专利名称：一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条的制作方法
技术领域：
本实用新型属于免疫检测技术领域，涉及一种试剂条，尤其涉及一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条。
背景技术：
目前对人绒毛膜促性腺激素的检测方法主要有雄蟾蜍(青蛙)试验(MT)、胶乳凝集抑制试验(AIT)、红细胞凝集抑制试验(HAIT)、放射免疫试验(RIA)等。由于各种检测方法的不同(包括方法学原理，使用的生物制剂的质量，操作人员的素质及使用设备的好坏等)，所得结果并不能说明某种检测方法的优劣。这些方法准确，灵敏度较高，出现假阳性、假阴性的机率较低，其中雄蟾蜍(青娃)试验是以往很常用的检查方法，需要合格的动物，不能定量，而且操作麻烦，需要饲养雄蟾蜍，临床已淘汰使用；胶乳凝集抑制试验的试剂易得、简便，5分钟可以完成检测，但敏感性低且不能定量；红细胞凝集抑制试验的试剂条件要求高，需要2小时完成，敏感性低；放射免疫试验虽然可以大批量检测，灵敏度也较高，但需要 特定的设备和经过技术培训的操作人员，检测时间较长，整个实验必须在实验室内完成，不适合现场初筛。人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂具有携带方便，不需要设备，操作人员无需技术培训，可现场操作，3 5分钟即可给出结果等优点，非常适合对大批量样本进行现场筛查的工作。人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin, HCG),是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的蛋白类激素，其生物活性与黄体生成素(LH)很相似，二者通过血浆细胞膜上的LH/HCG受体起作用。近年来随着人们的进一步研究，HCG检测对筛查异常胎儿、HCG分泌异常引起的甲状腺功能亢进(甲亢)等领域中有着一定的检测价值，HCG几乎是胎盘的独特产物，临床应用的HCG是从孕妇尿中提取制成的，在产科中有极大的应用前景。HCG是所有人类激素中碳水化合物含量最高(30%)的糖蛋白激素，其分子量为36700，它由a (92个氨基酸)和0 (145个氨基酸)两个亚基组成，以非共价的方式连接。HCG在结构上和垂体产生的LH、FSH、TSH三种糖蛋白激素类似，但具有不同的氨基酸序列所决定的明显特征。HCG和LH的P亚单位相互间十分相似，但P-HCG亚单位羧基终端的28 32个氨基酸为HCG特有而不受LH干扰，因此利用P -HCG亚基的特异抗血清，测定母体血清中的P-HCG亚基有重要的临床意义。在正常妊娠和滋养细胞病人血中，至少有7种具有HCG免疫活性的分子(I)天然HCG ；(2)缺刻HCG ( ^ 44-45、^ 47-48或P 48-49位的肽联结缺失)；(3)酸性HCG ; (4) P天然游离P亚基；(5)缺刻游离P亚基；(6) @核心片段；(7)血清P核心片段-蛋白复合物。HCG的a和0链合成的调控是独立的，他们均以大分子的前体来合成，信号序列被微粒肽链内切酶分开。一旦HCG完整组成，分子即很快地从细胞上释放。一些研究证实胎盘促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone, GnRH),尤其是GnRH促进HCG的合成、分泌。近来，有报道提出胎盘的抑制素等对HCG的分泌起调节作用。此外，人们还曾研究和确定了许多因子在HCG合成中的作用。通过滋养细胞的体外实验发现，环磷酸腺苷(cAMP)衍生的丁酸盐、下丘脑样激素(GnRH，CRH)、白介素(IL21和IL26)及其他的细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF-a)、转化生长因子(TGF-P)、成纤维细胞生长因子(FGF)、集落刺激生长因子(GCSF)和甲状腺激素等均可促使HCG分泌的增加。完整的HCG分子主要在合体滋养细胞中合成，在妊娠前8周增加很快，以维持妊娠；在8周以后HCG逐渐下降，直到大约20周达到相对稳定水平。妊娠不同时期以及各孕妇之间血清HCG绝对值变化较大，一般非孕妇女血HCG〈100IU/L，妊娠期间血清HCG水平在妊娠最初3个月，每(2. 2±0. 5)天大约升高一倍，尿HCG (HCG 半定量法)非孕妇女〈25IU/L，孕 40 天 >5000IU/L,孕 60-70 天 > (8-32) X 104IU/L (清晨尿HCG水平最高，接近血清水平)。因此，HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义。异常妊娠与胎盘功能的判断。异位妊娠如宫外孕时，本试验只有60%的阳性 率，在子宫出血3天后HCG仍可为阳性，故HCG检查可作为与其它腹症的鉴别。HCG常为312-625IU/L。流产诊断与治疗不完全流产如子宫内尚有胎盘组织残存，HCG检查仍可呈阳性；完全流产或死胎时HCG由阳性转阴性，因此可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。先兆流产如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产。如HCG在2500IU/L以下，并逐渐下降，则有流产的或死胎的可能，当降至600IU/L时则为难免流产。在保胎治疗中，如HCG仍继续下降，说明保胎无意义，如HCG不断上升，说明保胎成功。在产后4天或人工流产术后13天，血清HCG应低于1000IU/L，产后9天或人工流产术后25天，血清HCG应恢复正常。如不符合这一情况，则应考虑有异常可能。滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测。葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾丸畸胎瘤等患者，尿中的HCG显著升高，可达10万到数百万IU/L，可用稀释试验诊断如妊娠12周以前1:500稀释尿液呈阳性，妊娠12周以后1:250稀释尿液呈阳性，对葡萄胎诊断有价值。1:100-1:500稀释尿液呈阳性对绒毛膜癌也有一定的诊断价值，如男性尿中的HCG升高，要考虑睾丸肿瘤如精原细胞癌、畸形及异位HCG瘤等。滋养层细胞肿瘤患者在术后的3周之后，尿HCG应<50IU/L，8-12周呈阴性；如HCG不下降或不转阴，提示可能有残留病变，这类病例常易复发，故需定期检查。
发明内容本实用新型的目的是提供一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，操作简单、反应快速、敏感性高、特异性强和适合现场检测，而且还具有生产周期短、产量高、成本低等优点。为了解决上述技术问题，本实用新型通过下述技术方案得以解决一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，包括支持物、样品垫、胶体金纸片和吸水垫，支持物上从加样端开始依次粘贴有样品垫、胶体金纸片和吸水垫，还包括硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜设于胶体金纸片和吸水垫之间，硝酸纤维素膜的两端分别与胶体金纸片和吸水垫相互交叠连接，硝酸纤维素膜上有检测区和对照区，检测区包被抗a -HCG单克隆抗体或抗P -HCG单克隆抗体，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体。本实用新型的一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，操作简单、反应快速、敏感性高、特异性强和适合现场检测，而且还具有生产周期短、产量高、成本低等优点。在免疫检测技术领域具有良好的应用前景。
图I为本实用新型所述一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条的结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图I与实施例对本实用新型作进一步详细描述。
实施例一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，如图I所示，包括支持物5、样品垫I、 胶体金纸片2和吸水垫4，支持物上从加样端开始依次粘贴有样品垫I、胶体金纸片2和吸水垫4，还包括硝酸纤维素膜3，硝酸纤维素膜3设于胶体金纸片2和吸水垫4之间，硝酸纤维素膜3的两端分别与胶体金纸片2和吸水垫4相互交叠连接，硝酸纤维素膜3上有检测区和对照区，检测区包被抗a-HCG单克隆抗体或抗P-HCG单克隆抗体，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体。利用胶体金免疫层析的原理，在硝酸纤维素膜3上的检测区包被抗P—HCG单克隆抗体，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体。当待测物中有被测的抗原物质(即人绒毛膜促性腺激素)时，待测物中的抗原物质就会与标记胶体金的抗a — HCG单克隆抗体抗体形成Ag-Ab-Au复合物，该复合物中抗体的活性位点将被样品溶液中的药物占据时，同时又和T线上的药物抗体结合；所以当样品中的人绒毛膜促性腺激素含量达25mIU/mL以上时，检测试剂条上的T线显色，可以判定为阳性。反之，当样品中人绒毛膜促性腺激素含量在25mIU/mL以下或无残留时，检测试剂条上的T线不显色，判定为阴性。操作简单、反应快速、敏感性高、特异性强和适合现场检测，而且还具有生产周期短、产量高、成本低等优点。在免疫检测技术领域具有良好的应用前景。总之，以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，凡依本实用新型申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本实用新型专利的涵盖范围。
权利要求1. 一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，包括支持物(5)、样品垫(I)、胶体金纸片(2 )和吸水垫(4 )，支持物上从加样端开始依次粘贴有样品垫(I)、胶体金纸片(2 )和吸水垫(4)，其特征在于还包括硝酸纤维素膜(3)，硝酸纤维素膜(3)设于胶体金纸片(2)和吸水垫(4)之间，硝酸纤维素膜(3)的两端分别与胶体金纸片(2)和吸水垫(4)相互交叠连接，硝酸纤维素膜(3)上有检测区和对照区，检测区包被抗a-HCG单克隆抗体或抗P-HCG单克隆抗体，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体。
专利摘要本实用新型属于免疫检测技术领域，涉及一种试剂条，尤其涉及一种人绒毛膜促性腺激素快速检测试剂条，包括支持物、样品垫、胶体金纸片、硝酸纤维素膜、吸水垫，支持物上从加样端开始依次粘贴有样品垫、胶体金纸片、硝酸纤维素膜、吸水垫，硝酸纤维素膜的两端分别与胶体金纸片和吸水垫相互交叠连接，硝酸纤维素膜上有检测区和对照区，检测区包被抗α-HCG单克隆抗体或抗β-HCG单克隆抗体，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体，操作简单、反应快速、敏感性高、特异性强和适合现场检测，而且还具有生产周期短、产量高、成本低等优点。在免疫检测技术领域具有良好的应用前景。
文档编号G01N33/577GK202494682SQ20122009273
公开日2012年10月17日 申请日期2012年3月13日 优先权日2012年3月13日
发明者周文良, 应旭霞, 陈国琴 申请人:杭州隆基生物技术有限公司