专利名称：一种用于诊断q热病的蛋白组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于诊断Q热病的蛋白组合物。
背景技术：
贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)为专性吞噬细胞内寄生的革兰阴性小杆菌。 该菌对外界环境抵抗力很强，对人和动物有极强的感染力，可通过气溶胶扩散经呼吸道进入体内导致人及动物发生感染并导致Q热。Q热是一种呈世界性分布的人兽共患病，在我国分布广泛。人类Q热分为急性和慢性两种类型，急性Q热以发热、头痛、肌肉酸痛为主要症状，并常伴有肺炎发生，部分患者还可发生肝炎、心肌炎甚至脑膜炎。如果急性Q热未得到及时或彻底治疗可转变为慢性，引起慢性肝炎、心内膜炎、骨髓炎等。目前，Q热最常用的特异性诊断方法为血清学诊断，包括间接免疫荧光(IFA)技术，酶联免疫吸附(ELISA)技术等.这些检测方法特异性较高，是目前临床用得最多的检测方法。但这些检测方法对样本需求量大、步骤较为繁琐费时、并且都需要纯化的贝氏柯克斯体全菌作为抗原，而提取纯化贝氏柯克斯体的防护要求高，工艺复杂，成本昂贵，因此这些方法都难以被广泛推广和使用。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种用于诊断Q热病的蛋白组合物。本发明所提供的用于诊断Q热病的蛋白组合物，由如下(1)-(7)中所述蛋白组成(1)为如下Ι-a或Ι-b所示l_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 1所示的蛋白质；Ι-b、将SEQ ID NO 1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由Ι-a衍生的蛋白质；(2)为如下2-a或2-b所示2-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示的蛋白质；2-b、将SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由2-a衍生的蛋白质；(3)为如下3-a或3_b所示3-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 3所示的蛋白质；3-b、将SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3-a衍生的蛋白质；(4)为如下4-a或4_b所示4-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 4所示的蛋白质；4-b JfSEQ ID NO :4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由4-a衍生的蛋白质；(5)为如下5-a或5_b所示5-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 5所示的蛋白质；5-b、将SEQ ID NO :5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由5-a衍生的蛋白质；(6)为如下6-a或6_b所示6-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 6所示的蛋白质；6-b、将SEQ ID NO :6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由6-a衍生的蛋白质；(7)为如下7-a或7_b所示7-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 7所示的蛋白质；7-b、将SEQ ID NO :7所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由7-a衍生的蛋白质。上述蛋白组合物中，所述Q热病是由病原菌贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii) 感染动物引起的。上述蛋白组合物中，所述动物为人或家畜或鼠；所述家畜为牛、羊或马。本发明的另一个目的是提供一种用于诊断Q热病的蛋白芯片。本发明所提供的用于诊断Q热病的蛋白芯片，由基底、检测点、阳性质控点和阴性质控点组成，检测点、阳性质控点和阴性质控点均点制在所述基底上；所述检测点分为七种，每种检测点由如下(1)-(7)所示蛋白中的一种点制而成；(1)为如下Ι-a或Ι-b所示Ι-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 1所示的蛋白质；Ι-b、将SEQ ID NO 1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由Ι-a衍生的蛋白质；(2)为如下2-a或2_b所示2-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示的蛋白质；2-b、将SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由2-a衍生的蛋白质；(3)为如下3-a或3_b所示3-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 3所示的蛋白质；3-b、将SEQ ID NO :3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3-a衍生的蛋白质；(4)为如下4-a或4_b所示4-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 4所示的蛋白质；4-b JfSEQ ID NO :4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由4-a衍生的蛋白质；(5)为如下5-a或5_b所示5-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 5所示的蛋白质；5-b、将SEQ ID NO :5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由5_a衍生的蛋白质；(6)为如下6-a或6_b所示6-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 6所示的蛋白质；6-b、将SEQ ID NO :6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由6-a衍生的蛋白质；(7)为如下7-a或7_b所示7-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 7所示的蛋白质；7-b、将SEQ ID NO :7所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由7-a衍生的蛋白质。上述蛋白芯片中，所述基底可为任何制备蛋白芯片时所用的基底，具体可如醛基化玻片。上述蛋白芯片中，所述阴性质控对照可为任何本领域中常用的阴性质控对照，具体可如水、PBS缓冲液，还具体可为蛋白洗脱缓冲液或转入空载体pET-32a(+)的BL21(DE3) 的细胞裂解液。其中，转入空载体pET_32a(+)的BL21 (DE3)的细胞裂解液按照如下方法制备将转入pET-32a(+)的BL21(DE!3)接入安苄抗性(Amp+) LB液体培养基中，37°C震摇过夜，次日按1 100接种新鲜安苄抗性(Amp+)LB液体培养基，37°C震摇至OD6tltl = 0. 4，加入诱导剂IPTG，浓度为0. 4mM,于37°C继续震摇4小时，得到发酵液。取诱导表达的发酵液100ml， 8000rpm/min离心5min，集菌，弃上清。用30ml裂解缓冲液重悬菌体，以25%振幅超声破碎 (超3s，停9s) 1小时，得到转入pET-32a(+)的BL21 (DE3)的细胞裂解液。其中，每1升裂解缓冲液按照如下方法制备将50mmo 1 NaH2PO4 · H2O、300mmo 1 NaClUOmmol咪唑和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到裂解缓冲液。其中，每1 升洗脱缓冲液组成将 50mmol NaH2PO4 'H2O^OOmmol NaCl、250mmol 咪唑、0. 3L甘油和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到洗脱缓冲液。上述任一所述蛋白芯片中，所述阳性质控点由人源IgG或除人外的其它动物来源的IgG点制而成。上述任一所述蛋白芯片中，每个所述检测点中蛋白的量为4. 5μ g ；每个所述阳性质控点中IgG的量为4.上述任一所述蛋白芯片中，所述除人外的其它动物来源的IgG为家畜来源的IgG 或鼠来源的IgG ；所述家畜来源的IgG为牛来源的IgG、羊来源的IgG或马来源的IgG。上述任一所述蛋白芯片中，所述Q热病是由病原菌贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)感染动物引起的。上述任一所述蛋白芯片中，所述感染动物为感染人或感染家畜或感染鼠；所述家畜为牛、羊或马。本发明的最后一个目的是提供一种用于血清学诊断Q热的试剂盒。本发明所提供的用于血清学诊断Q热的试剂盒，为如下I或II所示I、由上述任一所述蛋白组合物、封闭液、漂洗液和荧光素标记的二抗组成；II、由上述任一所述蛋白芯片、封闭液、漂洗液和荧光素标记的二抗组成；所述封闭液按照如下方法制备得到将BSA溶于pH值为7. 4的PBS缓冲液中，BSA与PH值为7. 4的PBS缓冲液的配比为Ig 100ml，得到的溶液即为所述封闭液；所述荧光素标记的二抗为Cy5标记的羊抗人IgG或Cy5标记的羊抗除人以外其它动物来源的IgG ；所述漂洗液为PBST缓冲液；每1升所述pH值为7. 4的PBS缓冲液按照如下方法制备将8gNaCl、0. 2g KCl、 3. 53gNa2HP04. 12H20、0. 24g KH2PO4和水混合，用水定容至1升，得到的溶液的pH值为7. 4， 即得到所述PBS缓冲液；所述PBST缓冲液按照如下方法制备将所述pH值为7.4的PBS缓冲液与 Tween-20混合，pH值为7. 4的PBS缓冲液与Tween-20的配比为IL 1ml，得到所述PBST 缓冲液。上述任一所述蛋白组合物在制备Q热病诊断芯片中的应用也属于本发明的保护范围。上述任一所述蛋白组合物在制备Q热病诊断试剂盒中的应用也属于本发明的保护范围。本发明的蛋白组合物及蛋白芯片可对Q热病人或动物的血清进行快速、准确的血清学分析诊断，结果准确可靠，操作简便，样本用量少，省时省力，可以代替传统的繁琐、累人、耗时的血清学诊断方法做Q热血清学诊断。本发明属于艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项中内容，项目名称传染病病原体诊断和组合检测技术研究；课题编号2008ZX10004-002。本发明对国家利益或公共利益具有重大意义，迫切需要采取专利方式予以保护。
图1为重组蛋白的电泳结果。图2为蛋白芯片与感染小鼠血清反应。图3为蛋白芯片与病人血清反应。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。贝氏柯克斯体新桥株(Coxiella burnetii)Xinqiao strain 在文献"Wen，B.， S. Yu, G. Yu, Q.Li, and X. Zhang. 1991. Analysis of proteins and lipopolysaccharides fromChinese isolates of Coxiella burnetii with monoclonal antibodies. Acta Virol35 :538-544. ”中公开过，公众可从中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所获得。实施例1、7种抗原蛋白的制备载体pET_32a(+)购自Novagen公司，产品目录号为69015。pQE30购自qiagen公司，产品目录号为33203。大肠杆菌BL21购自Novagen公司，产品目录号为69450。大肠杆菌M15购自 Novagen公司，产品目录号为；34210。
一、7种抗原蛋白的蛋白序列及编码基因序列7种抗原蛋白的蛋白序列及编码基因序列如表1所示。表1、蛋白及基因序列
蛋白名称蛋白序列编码基因序列QmpHSEQ ID NO 1SEQ ID NO 8ComlSEQ ID NO 2SEQ ID NO 9YbgFSEQ ID NO 3SEQ ID NO 10MipSEQ ID NO 4SEQ ID NO 11DnaKSEQ ID NO 5SEQ ID NO 12GroELSEQ ID NO 6SEQ ID NO 13RplLSEQ ID NO 7SEQ ID NO 14二、蛋白OmpH的制备OmpH基因扩增以贝氏柯克斯体新桥株(Coxiella burnetii)的基因组DNA为模板，用引物对进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；用限制性内切酶BamHI和MlI酶切PCR扩增产物，回收目的基因片段；用限制性内切酶BamHI和MlI酶切出发载体pET_32a(+)，回收载体大片段；将目的基因片段和载体大片段连接，得到重组载体；PCR扩增的通用条件 94°C预变性 5min，95°C 30sec、55°C 30sec、72°C 1. 5min，循环；35 次，72°C延伸 7min。重组菌的制备将重组载体转入出发菌大肠杆菌BL21中，得到重组菌。验证将重组菌接入含有安苄抗性(Amp+)的固体LB平板培养基中，抗性筛选，挑取单性克隆；将单克隆接入LB液体培养基中，培养，提取质粒，进行测序，结果在载体pET-3h (+)的BamHI和 SalI酶切位点间插入的基因序列如SEQ ID NO 8所示，表明构建的载体正确。蛋白表达将阳性重组菌接入安苄抗性(Amp+)LB液体培养基中，37°C震摇过夜，次日按1 100接种新鲜安苄抗性(Amp+)LB液体培养基，37°C震摇至OD6tltl = 0. 4，加入诱导剂IPTG，浓度为0. 4mM，于37°C继续震摇4小时，得到发酵液。蛋白纯化取诱导表达的发酵液100ml，8000rpm/min离心5min，集菌，弃上清。用 30ml裂解缓冲液重悬菌体，以25%振幅超声破碎(超3s，停9s) 1小时。取出超声裂解物， 以12000rpm离心20min，弃掉沉淀，收集上清液。向上清液中加入IOml回收缓冲液后混勻， Ih后以12000rpm离心20min，弃掉沉淀，收集上清液。将上清液与^ilNi-NTA混合，室温 200rpm振荡混勻4h，使目的蛋白与Ni-NTA完全结合。吸掉上清，依次加入含6M OM(6M、 5M、4M、3M、2M、1M、0M)尿素的复性缓冲液逐级复性；每次加入复性缓冲液后混勻，室温静置作用4h。待加入含OM尿素的复性缓冲液作用4h后，倒入纯化空柱中，加入IOml洗涤缓冲液洗涤，并控制流速为3ml/min。待液体流净，加入洗脱缓冲液，共洗脱4次，每次0. 5ml，将每次收集的洗脱液合并，即得到目的蛋白溶液。
每1升裂解缓冲液按照如下方法制备将50mmol NaH2PO4 · H2O、300mmol NaCl、 IOmmol咪唑和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到裂解缓冲液。0. lmol/L Tris-Cl 缓冲液配制将 12. llgTris、800mL ddH20 禾口 49mL HCl 混合，滴加浓盐酸调PH至8. 0，用ddH20定溶至IOOOmL,得到0. lmol/L Tris-Cl缓冲液。每1升回收缓冲液按照如下方法制备将IOOmmol NaH2PO4 · H20、0. ILTris-Cl缓冲液(即IOmmol Tris)、8mol尿素和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到回收缓冲液。复性缓冲液制备每1升含6M尿素复性缓冲液按照如下方法制备将500mmol NaCl,0. 2L Tris-Cl 缓冲液、6mol尿素、0. 2L甘油和水混合，调节pH至7. 4，用水定容至1升，得到含6M尿素复性缓冲液。每1升无尿素复性缓冲液按照如下方法制备将500mmOl NaCl,0. 2L Tris-Cl缓冲液、0. 2L甘油和水混合，调节pH至7. 4，用水定容至1升，得到无尿素复性缓冲液。5M-1M尿素复性缓冲液由6M尿素复性缓冲液和无尿素复性缓冲液不同体积配比得到。每1 升洗涤缓冲液组成将 50mmol NaH2PO4 'H2O^OOmmol NaCl、20mmol 咪唑和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到洗涤缓冲液。每1 升洗脱缓冲液组成将 50mmol NaH2PO4 · H20、300mmol NaCl、250mmol 咪唑、 0. 3L甘油和水混合，用NaOH调节pH至8. 0，用水定容至1L，得到洗脱缓冲液。每1升LB液体培养基组成将IOg胰蛋白胨、5g酵母提取物、IOg氯化钠和水混合，用水定容至1L，得到LB液体培养基。三、其它蛋白的制备制备方法与步骤二中基本相同，不同的是引物、出发载体、限制性内切酶、出发菌株、重组菌抗性筛选方式不同，具体如表2所示。当所用出发载体为pET_32a(+)时，用的出发菌株为BL21，对应的抗性筛选采用安苄抗性(Amp+)；当所用出发载体为pQE30时，用的出发菌株为M15，对应的抗性筛选采用安苄 (Amp+)和卡那(Kan+)双抗性。表2、引物、载体、酶
权利要求
1.一种用于诊断Q热病的蛋白组合物，由如下(1)-(7)中所述蛋白组成(1)为如下l_a或Ι-b所示Ι-a、氨基酸序列为SEQ ID NO=I所示的蛋白质；Ι-b、将SEQ ID NO :1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由Ι-a衍生的蛋白质；(2)为如下2-a或2-b所示2_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示的蛋白质；2-b、将SEQID NO :2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由2-a衍生的蛋白质；(3)为如下3-a或3-b所示3_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 3所示的蛋白质；3-b、将SEQID NO :3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3-a衍生的蛋白质；(4)为如下4-a或4-b所示4_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 4所示的蛋白质；4-b、将SEQID NO :4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由4-a衍生的蛋白质；(5)为如下5-a或5-b所示5_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 5所示的蛋白质；5-b、将SEQID NO :5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由5-a衍生的蛋白质；(6)为如下6-a或6-b所示6_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 6所示的蛋白质；6-b、将SEQID NO :6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由6-a衍生的蛋白质；(7)为如下7-a或7-b所示7_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 7所示的蛋白质；7-b、将SEQID NO :7所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由7-a衍生的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的蛋白组合物，其特征在于所述Q热病是由病原菌贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)感染动物引起的。
3.根据权利要求2所述的蛋白组合物，其特征在于所述动物为人或家畜或鼠；所述家畜为牛、羊或马。
4.一种用于诊断Q热病的蛋白芯片，由基底、检测点、阳性质控点和阴性质控点组成， 检测点、阳性质控点和阴性质控点均点制在所述基底上；所述检测点分为七种，每种检测点由如下(1)-(7)所示蛋白中的一种点制而成；(1)为如下Ι-a或l_b所示Ι-a、氨基酸序列为SEQ ID NO 1所示的蛋白质；Ι-b、将SEQ ID NO :1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由Ι-a衍生的蛋白质；(2)为如下2-a或2-b所示2_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示的蛋白质；2-b、将SEQID NO :2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由2-a衍生的蛋白质；(3)为如下3-a或3-b所示3_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 3所示的蛋白质；3-b、将SEQID NO :3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3-a衍生的蛋白质；(4)为如下4-a或4-b所示4_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 4所示的蛋白质；4-b、将SEQID NO :4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由4-a衍生的蛋白质；(5)为如下5-a或5-b所示5_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 5所示的蛋白质；5-b、将SEQID NO :5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由5-a衍生的蛋白质；(6)为如下6-a或6-b所示6_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 6所示的蛋白质；6-b、将SEQID NO :6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由6-a衍生的蛋白质；(7)为如下7-a或7-b所示7_a、氨基酸序列为SEQ ID NO 7所示的蛋白质；7-b、将SEQID NO :7所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由7-a衍生的蛋白质。
5.根据权利要求4所述的蛋白芯片，其特征在于所述阳性质控点由人源IgG或除人外的其它动物来源的IgG点制而成。
6.根据权利要求4或5所述的蛋白芯片，其特征在于每个所述检测点中蛋白的量为 4. 5 μ g ；每个所述阳性质控点中IgG的量为4. 5 μ g ；所述除人外的其它动物来源的IgG为家畜来源的IgG或鼠来源的IgG ；所述家畜来源的IgG为牛来源的IgG、羊来源的IgG或马来源的IgG。
7.根据权利要求4-6中任一所述的蛋白芯片，其特征在于所述Q热病是由病原菌贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)感染动物引起的。
8.根据权利要求7所述的蛋白芯片，其特征在于所述感染动物为感染人或感染家畜或感染鼠；所述感染家畜为感染牛、感染羊或感染马。
9.一种用于血清学诊断Q热的试剂盒，为如下I或II所示I、由权利要求1或2或3所述蛋白组合物、封闭液、漂洗液和荧光素标记的二抗组成；II、由权利要求4-8中任一所述蛋白芯片、封闭液、漂洗液和荧光素标记的二抗组成；所述封闭液按照如下方法制备得到将BSA溶于pH值为7. 4的PBS缓冲液中，BSA与PH值为7. 4的PBS缓冲液的配比为Ig 100ml，得到的溶液即为所述封闭液；所述荧光素标记的二抗为Cy5标记的羊抗人IgG或Cy5标记的羊抗除人以外其它动物来源的IgG ；所述漂洗液为PBST缓冲液；每1升所述PH值为7.4的PBS缓冲液按照如下方法制备将8gNaCl、0.2g KC1、 3. 53gNa2HP04. 12H20、0. 24g KH2PO4和水混合，用水定容至1升，得到的溶液的pH值为7. 4， 即得到所述PBS缓冲液；所述PBST缓冲液按照如下方法制备将所述pH值为7. 4的PBS缓冲液与Tween-20混合，PH值为7. 4的PBS缓冲液与Tween-20的配比为IL lml，得到所述PBST缓冲液。
10.权利要求1或2或3所述蛋白组合物在制备Q热病诊断芯片中的应用；权利要求1 或2或3所述蛋白组合物在制备Q热病诊断试剂盒中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种用于诊断Q热病的蛋白组合物。该蛋白组合物由如下(1)-(7)中所述蛋白组成(1)氨基酸序列为SEQ ID NO1所示的蛋白质；(2)氨基酸序列为SEQ ID NO2所示的蛋白质；(3)氨基酸序列为SEQ ID NO3所示的蛋白质；(4)氨基酸序列为SEQ ID NO4所示的蛋白质；(5)氨基酸序列为SEQ ID NO5所示的蛋白质；(6)氨基酸序列为SEQ ID NO6所示的蛋白质；(7)氨基酸序列为SEQ ID NO7所示的蛋白质。本发明的蛋白组合物及蛋白芯片可对Q热病人或动物的血清进行快速、准确的血清学分析诊断，结果准确可靠，操作简便，样本用量少，省时省力，有望代替传统的繁琐、累人、耗时的血清学诊断方法做Q热血清学诊断。
文档编号G01N33/68GK102169122SQ201110001420
公开日2011年8月31日 申请日期2011年1月5日 优先权日2011年1月5日
发明者温博海, 熊小路, 王锡乐 申请人:中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所