一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法
【专利摘要】一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，涉及一种检测方法，具体涉及一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤：⑴7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液制备；⑵样品溶液制备；⑶薄层色谱检测。本发明有益效果是检测7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇方法简单、实用和经济。
【专利说明】—种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法。
【背景技术】
[0002]紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物，也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明，紫杉醇只结合到聚合的微管上，不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内积累大量的微管，这些微管的积累干扰了细胞的各种功能，特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期，阻断了细胞的正常分裂。通过I1-1II临床研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。
[0003]7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇可以通过生物转化和化学合成为紫杉醇，所以检测7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇是重要的。
[0004]常规的7_木糖-10-去乙酸基紫杉醇检测方法为HPLC检测，填料为反相填料。流动相为乙腈-水，检测器是紫外检测器。
【发明内容】
[0005]常规的HPLC检测7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇方法要求高:
[0006]⑴需要一台HPLC，一台HPLC价格通常10万以上，HPLC价格高，普及率低；
[0007](2) HPLC需要有专业的人员操作、维护和维修；
[0008](3) HPLC检测需要大量溶剂，大量溶剂的使用对环境也造成了极大的污染；
[0009](4) HPLC检测每次只能检测一个样品，检测时间也长。
[0010]本发明提供了一种易于操作、能定性半定量和经济的薄层色谱检测方法，该方法解决HPLC检测的部分弊端。
[0011]一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤:
[0012]⑴称取7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇0.1?lmg，用Iml有机溶剂溶解，得到7_木糖-10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液；
[0013]⑵将红豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，浓缩浸提溶液至原体积的1/3?1/2，用等体积有机溶剂I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，称取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有机溶剂II溶解，得到样品溶液；
[0014]⑶吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各5?10 μ 1，点在同一硅胶G薄层板上，展开剂是卤代烃和醇，卤代烃和醇的体积比是100:10?I,展开,取出，晾干,用5?10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105°C烘干薄层板至斑点显色。
[0015]所述方法步骤⑴中的有机溶剂优选为甲醇、无水乙醇或N，N_甲基甲酰胺，N，N_甲基甲酰胺溶解7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇溶解度高，甲醇和无水乙醇沸点低。
[0016]所述方法步骤⑴红豆杉原料优选为树皮、枝叶和树根。
[0017]所述方法步骤⑵醇溶液优选为甲醇、无水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
[0018]所述方法步骤⑵有机溶剂I优选为二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
[0019]所述方法步骤⑵有机溶剂II优选为甲醇、无水乙醇或N，N- 二甲基甲酰胺，N，N- 二甲基甲酰胺溶解7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇溶解度高，甲醇和无水乙醇沸点低。
[0020]所述方法步骤⑶卤代烃优选为二氯甲烷或三氯甲烷。
[0021]所述方法步骤⑶醇优选为甲醇或无水乙醇。
[0022]本发明有益效果是:
[0023]⑴7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇检测方法简单、实用和经济。
[0024]⑵一次检测可以同时检测多个样品。
[0025]⑶检测结果可以定性和半定量。
【具体实施方式】
[0026]下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
[0027]实施例1
[0028]一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤:
[0029]⑴称取7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇标准品0.5mg,用Iml甲醇超声溶解，得到
7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液，浓度0.5mg/ml，作为定性和半定量的标准；
[0030]⑵将红豆杉树皮、枝叶和树根粉碎，粉碎后用无水乙醇浸提三次，合并三次浸提溶液，减压蒸馏法浓缩浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴温度55°C，浓缩至原体积的1/3，用等体积二氯甲烷萃取浓缩液三次，合并三次萃取相，减压蒸馏法蒸干萃取相，真空度0.4MPa，水浴温度35°C，称取蒸干粉末0.5mg，用Iml甲醇超声溶解，得到样品溶液；
[0031]⑶用玻璃点样毛细管吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各10 μ 1，点在同一硅胶G薄层板、距板底Icm处同一水平线上，展开剂是三氯甲烷和无水乙醇，三氯甲烷和无水乙醇的体积比是100:5，平衡5?lOmin，展开，展开至距板顶Icm处取出，取出，用热风吹干，用10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105°C烘干薄层板至斑点显色。
【权利要求】
1.一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤: ⑴称取7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇0.1?lmg，用Iml有机溶剂溶解，得到7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液； ⑵将红豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，浓缩浸提溶液至原体积的1/3?1/2，用等体积有机溶剂I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，称取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有机溶剂II溶解，得到样品溶液； ⑶吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各5?10 μ 1，点在同一硅胶G薄层板上，展开剂是卤代烃和醇，卤代烃和醇的体积比是100:10?I,展开,取出，晾干,用5?10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105°C烘干薄层板至斑点显色。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑴有机溶剂是甲醇、无水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑴红豆杉原料是树皮、枝叶和树根。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑵醇溶液是甲醇、无水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑵有机溶剂I是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑵有机溶剂II是甲醇、无水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑶卤代烃是二氯甲烷或三氯甲烷。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步骤⑶醇是甲醇或无水乙醇。
【文档编号】G01N30/90GK103808853SQ201210460881
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2012年11月15日 优先权日:2012年11月15日
【发明者】刘胜远 申请人:刘胜远