专利名称：一种海水总氮含量的测定方法
技术领域：
本发明属于海洋水质标准测定领域，特别涉及一种海水养殖中水体总氮含量的测定方法。
背景技术：
海水养殖是利用浅海、滩涂、港湾、围塘等海域进行饲养和繁殖海产经济动植物的生产方式，是人类定向利用海洋生物资源、发展海洋水产业的重要途径之一。海水养殖中，海水总氮是反应水质的重要指标之一，总氮是指水体中NH4-N、N03-N、NO2-N和有机氮之和的总称。海水养殖中，因为大量的外源性饵料和排泄物使水体中的N、P以及有机物大量增力口，导致水质恶化，成为制约海水养殖业发展的主要因素之一。如果在养殖过程中，对水体中总氮含量能进行实时监测，可以及时获得水体质量的相关信息，从而可根据水体中总氮的变化量采取相应的处理方法。目前海水总氮的测定方法是国标GB/T12763. 4-2007，具体为海水样品在碱性和110°C 120°C条件下，用过硫酸钾氧化，有机氮化合物被转化为硝酸氮，同时，水中的亚硝酸氮、铵态氮也定量地被氧化为硝酸氮。硝酸氮经还原为亚硝酸盐后与对氨基苯磺酰胺进行重氮反应，反应物再与1-奈替乙二胺二盐酸盐作用，生成深红色偶氮染料，于543nm波长处进行分光光度测定。由于上述方法涉及两步转化，不仅步骤繁复，耗时长(通常耗时6-8小时)，而且容易因物质转化产生总氮测定误差。而且现有的总氮检测方法中，样品使用量和试剂的使用量也相当多，造成了不必要的浪费。
发明内容
本发明的目的是提供一种海水总氮含量的检测方法，该方法通过直接测试水体中的硝酸氮的含量就能得到总氮的含量，测定效率高、测定过程更快捷。为了实现以上技术效果，本发明是通过如下步骤实现一种海水总氮含量的检测方法，其步骤包括(I)标准液吸光度的测定将硝酸钾标准液用稀释剂稀释后，加入碱性过硫酸钾溶液氧化，然后将混合液加热后冷却得到消解产物，在该消解产物中加入盐酸溶液溶解后用稀释剂稀释，利用紫外分光光度计测定吸光度；根据吸光度校正值绘制标准曲线。硝酸钾标准液与稀释剂的混合液中，氮的含量为0_9ii g/mL吸光度校正值为用紫外分光光度法分别于波长220和275nm处测出吸光度A220及A275，并按公式①，求出校正吸光度A A = A220-2A275。①(2)海水样品吸光度的测定将海水样品按照步骤(I)中的吸光度的测定方法测得吸光度值；根据步骤(I)中绘制的标准曲线计算样品中的总氮含量。即从步骤(I)中的标准曲线上查出相应的总氮量m，再用公式②计算总氮含量。总氮(mg/L)=m/v ②式中m—从标准曲线上查得的含氮量(Ug)
V—所取水样体积(ml)所述步骤(I)中，硝酸钾标准液中的氮离子的浓度为9-lOy g/mL。所述步骤(I)中，硝酸钾标准液与稀释剂的混合液中，硝酸钾标准液的体积百分比 0-80% o所述步骤(I)的碱性过硫酸钾溶液中，溶剂为无氨水，过硫酸钾含量为35 45g/L ;氢氧化钠含量为12 16g/L。所述紫外分光光度计以无氨水作为参比，比色皿光程为1cm，紫外光波长为220nm和275nm处测定吸光度。所述步骤(I)中，稀释剂为氯化钠溶液，该氯化钠溶液的质量浓度为32%。-37%。，溶剂为无氨水。所述盐酸溶液为质量浓度是30%-37%的盐酸和无氨水按照体积比为1-2 9的比例进行混合。所述混合液的加热温度为120°C _124°C，加热时间为0. 5-1小时。所述海水为养殖海水。本发明的有益效果是本发明提供的海水养殖水体中总氮含量的测定方法，比现有技术中测定海水的测定方法少了将水体中的硝酸氮经还原为亚硝酸盐，然后与对氨基苯磺酰胺进行重氮反应，反应物再与1-奈替乙二胺二盐酸盐作用，生成深红色偶氮染料的过程，而是直接测试水体中的硝酸氮的含量就能得到总氮的含量，测定过程更加简便，比现有检测技术节约了 2. 5个小时；所述海水总氮测定方法中无容器的转换，减少了实验误差；所述海水总氮测定方法中使用到的试剂品种少，用量少，节约了检测成本；所述海水总氮测定方法中只涉及到一步转化，减少了物质因多重转化而产生的测定误差，提高了检测正确率。
图1是本发明根据吸光度校正值绘制的标准曲线。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明作进一步说明实验所用到的设备ALP高压灭菌锅CL-32L、Merk Millipore纯水机SheEA00003D, HACH 紫外分光光度计 DR5000。实验所用到的试剂氢氧化钠溶液称取20gNa0H，溶于无氨水中，稀释至1000mL。碱性过硫酸钾溶液称取40g过硫酸钾(K2S2O8), 15gNa0H,溶于无氨水中，稀释至IOOOmL0(1+9)盐酸质量浓度为30% -37%的盐酸和无氨水按照体积比为1: 9的比例混合。硝酸钾贮备液称取0. 7218g经105°C 110°C烘干4h的优级纯KN O3溶于无氨水中，移至IOOOmL容量瓶中，加入2mL三氯甲烷为保护剂，无氨水定容至1000ml。。硝酸钾标准液将硝酸钾贮备液用无氨水稀释10倍而得。氯化钠溶液称取35gNaCl，溶于无氨水中，稀释至1000mL。
I、标准曲线的绘制( I)分别吸取 0、0. 50、1. 00,2. 00,3. 00,5. 00,7. 00,8. OOmL 的硝酸钾标准溶液于25mL的比色管中，用氯化钠溶液稀释至IOml标线。(2)在比色管中分别加入5ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布和橡皮筋裹紧管塞，以防进溅出。(3)将比色管置于压力蒸汽消煮器中，加热0. 5小时，放气使压力指针回零。然后升温至120°C 124°C，加热0. 5小时。将混合液冷却至室温后再加入(1+9)盐酸lmL，用氯化钠溶液稀释至25mL标线。在紫外分光光度计上，以无氨水作为参比，用IOmm石英比色皿分别在220nm及275nm波长处测定吸光度。(4)用校正的吸光度作为纵坐标，溶液中氮浓度作为横坐标，绘制标准曲线。具体标准曲线见图1。2、海水样品的测定取IOmL海水样品，按标准曲线绘制步骤的(2)至(4)操作，然后按校正吸光度，在校准曲线上查出相应的总氮量，再用公式总氮(mg/L) = m/v，计算总氮含量为64. 19 u g/
mLo式中m—从标准曲线上查得的含氮量(U g)V—所取水样体积(mL)3、本检测方法与现用测定方法精准度比较(I)将3个海水样品分别用本发明的测定方法和现用国际方法进行测试，具体结果如表I所示表I
__本发明检测方法__国标方法
测定浓度测定滚度漏定浓度
海水样a
权利要求
1.一种海水总氮含量的检测方法，其步骤包括(1)标准液吸光度的测定将硝酸钾标准液用稀释剂稀释后，加入碱性过硫酸钾溶液氧化，然后将混合液加热后冷却得到消解产物，在该消解产物中加入盐酸溶液溶解后用稀释剂稀释，利用紫外分光光度计测定吸光度；根据吸光度校正值绘制标准曲线；硝酸钾标准液与稀释剂的混合液中，氮的含量为0-9 μ g/mL ；(2)海水样品吸光度的测定将海水样品按照步骤(I)中的吸光度的测定方法测得吸光度值；根据步骤(I)中绘制的标准曲线计算样品中的总氮含量。
2.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述步骤(I)中，硝酸钾标准液中的氮离子的浓度为9-10 μ g/mL。
3.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述步骤(I)中，硝酸钾标准液与稀释剂的混合液中，硝酸钾标准液的体积百分比0-80%。
4.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述步骤(I)的碱性过硫酸钾溶液中，溶剂为无氨水，过硫酸钾含量为35 45g/L ;氢氧化钠含量为12 16g/L。
5.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述紫外分光光度计以无氨水作为参比，比色皿厚度为1cm，紫外光波长为220nm-275nm处测定吸光度。
6.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述步骤(I)中，稀释剂为氯化钠溶液，该氯化钠溶液的质量浓度为32%。-37%。，溶剂为无氨水。
7.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述盐酸溶液为质量浓度是30%-37%的盐酸和无氨水按照体积比为1-2 9的比例进行混合。
8.根据权利要求I所述的海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述混合液的加热温度为120。。_124°C，加热时间为O. 5-1小时。
9.根据权利要求I至7中任一种海水总氮含量的检测方法，其特征在于所述海水为养殖海水。
全文摘要
本发明属于海洋水质标准测定领域，特别涉及一种海水养殖中水体总氮含量的测定方法，首先测定标准液的吸光度将硝酸钾标准液用稀释剂稀释后，加入碱性过硫酸钾溶液氧化，然后将混合液加热后冷却得到消解产物，在该消解产物中加入盐酸溶液溶解后用稀释剂稀释，利用紫外分光光度计测定吸光度，根据吸光度校正值绘制标准曲线；然后将海水样品按照标准液吸光度的测定步骤检测，得到吸光度值；最后根据标准曲线计算样品中的总氮含量。本测定方法比现有技术中测定海水的测定方法少了中间的转化过程，测定步骤更加简便、快速、精准，比现用测定方法少了2.5个小时。本测定方法使用到的试剂品种少，用量少，节约了检测成本。
文档编号G01N21/33GK102980865SQ20121046623
公开日2013年3月20日 申请日期2012年11月17日 优先权日2012年11月17日
发明者时旭, 顾兆俊, 刘兴国 申请人:中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所