专利名称：快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法
技术领域：
本发明涉及卷烟主流烟气中7种挥发酚的快速检测方法。
背景技术：
挥发酚是卷烟主流烟气中的一类重要有害成分，被列入加拿大政府46种有害成分名单和WHO “烟草制品管制研究小组”建议的管制成分清单，因而准确测定卷烟烟气中的挥发酚对于卷烟危害性评价有重要意义。很多种分析技术，通常包括复杂的液-液萃取、柱层析和衍生化，都曾经应用于卷烟烟气中酚类的分析，但由于卷烟烟气是非常复杂的混合物，而且酚类的含量很低，因此酚类化合物的准确定量一直都是很困难的工作。在早期的定性研究中，气相色谱是卷烟烟气中酚类物质分析中应用较多的技术，但是由于酚类成分容易被氧化，并且具有较强的活性， 应此对其定量必须采用衍生化处理，操作较为繁琐。近年来高效液相色谱法[HPLC]在酚类成分的分析中得到了广泛的应用，该方法不需要衍生化，可以直接进行样品测定，简化了分析步骤，提高了定量的可靠性。由于酚类成分可以产生荧光，采用荧光检测可以大大提高分析的灵敏度。因此，高效液相色谱-荧光检测法已经成为测定卷烟烟气中酚类成分最为可靠的方法，加拿大政府目前已经将其作为政府的标准检测方法。但是，高效液相色谱法测定卷烟烟气中的挥发酚存在两个问题(1)测试时间超过20min，不利于批量样品分析；(2)由于异构体间-甲酚和对-甲酚的结构以及物理化学性质极为相近，目前的高效色谱技术难以将其分离，只能获得间甲酚和对甲酚混合物的测定结果。为解决以上问题，研究人员已尝试了多种方法，陈章玉等建立的快速分离测定挥发酚的方法，但其样品前处理繁琐耗时，多步转移操作易引起检测物损失，且流动相采用 2mL/min的高流速，导致柱压过高，对泵和分析柱使用寿命不利。刘芳等人建立了快速分离柱-高效液相色谱法测定卷烟主流烟气中的苯酚、甲酚和苯二酚，分析时间仅需6min ；但该法不能分离间-甲酚和对-甲酚。近期，张婕等人[CN 101592638]在流动相中加入β -⑶ 作为改性剂，实现了间-甲酚和对-甲酚异构体分离，但该法分析时间需35min，不利于批量样品分析。
发明内容
针对上述技术方案中存在的缺陷，本发明提供一种快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，其提高了分析效率。为实现上述目的，本发明技术方案为快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，包括了主流烟气的捕集、烟气样品的制备和超高效液相色谱检测，所述的超高效液相色谱检测采用超高效液相色谱柱，该超高效液相色谱柱流动相含有β "CD水溶液、乙腈和醋酸。超高效液相色谱柱包括两样流动相，流动相A为冰醋酸0_^水溶液=1 99， 流动相B为冰醋酸乙腈0_^水溶液=1 30 69 ；梯度洗脱流动相设置为开始时含流动相AlOO % (体积)，2. 2min含流动相AlOO % (体积)，4min含流动相A40 % (体积)， 8min含流动相A10% (体积)，9min含流动相AlOO % (体积)；其柱流速为0. 3mL/min ；柱温为30°C ；进样量为10 μ L。上述技术方案的有益之处在于与现有技术相比较，本发明提供的快速分离测定卷烟主流烟气中7种挥发酚的方法，是采用以β-CD为流动相添加剂的UPLC法，9min内可分离测定卷烟主流烟气中7种简单酚的含量，且可以将难以分离的间-甲酚和对-甲酚异构体分离；操作简便，测试结果准确，分析时间短，适合批量试样的快速检测。
图1是β -CD浓度对混合标样中7种酚成分的液相色谱分离影响比较示意图；图2是本发明方法(UPLC)与Y/C Τ255-2008标准方法(HPLC)混合酚标准样品和卷烟样品烟气中7种酚的谱图比较示意图。
具体实施例方式发明人为了探索快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，进行了大量的实验，具体如下1、材料和仪器醋酸(色谱纯)、邻-甲酚(纯度> 99. 5 % )、间-甲酚和对-甲酚(纯度> 99. 0 % ) (Fluka公司)；邻-苯二酚、苯酚(AR，购自于日本东京化工工业株式会社)；间-甲酚和对-苯二酚(AR，成都市科龙化工试剂厂)；乙腈(色谱纯，百灵威化学试剂公司)；环糊精(BR，上海国药)；去离子水(18. 2 Ω m，使用前经0.45 μ m滤膜过滤)；烤烟型卷烟样品 (烟支64mm+滤嘴20mm，由福建中烟提供)。Acqu ity超高效液相色谱仪(Waters)，配备荧光检测器；Acquity Uplc : BEH C18 柱(Watrs，50mmX2. lmm，l. 7μπι) ；Luna HPLC C18 色谱柱(菲罗门，100mmX3. 9mm， 5ym) ；SM400直线型吸烟机(英国Filtrona公司)；AG104电子天平(感量0. OOOlg，瑞士 Mettler2Toledo仪器公司)；T660/H型超声波振荡器(德国ELMA公司)；Human型超纯水系统(Pgeneral公司)。2、前处理2.1烟气的捕集将卷烟样品在22°C 士 1°C和相对湿度60% 士2%条件下平衡48h，用SM400吸烟机按照YC/T 29-1996规定的标准条件抽吸卷烟，每个孔道抽吸4支烟，用剑桥滤片捕集卷烟主流烟气。吸毕，取出滤片。2. 2烟气样品的制备参照Y/C T255-2008标准方法，采用超声萃取提取滤片中的挥发酚。将1张捕集烟气粒相物的剑桥滤片折叠放入200mL锥形瓶中，加入50mL 1% (质量分数)醋酸水溶液， 室温下超声萃取20min，静置5min。取2mL萃取液，用0. 45 μ m微孔滤膜过滤，滤液取样进行UPLC分析(处理好的样品液必须在3d内分析)。2. 3超高效液相色谱检测
为验证本发明方法(UPLC)的准确性，比较了 UPLC方法与Y/C T255-2008标准方法(HPLC)对卷烟样品主流烟气中7中挥发酚的定量结果。以下是两种方法的设置的色谱分析条件。表IUPLC色谱条件
权利要求
1.快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，包括了主流烟气的捕集、烟气样品的制备和超高效液相色谱检测，其特征在于所述的超高效液相色谱检测采用超高效液相色谱柱，该超高效液相色谱柱流动相含有β "CD水溶液、乙腈和醋酸。
2.如权利要求1所述的快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，其特征在于所述的β -CD水溶液在超高效液相色谱流动相中的浓度为6Χ 10_3mOl/L。
3.如权利要求1或2所述的快速分离测定卷烟主流烟气中的7种挥发酚的方法，其特征在于超高效液相色谱柱包括两样流动相，流动相A为冰醋酸0_^水溶液=1 99， 流动相B为冰醋酸乙腈0_^水溶液=1 30 69 ；梯度洗脱流动相设置为开始时含流动相AlOO % (体积)，2. 2min含流动相AlOO % (体积)，4min含流动相A40 % (体积)， 8min含流动相AlO % (体积)，9min含流动相AlOO % (体积)；其柱流速为0. 3mL/min ；柱温为30°C ；进样量为10 μ L。
全文摘要
本发明公开一种快速分离测定卷烟主流烟气中7种挥发酚的方法，采用超高效液相色谱柱，并含有β-CD水溶液、乙腈和醋酸为流动相，在9min内快速分离测定卷烟主流烟气中7种挥发酚，大幅度地提高了工作效率，节约分析检测成本，具有广泛的应用和推广价值。
文档编号G01N30/02GK102313782SQ20101022191
公开日2012年1月11日 申请日期2010年7月9日 优先权日2010年7月9日
发明者吴清辉, 张建平, 白雪平, 苏明亮, 赵艺强, 连芬燕, 黄朝章 申请人:福建中烟工业公司