可认为在实际空气传播传染病爆发时这些措施是不适当的。
寡核苷酸示踪剂的回收从离气溶胶较远的位置回收到示踪剂寡核苷酸，意味着在空气传播传染性疾病爆发的情况下，住在那里的患该疾病的病人对较远位置处的未感染的非免疫人来说存在着真正的危险。
可以使用几种方法之一回收寡核苷酸或天然的核酸示踪剂分子，单独或组合的使用1.擦拭——用电解质溶液湿润的消毒棉签。这样的棉签头里不含有PCR的抑制剂，或降解示踪剂的酶。电解质溶提供了阳离子，它可以与带负电荷的寡核苷酸分子结合，有利于从周围环境中的目标物转移到棉签上。
2.提前在环境中安装好寡核苷酸或天然的核酸示踪剂分子的“登陆垫”，在为实验室鉴定任何附着的寡核苷酸或天然的核酸示踪剂分子而释放示踪剂后，移走垫子。垫子可以是塑料的粘接覆盖物，固化的琼脂糖凝胶，尼龙膜，硝酸纤维素膜，开口的试管(其中含有或不合有溶解示踪剂的缓冲溶液)，或能够可逆的结合寡核苷酸示踪剂、或不降解示踪剂、并且不抑制后续的PCR的其它物质。
3.使用被动的或主动的从周围环境中采取空气样本和示踪剂，(如果存在的话)的机械装置。一旦在装置里面，就使空气鼓泡通过如水和通常的缓冲液的液体以将寡核苷酸溶解在该液体中，再有，液体里不能含有PCR的抑制剂或降解示踪剂的酶。然后在实验室里分析液体中示踪剂的存在。
检测寡核苷酸或天然的核酸示踪剂的方法示踪剂寡核苷酸可以用各种技术来检测，例如Wstson-Crick碱基配对(杂交)，序列测定(检测序列的信息)，限制性片段长度多态性(特异性位点的酶切和检测由子序列片段长度携带的信息)，或核酸扩增(聚合酶链式扩增或其它的扩增)。使用核酸扩增，即使是一个拷贝的示踪剂也能被检测到，呈数量级地极大的提高了示踪剂检测的灵敏度。因为少至5个腺病毒或三个流感病毒颗粒就可产生感染，本发明提供了一项根据任务的需要以极高敏感度来模拟病毒的技术。
检测和定量分析寡核苷酸或天然的核酸示踪剂优选使用PCR技术或其它的核酸扩增方法，例如那些在等温条件的技术检测示踪剂。
有一些制造商市售实时定量分析PCR仪器和试剂盒。可使用这些中的一种利用我们特殊设计的引物套来检测和定量分析的寡核苷酸或天然的核酸示踪剂。
医院病房环境安全性的评价为了模拟一间病房中携带流感病毒A或其它感染的病人(与其他5个病人共用一间房屋)，在病床上产生1-5微米(产生的飞沫或核酸的全部范围)的气溶胶，来模拟由不带口罩的病人在诸如咳嗽或打喷嚏的活动过程中产生气溶胶。随后在几个预定的时间间隔下采集其它病床上、公共区域如浴室、或护士站的物体上的样本，然后在实验室里分析寡核苷酸或天然的核酸示踪剂的存在。为了模拟由飞沫传播的疾病，仅产生较大的气溶胶飞沫。各种口罩的有效性，例如三层的手术口罩、N95口罩或N100口罩，可以在带有由这些口罩之一掩蔽的开口腔里产生气溶胶来评价。
对这一过程进行改动以评价其它的活动，例如从鼻支气管痰的吸入，胸部物理疗法，将药物传送到呼吸道的喷雾治疗，通过超声气溶胶进行的气道润湿(mosturization)，和由各种机器产生的人工通风情况。吸入器或其它的吸入装置可能需要一个进口阀以防止吸入装置突然关闭时气溶胶的产生。正压力设备，如通风设备和喷雾器需要另外的改进以防止气溶胶的产生，用作传播传染性因子的媒介。改进只能是本发明所定义的那些严格的技术所允许的。
对医院病房里已有的通风情况和结构进行昂贵的改造前，最好是用寡核苷酸或天然的核酸示踪剂来测试一下任何计划中模拟的病房。然后改进病房和重新测试改进后的情况。如果重新测试的结果是令人满意的，那么这样的工程和建筑工作被认为的合适的，可以铺设到实际的医院病房里去。
同时进行多项目的检测因为在给定的模拟医院病房里需要检测多种活动，从时间和精力角度感兴趣的是对不同的活动仔细的计划和设计多种寡核苷酸和/或天然的核酸示踪剂，并同时在模拟的医院病房里检测它们。
例如，设计一组寡核苷酸或天然的核酸示踪剂和引物来评价小的气溶胶(直径为1微米或更小)。设计另一组来评价较大的飞沫(直径5微米或更大)。设计第三组来评价三层手术口罩在防止较大飞沫传播时的效果。设计第四组来评价吸痰器。最后，在启动新设计的通风系统时设计另外的四组来评价上述的所有情况。这种方法的优点得以实现，因为事实上独特的寡核苷酸示踪剂的数量是不受限制的并且可以产生出很大量的天然的核酸示踪剂，如在“怎样确定寡核苷酸示踪剂是独特的”和“作为示踪剂的天然核酸”这两部分所描述的。
便携式气溶胶产生器根据本发明，由从液体溶液中产生一定范围大小的气溶胶的小型便携式装置可产生气溶胶。产生的飞沫大小的范围从小于1微米到大于10微米，接近于由人在咳嗽和打喷嚏时产生的飞沫。
在一种优选实施方案中，该装置包括一个压缩空气罐，由对臭氧层友好的推进剂驱动，所述罐具有一出口，该出口紧密的连接到可分离的刚性塑料管上，该刚性塑料管道的内径均一且直径(小于2毫米)是已知的。出口(喷嘴)是气密性的除了在即刻打开启动装置时，由于空气和推进剂在一定压力下的逸出，可以在使用前用空气压缩罐的重量和在实验室里测定的标准曲线来确定压力值。
为了将溶液装入到塑料管中，将干净的、以前没有用过的塑料管一直浸入直到其触及含有预定量溶液的圆锥形末端试管的底部。使流体在两三秒内流入管道后，管道的顶端用带着手套的手指密封住，并将其移走。将管道倾斜到水平位置擦掉过量的液体。瞬间地将插入到溶液的一端倾斜到在水平面之上成45度，然后用密封的手指轻轻的敲试管的另一端一至数下，管的那端就有一小部分空气逸出，一小部分的溶液滑落到管的主体部分里。这防止了在管道连接到空气压缩罐的喷嘴时，溶液滴落到管道外。
或者，可以使用皮下注射器将溶液装入，在轻轻推动活塞清空注射器之前，将针头插入到管道的内腔里。作为替代，可以使用多剂量小的分液器，它的一端细小，易于滑入到刚性塑料转接管的内腔里。
如此采取了上述的预防措施，用带着手套的手指密封着的转接管的一端需小心的紧密连接到空气压缩罐的喷嘴上。现在这种便携式的气溶胶产生器已准备好可用于喷射。
由于人的鼻子是朝下的，为了模拟人在坐着时打喷嚏，管道的端口也应该朝下且几乎垂直于病人坐的床或椅子大约1米的高度。为了模拟咳嗽，管道的端口朝前，水平于地板或朝向天花板。它也可以朝向床面的侧边，来模拟病人侧身躺在病床上咳嗽时的情形。
为了释放出气溶胶，传送一快速的压力给触发器并持续1秒钟。这样就有效地在管道里气溶胶化出溶液的飞沫了。迅速的释放压缩空气可以更好的模拟实际的咳嗽和打喷嚏，它是有力的，虽然依赖于个人的力量。
气溶胶产生器的安全操作要求使操作者背离管道端口的朝向，他应该采取额外的预防措施以防止吸入过多的推进剂，且在气溶胶产生的时候暂时腾空房间里的物品。如果房间太小通风又差，就不允许使用过量的推进剂。没有推进剂的压缩空气在这些条件下是不受限制的，也因此更适合。
为了更好的模拟一阵的打喷嚏和咳嗽，这是正常的情形，通常也不是单个的喷嚏或咳嗽，这个过程可以依据上述的要点重复几次。将溶液装入到管道中相对而言可迅速的完成，特别是经过一些练习或使用多剂量的分液器。
通过对产生的压力(通过使用前空气压缩罐的重量和标准曲线来获得)、空气释放的持续时间、管道内腔的直径、及其浸入溶液的深度(或是分配到接受管里溶液的体积)、和其它的参数的标准化，可以获得一个标准化的和有广泛代表性的气溶胶飞沫图谱和喷射的速度。重要的是，以模拟人在打喷嚏和咳嗽的频率和喷射速度产生了模拟人打喷嚏和咳嗽时的气溶胶飞沫的尺寸范围。
管道端口可朝向的不同方向也能模拟病人的不同位置时的情况，可以对病人的不同位置和共用一个病房里的邻近病人的影响作出评价。
在便携式气溶胶产生装置的另一种实施方案中，通过人工将空气泵入到小腔中来提供压缩空气，所述小腔储存了加压空气。将一个压力计连接到压缩空气腔上，给操作者提供空气压力的读数，当达到预定的压力值时他可以停止泵入空气。释放机构通过拉动触发器来操作，它能-个细小的出口迅速的释放出压缩的空气。通过将该出口与装有示踪剂溶液的转接管相连，溶液被喷雾到周围环境中以模拟人的咳嗽或打喷嚏。这种装置中的空气可以由与所检测的环境隔离的未经压缩的空气袋提供，因此装置中就没有空气循环的发生。通过这种方法，示踪剂就不会污染装置的内部，因此同一个装置还可以使用其它的示踪剂。这种实施方案还有其它的优点包括能够对用于使示踪剂溶液产生气溶胶的空气压力进行计量和标准化和改变空气压力以适应不同模拟情况的能力。不需要化学推进剂。
便携式空气采样器根据本发明，该装置包括一个提前清空的或真空的、气密的、圆柱形的空腔，一个入口部分，一个可选择的出口部分，一种自动或手动抽入空气的单元，和一种关闭或密封入口部分的单元，可以快速的抽取周围空气的样本，送到实验室进行后续的分析。可编程的、自动的、可重复的、多空气样本采样器由小的机械来控制，极大的方便了这一过程。
在一种优选的实施方案中，该装置可以是透明的或不透明的，由不透(气)的玻璃或塑料制成，它是中空的，和含有预先确定量的不含RNase和DNase的缓冲电解质溶液。该空腔的形状是圆柱形的，它的一端是一个相对较窄的开口，用橡皮塞封闭或随时可以用Parafilm M、生面团、熔化的蜡、或其它的材料密封。另一端较宽并装有活塞，它设计成可以沿着给定的腔室长度运动，所以在使用前，空气被完全排尽，保留电解质溶液，当拉动到预定的位置或停止时，空腔就吸入了周围空气的样本，最后空气压力与外界的相等。
在另一种优选的实施方案中，装有电解质溶液的腔将液体上方的空气抽出变成真空的。在这个例子中，该腔只有一端，因此看起来象只有一端的试管。橡皮塞紧固密封着腔的这一端。在将要采样空气的地点，用中空的针刺穿橡皮塞。真空的状况即时被打破，由于大气的压力空气进入到空腔里。经过一段短暂的时间间隔，当腔内部与外界的空气压力相等时，抽出针，橡皮塞密封住腔的内部，以防止它与外界更多的交换。或者，管可以用顶部的螺盖来密封，在采样的地点它可以瞬时的旋开使空气进入瓶内。
在上述的两种实施方案中，把采样到的空气带回实验室进行后续的步骤。为了确定先前释放到空气中的示踪剂分子的存在和数量，本发明提供了采集已知大小的空间内的固定体积的空气的方法，从而给出采集到的空气的浓度，该浓度为ppt(兆分之一)，或PPq(千兆分之一)。另外，这种空气采样的方法是方便的，快速的，并且能提供示踪剂分子浓度连续的快照。
所述的缓冲电解质溶液特别适合于提取带有电荷的大分子，例如单链的DNA，RNA，嵌合的/杂交的/光或化学改变的DNA或RNA，双链的DNA，DNA/RNA杂合体，DNA或RNA与蛋白或其它分子的混合体，或悬浮在空气中的微生物。
实施例1.寡核苷酸和天然DNA及其相应引物的实例(1)60个核苷酸及其引物的序列CATGAATTCC GCTGCATACC AATGTGTAAG30
CTAGATCAGT CAGGACTGAT CGAATTCCAG 60正向引物CATGAATTCC GCTGCATACC20反向引物CTGGAATTCG ATCAGTCCTG20(2)100个核苷酸及其引物的序列GGCTACCGCT CGCATACTAA TGGTGTACGA 30CAGCTCGAGC TATCTGCGTA CGTATCGTAT 60GCATGCCGCG CAGTAGGAGC ACTATATCGA 90GCTATCCATC100正向引物CGCTCGCATA CTAATGGTGT A 21反向引物TATAGTGCTC CTACTGCGCG G 21(3)100个核苷酸及其引物的序列GGCTAGGGGA TAGCTACTAG CCGTTTATTG 30CGCTATCTAC GTACTGATCC GTAGACGCGT 60ACATCAGCTA GCGTGCTAGC TACATCGACG 90CGCATTACGA100正向引物TACTAGCCGT TTATTGCGCT20反向引物TAATGCGCGT GCATGTAGCT20(4)100个核苷酸及其引物的序列CCGCTAGCGT ATATCGCGCC GATATCTACG 30CGGCTATACT ACCATTACGA CGATGCGCGC 60TTATCACACG GAGCATCGAC GTACGATTCG 90GTATTATTCA100正向引物TATATCGCGC CGATATCTAC G 21反向引物ATACCGAATC GTACGTCGAT G 21(5)人β-肌动蛋白cDNA(B1)片断及其引物的序列示踪剂B1的序列GATATCGCCG CGCTCGTCGT CGACAACGGC 30TCCGGCATGT GCAAGGCCGG CTTCGCGGGC 60GACGATGCCC CCCGGGCCGT CTTCCCCTCC 90ATCGTGGGGC GCCCCAGGCA CCAGGGCGTG 120
ATGGTGGGCA TGGGTCAGAA GGATTCCTAT150GTGGGCGACG AGGCCCAGAG CAAGAGAGGC180ATCCTCACCC TGAAGTACCC CATCGAGCAC210GGCATCGTCA CCAACTGGGA CGACATGGAG240AAAATCTGGC ACCACACCTT CTACAATGAG270CTGCGTGTGG CTCCCGAGGA GCACCCCGTG300CTGCTGACCG AGGCCCCCCT GAACCCCAAG330GCCAACCGCG AGAAGATGAC CCAGATCATG360TTTGAGACCT TCAACACCCC AGCCATGTAC390GTTGCTATCC AGGCTGTGCT ATCCCTGTAC420GCTTCTGGCC GTACCACTGG CATCGTGATG450GACTCCGGTG ACGGGGTCAC CCACACTGTG480CCCATCTACG AGGGGTATGC CCTCCCCCAT510GCCATCCTGC GTCTGGACCT GGCTGGCCGG540GACCTGACTG ACTACCTCAT GAAGATCCTC570ACCGAGCGCG GCTACAGCTT CACCACCACG600GCCGAGCGGG AAATCGTGCG TGACATTAAG630GAGAAGCTGT GCTACGTCGC CCTGGACTTC660GAGCAAGAGA TGGCCACGGC TGCYTCCAGC690TCCTC 695用来检测示踪剂B1的引物B1-F(OL322)5′-GACTACCTCA TGAAGATCCT C 21B1-R1(OL323)5′-CGTGGCCATC TCTTGCTCG19B1-R2(OL324)5′-AAGTCCAGGG CGACGTAGC19B1-F和B1-R1使用在第一次PCR循环中具有129bp的PCR产物。
B1-F和B1-R2使用在第二次PCR循环中具有110bp的PCR产物。
(6)人GAPDH cDNA(G2)的片段及其引物的序列示踪剂G2的序列划线部分是用PCR制备示踪剂G2时相应的引物位点。
CCCATCACCATCTTCCAGGAGCGAGATCCC30
TCCAA从TCA AGTGGGGCGA TGCTGGCGCT 60GAGTACGTCG TGGAGTCCAC TGGCGTCTTC 90ACCACCATGG AGAAGGCTGG GGCTCATTTG120CAGGGGGGAG CCAAAAGGGT CATCATCTCT150GCCCCCTCTG CTGATGCCCC CATGTTCGTC180ATGGGTGTGA ACCATGAGAA GTATGACAAC210AGCCTCAAGA TCATCAGCAA TGCCTCCTGC240ACCACCAACT GCTTAGCACC CCTGGCCAAG270GTCATCCATG ACAACTTTGG TATCGTGGAA300GGACTCATGA CCACAGTCCA TGCCATCACT330GCCACCCAGA AGACTGTGGA TGGCCCCTCC360GGGAAACTGT GGCGTGATGG CCGCGGGGCT390CTCCAGAACA TCATCCCTGC CTCTACTGGC420GCTGCCAAGG CTGTGGGCAA GGTCATCCCT450GAGCTGAACG GGAAGCTCAC TGGCATGGCC480TTCCGTGTCC CCACTGCCAA CGTGTCAGTG510GTGGACCTGACC522用来检测示踪剂G2的引物G2-F(OL37)5′-CCCATCACCA TCTTCCAGG19G2-R1(OL325)5′-GATCTTGAGG CTGTTGTCAT AC 22G2-R2(OL326)5′-GAGCCCCAGC CTTCTCCATG 20G2-F和G2-R1使用在第一次PCR循环中，具有222bp的PCR产物。
G2-F和G2-R2使用在第二次PCR循环中，具有115bp的PCR产物。
2.医院病房通风情况的评价本实施例举例说明了怎样应用本发明来评价医院病房在防止空气中传染性疾病医院传播中的安全性。
图1描述了一间有六张病床的医院病房房间(1)。病床(2和3)用大写字母(A-F)表示。安装了门帘或隔离物(4)和独立的通风排气装置(5)为的是私密性和/或屏蔽空气传播疾病的传播。本实施例中，病床A假定接受了一位患空气传播疾病的指示病人(2)。其他的病人之前没有感染或免疫这种疾病，因此容易感染医院传染性疾病。因为在同一个房间里指示病人(2)的存在，如果屏蔽和排气情况不充足，他们就有被传染的危险。假定这个指示病人没有到其它床位的可能性并且医务人员严格遵守在病人护理之间洗手及其它规定，那么空气就成了唯一的传播传染性疾病的介质了。
图2表明了怎样准备使用本发明检测。在每一张其余的病床上放置一块提前准备好的正方形纸板(6)其大小是1.0×1.0米。纸板(6)粘有10块“登陆垫”(7)以接收碰巧粘落在其上的任何示踪剂。这些“登陆垫”(7)每块大小为1cm×1cm。它们总共占了纸板面积的10-4，这样就可以测定出沉积在较远位置处(另一张病床)的示踪剂的量。接着将“登陆垫”(7)剥落下来装入到检测试管中带回到实验室。
图3说明了指示病人(2)的模拟情况，用装置(8)产生气溶胶(9)，它喷射时的速度模拟了人的呼吸，咳嗽或打喷嚏。独立运行的模拟的操作是，当排气装置(5)关闭时使用一种寡核苷酸或天然核酸的示踪剂，当排气装置打开时使用另一种寡核苷酸或天然核酸的示踪剂，从而对排气装置阻止空气污染到其它的病床的功效进行评价。
上述的评价是必需的，因为散发出存在于呼吸道分泌物的传染性病毒的病人可能不被鉴别出载有疾病因子(静止的载体)，因此可能与其他易感染的个体(病人、探访者、和医护人员)共享这部分的空气。
在大气压力下采集准确体积的空气能够测定得到定量的信息。通过在给定位置处重复的对空气采样，多个当时情形的快照可以重现当时污染的特征(就象拍摄电影)。在医院病房的不同区域采样，可以提供关于模拟的空气中传染疾病剂的空间分布的信息，可能导致修改通风放施、共用空间的分隔、人员的转移、排气扇的使用、病床间位置距离、医疗设备的使用、例如供氧器，喷雾器、或抽气机和其它情形的缺陷。
通过本发明全面的检测和鉴定病房模型后，才可以设计新的医院和昂贵的改建现有医院病房。
3.鉴定微生物实验室或生物学安全工作橱的安全性微生物实验室或生物学安全工作橱是传染性疾病病房或居室的小的版本。
传染性疾病因子被封闭于受限制的微生物实验室和生物学安全工作橱的内部，从排出的空气中过滤和截留，并进行定期的灭菌，所以没有什么可以逃逸到外部。
使用实施例2中描述的相近的技术，可以定期的检测和鉴定这些设施，以确保实验室工作人员和公众的安全。
4.模拟香港AMOY花园的SRAS的爆发2003年3月，香港AMOY花园爆发了SRAS。香港大学的调查人员迅速定位出可能的引发灾祸的排水系统，它起到了巨大气溶胶扩散源的作用，结果是传染性气溶胶通过空气传播到其它的建筑区中。
虽然这些假设通过电脑模拟似乎是有道理的，但这些假设的证据却不可能获得因为缺少高灵敏和特殊的技术，这些技术可以同时进行多个试验，它们对环境和居民是安全的。
由其它示踪剂进行的扩散分析被限制在段距离内，在较远距离处因为示踪剂的稀释而检测不到示踪剂。
这些示踪剂还有许多的限制并且只能进行连续试验。例如，当排水系统表明有缺陷时，已提出了其它假设情况来解释气溶胶，即强力的冲刷盥洗室，由热淋浴产生的气溶胶和排放受感染的粪便时产生的气溶胶。为了模拟所有这些活动，迫切希望可以同时实现多个试验的技术出现。
烟雾或其它示踪剂在小剂量使用时相对安全，而用来覆盖例如在AMOY花园爆发的SARS的远距离的扩散所需的大剂量的示踪剂将引起关注。如果使用热的烟雾，它有逐渐上升的趋势，在模拟时很难真实的反映周围的情况。
气体具有充满容器内所有空间的特点。在一个封闭的环境如病房中使用气态示踪剂，因而具有的缺点是，其不能模仿单独的病毒颗粒或含有病毒颗粒的气溶胶飞沫的行为。与气体的行为不同，喷射到空气中的单独的病毒颗粒和气溶胶飞沫由对流或其它的流动体携带，并且受重力的影响下落，如果空气没有被干扰的话。
本发明提供了寡核苷酸和天然核酸，它们没有上述提到的其它示踪剂的不利情况，因为当它们悬浮在空气中时，它们象病毒颗粒或气溶胶飞沫一样被动的运动但对周围环境和生物是完全安全的。另外，由于我们的示踪剂可以用PCR扩增，检测的灵敏度显著的高于其它的示踪剂。该寡核苷酸或天然的核酸示踪剂同样也是稳定的，因此可以覆盖广阔的区域。此外，多种寡核苷酸或天然的核酸示踪剂可以同时使用来模拟各种假设的情况，不仅给出快速的结果而且费用减少很多，给居民带来最低限度的不便。
这种模拟疾病爆发的策略不限制于空气中生存的病毒。它可以用于模拟由口-粪途径或由污染物(接触)传播的疾病。
本发明也可以用于研究被工业污染的地表水系统和地下水系统的污染情况。抱怨来自上风向城市的空气污染的城市也许会发现本发明的方法对这种情况也是有用的。
以上，以优选实施方案的形式已经说明、描述和指出了本发明的主要的新特征，应理解，本领域内的普通技术人员在不偏离本发明实质的条件下，对所描述的装置的各种形式和细节以及操作可做出各种删除、替代和改变。例如，把这些要素和/或方法的步骤进行组合是显而易见的，它基本用同样的方法实现大体上相同的功能而达到同样的结果，包括在本发明的范围之内。而且，应认识到，针对本发明实施方案任何公开形式所表示和/或说明的结构和/或要素和/或方法步骤，根据总体设计选择可结合到任何其它公开的或描述的或建议的形式或实施方案中。为此目的，至此仅限制在附加的权利要求范围之内。
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<223>人工序列描述合成寡核苷酸<400>1catgaattcc gctgcatacc aatgtgtaag ctagatcagt caggactgat cgaattccag 60<210>2<211>20<212>DNA<213>人工序列<220>
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权利要求
1.一种检测设施是否能有效防止传染性疾病传播的方法，包括a)在所述设施中或附近释放有效量的生物学示踪剂，以模拟引起传染性疾病的病原体的传播；和b)检测生物学示踪剂的存在或数量来确定生物学示踪剂在设施的环境中的传播。
2.权利要求1的方法，其中所述的设施是用来防止传染性疾病从外部传播到设施内的，生物学示踪剂释放在设施的外部，在设施内部检测生物学示踪剂的存在或数量。
3.权利要求1的方法，其中所述的设施是用来防止传染性疾病从设施的内部传播到设施的外部，生物学示踪剂释放在设施的内部，在设施外部检测生物学示踪剂的存在或数量。
4.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂相对于存在于设施和它周围环境中的任何其它生物学分子是独特的。
5.权利要求1的方法，还包括在设施内或附近采集样本，通过分析样本确定生物学示踪剂的存在或数量。
6.权利要求5的方法，其中所述的样本是在设施内或附近的介质中采集，其中所述介质选自由气体、液体和固体物质组成的组。
7.权利要求6的方法，其中所述的气体物质是空气，从而来确定传染性疾病是否已传播到设施内的空气或设施附近的空气中。
8.权利要求6的方法，其中所述的液体是水，从而来确定传染性疾病是否已传播到设施内的水中或设施附近的水中。
9.权利要求6的方法，其中所述的固体物质采集自固态物体的表面，从而来确定生物学示踪剂是否已落在或粘附在固态物体的表面上。
10.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂是核酸。
11.权利要求10的方法，其中所述的核酸选自由单链DNA、单链RNA、双链DNA、双链RNA、DNA/RNA杂合体、嵌合的DNA分子、嵌合的RNA分子、质粒DNA、和从生物体中提取出来的DNA和RNA组成的组。
12.权利要求11的方法，其中所述的生物体选自由大肠杆菌、酵母和其它的生物体组成的组。
13.权利要求10的方法，其中所述的核酸由如下方法鉴定，包括选自核酸杂交、聚合酶链式反应、限制性片段长度多态性和序列信息组成的组中的步骤。
14.权利要求10的方法，其中所述的每一种核酸包含任一数目的核苷酸。
15.权利要求10的方法，其中所述的每一种核酸包含100-5,000个核苷酸。
16.权利要求10的方法，其中所述的每一种核酸包含40-100个核苷酸。
17.权利要求1的方法，其中所述的检测步骤包括生物学示踪剂的扩增。
18.权利要求17的方法，其中使用核酸扩增技术来扩增生物学示踪剂。
19.权利要求1的方法，其中所述的设施选自由通风系统和排水系统组成的组。
20.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂以选自气溶胶和溶液的形式提供。
21.权利要求20的方法，其中所述的生物学示踪剂溶液含有添加的物质，它能增加溶液的粘度，以便更接近地模拟释放病毒到环境中的体液。
22.权利要求21的方法，其中所述的能增加溶液粘度的物质选自由蛋白质、明胶和甘油组成的组。
23.权利要求20的方法，其中所述的传染性疾病是空气传播的疾病，所述溶液以一系列很均一的尺寸的飞沫形式在设施中释放，这些飞沫的直径等于或小于1微米。
24.权利要求20的方法，其中所述的传染性疾病是飞沫传播的疾病，所述溶液以一系列基本上均一的尺寸的飞沫形式在设施中释放，这些飞沫的直径为1-10微米。
25.权利要求20的方法，其中所述的溶液浓度范围从2×10-15到1毫摩尔/L，优选从2×10-15到2×10-5毫摩尔/L，更优选从2×10-15到2×10-9毫摩尔/L。
26.权利要求20的方法，其中所述的溶液浓度范围从103到5×1017个拷贝/mL，优选从103到1013个拷贝/mL，更优选从103到109个拷贝/mL。
27.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂没有被聚合物包被。
28.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂被聚合物包被。
29.权利要求28的方法，其中所述的聚合物选自由蛋白质分子、脂质分子、碳水化合物及其组合组成的组。
30.权利要求1的方法，其中所述的生物学示踪剂的序列编码选自由制造商、生产日期、序列识别码、生产批号及其组合组成的组的信息。
31.权利要求1的方法，其中在所述生物学示踪剂于设施内释放后在给定时间在不同部位所进行的示踪剂检测，提供了所述示踪剂传播的空间信息。
32.权利要求1的方法，其中在所述生物学示踪剂于设施内释放后在同一地点不同时间进行的所述的示踪剂检测，提供了所述示踪剂传播的时间信息。
33.权利要求1的方法，其中在所述的生物学示踪剂于设施内释放后在不同时间不同位置进行的所述的示踪剂检测，提供了所述示踪剂传播的时间和空间的信息。
34.一种产生气溶胶的装置，包含带有喷嘴的压缩气体腔，该喷嘴与一个能够装入预定体积溶液的可分离的刚性管道相连接。
35.权利要求34的装置，还包含打开喷嘴的触发器，从而通过管道释放出压缩的气体。
36.权利要求34的装置，其中所述的腔可以人工充入压缩空气，它的压力可以用压力计来监测。
37.权利要求34的装置，其中所述的刚性管道具有均一的内腔直径。
38.一种产生模似人打喷嚏或咳嗽的结果之气溶胶的方法，其包括将脉冲形式的压缩空气的通过装有雾溶剂化溶液的窄管道。
39.权利要求38的方法，其中气溶胶脉冲的重复产生模拟一阵咳嗽或打喷嚏。
40.一种对空气本体进行采样的装置，其通过临时的小孔吸入到真空容器中，或使用活塞人工地将预定体积的空气抽取到腔内。
41.权利要求40的装置，其中所述的真空容器或腔在带到待采集的空气本体之前是密封的。
42.权利要求40的装置，其中所述的真空容器或腔内含有不含DNase的电解质溶液。
43.权利要求40的装置，其中所述的容器或腔在空气样本进入容器或腔后是密封的。
全文摘要
本发明涉及一种检测设施是否能够有效的防止传染性疾病传播的方法，其通过a)在设施里或附近释放有效量的生物学示踪剂，以模拟引起传染性疾病之病原体的传播；和b)检测生物学示踪剂的存在或数量来确定生物学示踪剂在设施的环境中的传播。本发明还提供了一种产生模拟人的喷嚏和咳嗽之气溶胶的方法和装置，以便更切合实际的确定传染性疾病由这类病源的传播。
文档编号G01N1/22GK1707240SQ200410103868
公开日2005年12月14日 申请日期2004年8月6日 优先权日2003年8月11日
发明者唐舜荣, 梁纯 申请人:冠滔有限公司