专利名称：复方丹参喷雾剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，具体来说是涉及一种复方丹参喷雾剂及其制备方法。
背景技术：
胸痹心痛，祖国医学早有论述。《灵枢·五邪》篇曾经指出“写在心，则病心痛”。《灵枢·厥论》篇还说“真心痛，手足青至节，心痛甚，旦发夕死，夕发旦死”。临床有胸痛、胸闷，大部分有动则心慌，气短，舌暗紫或瘀斑，脉弦等表现，而胸部固定性疼痛，胸闷，舌暗紫或瘀斑在中医辨证属心脉瘀阻，气滞血瘀证候。中医理论认为，引起气滞血脉瘀阻病因各异心气虚弱，不能鼓动血脉运行；痰湿阻络，血行不畅；阴血亏虚，不能充盈血脉，致血流迟缓；阳虚寒凝，血脉拘急，血流不畅等均可导致血脉瘀阻，可见本病是本虚标实之证。现代医学认为，冠心病的病理基础在与心肌缺血、血养供应不足。治疗上依据“急则治标”的原则，以活血化淤、行气止痛法治疗，如复方丹参片。尽管复方丹参片也可以治疗冠心病，但是起效慢，为此，我们开发了起效快的复方丹参喷雾剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种复方丹参喷雾剂。
本发明的另外一个目的是提供一种复方丹参喷雾剂的制备方法。
本发明的又一个目的是提供复方丹参喷雾剂的鉴定方法和质量控制方法。
本发明所述的喷雾剂是由有效成分和药学上可接受的辅料组成，其中有效成分可以采用下列方法制得a)取丹参，用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，药渣加水煎煮，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏粉26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇回流提取，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
有效成分可以采用下列优选方法制得a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，备用；第二次用50％乙醇回流提取，滤过，滤液备用；药渣加水煎煮，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
有效成分可以采用下列最优选的方法制得
a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，备用第二次用50％乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液备用药渣加水煎煮2小时，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏1774g、三七1163g和冰片66g；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇5000ml分三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
本发明所述的喷雾剂的制备方法，将上述制备的有效成分加丙二醇、香味剂，加乙醇至全量，混匀，放置，滤过，制成。
本发明药物的功能为活血化淤，理气止痛。可用于治疗胸中憋闷和心绞痛。使用方法为口腔喷射，吸入，一次喷1～2下，一日3次，或遵医嘱。
通过实验比较，改革后的气雾剂的药效发挥较口服片剂快，有利于急症病情的缓解，试验结果表明，气雾剂可以延长异丙肾上腺素引起的心肌耗氧量增加的小鼠生存时间，而口服片剂则因口服吸收较慢而效果不如气雾剂。
它不仅充分发挥了复方丹参片的活血化淤，行气止痛作用，而且还起到了片剂对心绞痛所没有的速效作用，气雾剂型吸收迅速，易于携带，便于急救，临床未见不良反应。
本发明药物的鉴别方法为(1)取本品，作为供试品溶液。另取丹参酮IIA对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
(2)取[含量测定]三七向下剩余的供试品溶液，蒸至近干，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(12∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点。
(3)取冰片对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取对照品溶液和[鉴别](1)项下的供试品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚醇溶液，在105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点。
本发明药物的质量控制方法为丹参照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂∶甲醇-水(75∶25)为流动相检测波长为270nm。理论板数按丹参酮II A峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取丹参酮II A对照品约10mg，精密称定，至50ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，精密量取1ml，至10ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，即得(每1ml中含丹参酮II A约20μg)。
供试品溶液的制备 取本品，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液10μl、供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1ml含丹参以丹参酮II A(C19H25O3)计，不得少于0.20mg。
三七 对照溶液的制备 精密称取三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，即得。
标准曲线的制备分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，于具塞试管中，挥去溶剂，加入新配置的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，于60℃水浴上加热15分钟，流水冷却，加5ml冰醋酸，摇匀，以相应试剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在555nm波长出测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 取本品，精密量取1ml，置蒸发皿中，蒸至近干，用热水溶解，移至25ml量瓶中，冷却后加水至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液4ml，用石油醚(60~90℃)振摇提取2次，每次10ml，合并石油醚液，用少量水洗涤，水层与洗液合并，在水浴上浓缩至近1ml，将浓缩液加于D101型大孔吸附树脂柱(内径1cm，柱长10cm)上，用水10ml洗脱，弃去水液，继用70％乙醇25ml洗脱，将洗脱液置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液1ml，照标准曲线制备项下的方法，自“挥去溶剂”起依法操作，测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中三七皂苷R1的含量，计算，即得。
本品每1ml含三七总皂苷以三七皂苷(C47H80O18)计，不得少于4.5mg。
实施例1a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55～60℃)的清膏，备用第二次用50％乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液备用药渣加水煎煮2小时，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.40(55～60℃)，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏1774g、三七1163g和冰片66g；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇5000ml分三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，d)加丙二醇2600ml、香精50ml，加乙醇至全量，混匀，放置，滤过，制成。
实验例1实验材料实验动物，健康家兔体重2～3kg，雌雄均用。大白鼠150～250g，小白鼠18～22g，雌雄兼用随机分组。
实验药品，复方丹参片为广州粤华制药厂生产，实施例1制备的复方丹参气雾剂，气雾剂中含醇量为30％，同时还含有氟利昂抛射剂，对照组除不含药物外其余同给药组相同。垂体后叶素由上海中国天丰药厂生产，批号为890602，盐酸异丙肾上腺素亦为中国天丰药厂生产，批号8808011。
方法和结果一、复方丹参片剂与气雾剂对垂体后叶素所致急性大鼠心肌缺血预防作用的影响。
将32只大白鼠随机分为4组，第一组为氟里昂酒精对照组，第三组为复方丹参片组，第三、四组为复方丹参气雾剂0.44g/kg及0.22g/kg，连续喷雾给药5天，末次给药后5分钟，舌下静脉注入垂体后叶素0.75g/kg(1)，立即描记二导联心电图、记录给垂体后叶素立即，30’(第一期)1，、3’、5’……15’(第二期)心电图，测定T波及S-T段的变化，同它作为判断心肌缺血的标准，结果见表I
表1 复方丹参气雾剂对垂体后叶素引起大鼠心肌缺血的保护作用
与对照组比较·P＜0.05 ··P＜0.01由表1结果可以看出，复方丹参气雾剂组(0.44g/kg)预防给药后注射垂体后叶素引起的急性心肌缺血的各期T波及S-T段均有保护作用，与对照组比较均有显著差异(P＜0.05)，而复方丹参片组仅对第一期T波及第二期S-T段有保护作用，对第一期S-T段及第二期T波的缺血变化与对照组比较有明显的差异。
二、复方丹参片剂及气雾剂对垂体后叶素所致急性心肌缺血大鼠的治疗作用。
体重200g左右的大白鼠30只，随机分组为3组，1组为对照组，2组为复方丹参片2.7g/kg，3组为复方丹参气雾剂0.44g/kg组，每组动物预先测定正常心电(II导联)图后，舌静脉注射垂体后叶素0.75u/kg，立即测II导联心电图，然后喷雾复方丹参气雾剂及灌胃给复方丹参片混悬液后立即测定给药后30’、1’、2’、5’、10’、30’及1h后的各点心电图，与iv垂体后叶素的心电图进行t检验比较，评价两剂型的治疗效果，结果见表2表2 复方丹参气雾剂对垂体后叶素引起大鼠心肌缺血治疗作用
与对照组比较·P＜0.05由表2可知，在形成急性心肌缺血的动物模型后立即喷雾给药，可是抬高的S-T段得以恢复，对心肌缺血有一定的改善。
三、喷雾给药对垂体后叶素所致家兔急性心肌缺血的治疗作用将18只家兔，随机分成3组，雌雄兼用，背位固定，描记的II导联心电图后，耳静脉静点2.5u/kg的垂体后叶素(加生理盐水稀释、十分钟点完)后，立即描记II导联心电图，然后第一组喷氟利昂酒精7次/kg，第二组喷复方丹参气雾剂0.14g/kg，第三组灌胃0.9g/kg复方丹参片，给药后立即纪录15’、30’、1’、2’、5’、10’、20’、30’及1h的心电图，则定T波的变化，用它作为判断心肌缺血的标准，以给药前T波作为基数(100％)，计算iv垂体后叶素后诱发心肌缺血给药治疗后T波升高的百分数，作为判断药物治疗作用的效果指标，进行组间比较，用t检验判断其差异的显著性，结果见表3表3复方丹参气雾剂对垂体后叶素所致家兔急性心肌缺血的治疗作用
与对照组比较·P＜0.05由表3可见，给喷雾剂组与对照T波升高百分率比较有非常显著差异(P＜0.01)，较口服片剂组效果明显。说明在急性心肌缺血的情况下立即应用气雾剂可以起到缓解病痛的效果。而口服片剂因吸收慢，发挥药效亦慢，故不能立即起效。
实验例2一、临床资料(一)病例选择根据《新药(中药)治疗胸痹的临床研究指导原则》的标准，选择符合冠心病、心绞痛诊断标准，中医辨证具备气滞、血瘀征候表现，且心绞痛发作每周至少两次以上、心绞痛发作持续三分钟以上的患者。观察对象年龄男性40岁以上，女性45岁以上，凡合并高血压，血压超过180/110mmHg(24/14.75KPa)，心肺功能不全，重度心律失常及其他心脏疾病，重度神经官能症，更年期症候群，不宜列为观察对象。
(二)一般情况本组152例，住院92例，门诊60例，随机分为复方丹参气雾剂组(简称气雾剂组)和复方丹参片组(简称片剂组)。气雾剂组102例，其中男62例，女40例；年龄40～50-岁19例，50～60-岁15例，60～70-岁59例，79岁以上9例，中位年龄62.46岁；病程1年以内9例，1～5-年42例，5～10-年42例，10年以上9例，平均病程4.81±3.07年；心绞痛发作程度轻度21例，中度45例，重度36例；西医诊断分型稳定型69例，不稳定型33例。片剂组50例，其中男29例，21例；年龄40～50-岁10岁，50～60-岁15例，60～70-岁20例，70岁以上5例，中位年龄59.25岁；病程1年以内2例，1～5-年22例，5～10-年21例，10年以上5例，平均病程4.74±2.92年；心绞痛发作程度轻度12例，中度23例，重度15例；西医诊断分型稳定型36例，不稳定性14例。
二、诊断和疗效标准(一)中医诊断与辩证分型根据1980年全年冠心病辨证论治研究座谈会制订，1985年修订的《冠心病心绞痛中医辨证试行标准》明确辩证与分型(2)。
(1)气滞证胸闷痛、胀痛、憋气、苔薄白、脉弦；(2)血瘀证胸痛、痛有定处、舌质暗或瘀斑、脉弦细、涩促、结代。
(二)西医诊断根据1980年全国内科学术会议心血管病专业组制定的《关于冠心病命名及诊断标准的建议》标准(3)。
(1)劳累性心绞痛其特征是由于运动或其他增加心肌需氧量的情况所诱发的短暂胸痛发作，休息或舌下含服硝酸甘油后，疼痛常可迅速消失。劳累性心绞痛可分为三类①初步劳累性心绞痛；②稳定型劳累性心绞痛；③恶化型劳累性心绞痛。(2)自发性心绞痛其特征是胸痛发作与心肌需氧量的增加无明显关系。与劳累性心绞痛相比，这种疼痛一般持续较长，程度较重，且不易为硝酸甘油缓解。为见酶变化。心电图常出现某些暂时性的S-T段压低或T波改变。自发性心绞痛可单独发作或与劳累性心绞痛合并存在。某些自发性心绞痛患者在发作时出现暂时性的S-T段抬高，常称为变异性心绞痛。
初发劳累性心绞痛、恶化性心绞痛及自发性心绞痛常统称为“不稳定型心绞痛”。
(三)疗效标准1.心绞痛、心电图近期疗效根据1979年中西医结合治疗冠心病心绞痛及心律失常座谈会制订的《冠心病心绞痛、心电图疗效评定标准》评定疗效(4)。(1)心绞痛疗效①显效轻、中度心绞痛症状消失或基本消失；较重度心绞痛症状基本消失或减轻到“中度”的标准。②有效轻度心绞痛发作次数、程度及持续时间有明显减轻；中度心绞痛症状减轻到“轻度标准”；较重度心绞痛症状减轻到“中度”标准；重度心绞痛症状减轻到“较重度”的标准以下。③无效症状与治疗前相同或有所加重。(2)心电图疗效①显效心电图恢复至“大致正常”或达“正常心电图”。②有效ST段的降低，在治疗后回升0.05毫伏以上上，但未达正常水平，在主要导联倒置T波改变变浅(达25％以上者)；或T波由平坦变为直立，房室或室内传导阻滞改善者。③无效心电图基本与前相同或ST段较治疗前降低0.05毫伏以上，在主要导联倒置T波加深(达25％以上)，或直立T波变平坦，平坦T波变倒置，以及出现异位心率，房室传导阻滞或室内传导阻滞。2.心绞痛速效标准①显效＜3分钟止痛；②有效3+~5分钟止痛；③无效5分钟以上止痛或加服其他药物止痛。在评定药物对心电图速效作用时，以用药半小时后心电图变化为标准。
三、研究方法(一)观察方法所有病理在接受药物治疗前，停服药物一周，检查心电图、血尿常规、肝功能、记录症状、体征，疗程结束对上述各项进行复查，服上药期间、停服中西医扩血管药。
(二)药物及疗程1.气雾剂组复方丹参气雾剂，由吉林省中医中药研究院制剂室提供，批号911206。每次喷吸3~5下，每日3次，七天为一疗程，观察其近期疗效；在心绞痛发作时喷吸3~5下，观察其速效作用。2.片剂组复方丹参片，由深圳同安制药厂出品，批号910502，每次口服3片，每日3次，观察方法同上。
(三)统计学方法；采用X2检验，秩和检验和t检验的方法进行分析。
四、结果通过本发明气雾剂型和片剂对胸痹心痛152例患者临床对照研究表明1.气雾剂对心绞痛、心电图的近期疗效显著①对心绞痛临床总有效率98.04％；②对心电图变化的总有效率为62.96％，优于片剂组(P＜0.05)③能显著的改善胸痛，胸闷，心悸，气短，舌紫暗或瘀斑，苔白腻或黄腻，脉弦涩、结代、取得了与片剂一致的治疗作用；④能明显控制心绞痛每周发作次数(P＜0.001)。
2.气雾剂型的心绞痛、心电图的速效作用显著①对心绞痛102例次显效48例次，有效48例次，无效6例次，总有效率为94.12％，而片剂组50例次，仅有效4例次，说明气雾剂组明显优于片剂组(P＜0.001)；与文献(5)美国硝酸甘油比较，差异显著(P＜0.01)，优于文献组，但还需进一步的对比研究。②对心电图变化显效2例，有效31例，无效48例，总有效率为40.74％，明显优于片剂组(P＜0.001)；与文献美国硝酸甘油片比较，差异不显著(P＞0.05)。③气雾剂的止痛效果与心绞痛程度关系密切，有显著差异(P＜0.01)，轻中度疗效高，重度稍差。④气雾剂的止痛效果与心绞痛西医分型关系不密切，无显著差异(P＞0.05)。⑤气雾剂对心绞痛的平均起效时间为3.461±1.352(分)，而片剂则基本无速效作用。
3.气雾剂对心率、血压、血尿常规、肝功能均无不良影响，临床上也未见不良反应。
权利要求
1.复方丹参喷雾剂，它是由有效成分和药学上可接受的辅料组成，其中有效成分采用下列方法制得a)取丹参，用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，药渣加水煎煮，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏粉26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇回流提取，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
2.根据权利要求1所述的复方丹参喷雾剂，其中有效成分采用下列方法制得a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，备用；第二次用50％乙醇回流提取，滤过，滤液备用；药渣加水煎煮，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
3.根据权利要求1所述的复方丹参喷雾剂，其中有效成分采用下列方法制得a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃相对密度为1.30的清膏，备用第二次用50％乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液备用药渣加水煎煮2小时，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏1774g、三七1163g和冰片66g；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇5000ml分三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，制成有效成分。
4.权利要求1所述的复方丹参喷雾剂的制备方法，它包括下列步骤a)取丹参，用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，药渣加水煎煮，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏粉26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇回流提取，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，d)加丙二醇和香味剂，加乙醇至全量，混匀，放置，滤过，制成。
5.权利要求2所述的复方丹参喷雾剂的制备方法，它包括下列步骤a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.30的清膏，备用；第二次用50％乙醇回流提取，滤过，滤液备用；药渣加水煎煮，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃测相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏26-28重量份、三七17-19重量份和冰片1-2重量份；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解；d)加丙二醇和香味剂，加乙醇至全量，混匀，放置，滤过，制成。
6.权利要求3所述的复方丹参喷雾剂的制备方法，它包括下列步骤a)取丹参，提取三次，第一次用乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至55～60℃相对密度为1.30的清膏，备用第二次用50％乙醇回流提取1.5小时，滤过，滤液备用药渣加水煎煮2小时，滤过，滤液与上述备用滤液合并，回收乙醇，浓缩至55～60℃相对密度为1.40，与上述备用清膏合并，减压干燥，粉碎成细粉，备用；b)称取丹参干浸膏1774g、三七1163g和冰片66g；c)将丹参干浸膏细粉与三七细粉合并，用乙醇5000ml分三次回流提取，每次1.5小时，放冷后滤过，合并滤液，加入冰片使溶解，d)加丙二醇2600ml、香精50ml，加乙醇至全量，混匀，放置，滤过，制成。
7.权利要求3所述的复方丹参喷雾剂的鉴别方法，它包括下列步骤(1)取本品，作为供试品溶液。另取丹参酮IIA对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19∶1甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；(2)取三七向下剩余的供试品溶液，蒸至近干，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以12∶7∶2氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点；(3)取冰片对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2000年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取对照品溶液和(1)项下的供试品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚醇溶液，在105加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点。
8.权利要求3所述的复方丹参喷雾剂的质量控制方法，它包括下列步骤a)对照品溶液的制备 取丹参酮II A对照品约10mg，精密称定，至50ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，精密量取1ml，至10ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，即得每1ml中含丹参酮II A约20μg；b)供试品溶液的制备 取本品，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀，即得；c)测定法 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂75∶25甲醇-水为流动相检测波长为270nm。理论板数按丹参酮II A峰计算应不低于2000。分别精密吸取对照品溶液10μl、供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1ml含丹参以丹参酮II A(C19H25O3)计，不得少于0.20mg；d)对照溶液的制备 精密称取三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，即得；e)标准曲线的制备 分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，于具塞试管中，挥去溶剂，加入新配置的5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，于60℃水浴上加热15分钟，流水冷却，加5ml冰醋酸，摇匀，以相应试剂为空白，照中国药典2000年版一部附录VB分光光度法，在555nm波长出测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；f)测定法 取本品，精密量取1ml，置蒸发皿中，蒸至近干，用热水溶解，移至25ml量瓶中，冷却后加水至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液4ml，用60~90℃石油醚振摇提取2次，每次10ml，合并石油醚液，用少量水洗涤，水层与洗液合并，在水浴上浓缩至近1ml，将浓缩液加于D101型大孔吸附树脂柱上，用水10ml洗脱，弃去水液，继用70％乙醇25ml洗脱，将洗脱液置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液1ml，照标准曲线制备项下的方法，自“挥去溶剂”起依法操作，测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中三七皂苷R1的含量，计算，即得；本品每1ml含三七总皂苷以三七皂苷(C47H80O18)计，不得少于4.5mg。
全文摘要
本发明公开了一种复方丹参喷雾剂，它是由丹参干浸膏、三七和冰片中药原料制成的。它具有活血化淤，行气止痛作用，而且还起到了片剂对心绞痛所没有的速效作用，气雾剂型吸收迅速，易于携带，便于急救，临床未见不良反应。可用于治疗心绞痛。本发明还公开了复方丹参喷雾剂的制备方法。本发明也公开了复方丹参喷雾剂的鉴定方法和含量测定方法。
文档编号G01N33/15GK1813885SQ20051010493
公开日2006年8月9日 申请日期2005年9月22日 优先权日2005年9月22日
发明者华玉强 申请人:华玉强