专利名称：一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，属于制药技术领域。
背景技术：
中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂)第十三册WS3-B-2624_97提供的舒经活血片由红花80g、香附(制)300g、狗脊(制)400g、香加皮200g、络石藤300g、伸筋草300g、泽兰叶300g、槲寄生400g、鸡血藤300g、自然铜(煅)50g制成，其质量检测方法单一，仅采用了显微鉴别方法，对成品质量的优劣无法实现全方位的检测，对产品质量的要求较低，一定程度上增加了劣质产品投入市场的可能性。本发明采用了显微鉴别方法、四个薄层鉴别方法以及含量测定方法通过多点多面的多项检测，该检测方法稳定可靠、且准确度高，更有效的保证了投入市场的产品质量，促进了在制备过程中加强了对产品质量的控制，保障了产品的有效性和稳定性。
发明内容
本发明的目的是提供一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，该质量检测方法稳定可靠、且准确度高，有效保证投入市场的产品质量。为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案:
本发明所述的中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草11.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成，该中药制剂可以是药剂学上所述的任一种剂型，其质量检测方法包括鉴别方法与含量测定方法: 鉴别:
(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐；
(2)取相当于生药材13.78 20.67g的本品，研细，加乙醚20 40ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材0.5g Ig,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ I,分别点于同一娃胶薄层板上，以正己烧-乙酸乙酯-二乙胺9 20:3 6:0 I为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
(3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每I ml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸15 25:1 4:0.1 0.8为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取相当于生药材13.78 27.56g的本品，研细，加甲醇40 60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸10 60:0 8:0 5:1 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取相当于生药材13.78 20.67g的本品，研细，加80%丙酮20 30ml，浸溃I小时，时时振摇,滤过,滤液作为供试品溶液,另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮IOml,振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各IOy 1，分别点于同一娃胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水5 9:0.3 0.6:1 3:1 4为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
含量测定:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸(40: 60: 2)为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；
对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成Iml含20 μ g的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液 的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，回流或超声处理30 40分钟，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为
0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，SP
得;
相当于Ig生药材的本品含香加皮以4-甲氧基水杨醛(C8H8O3)计，不得少于101.58Pg。该中药制剂的质量检测方法可以是:
方法一:
鉴别:
(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐；
(2)取相当于生药材17.23g的本品，研细，加乙醚30ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯9:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
(3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每I ml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸20:3:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每
次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶
醛
对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸60:5:2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取相当于生药材17.23g的本品，研细，加80%丙酮30ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水7:0.4:2:3为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
含量测定:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲
醇-水-醋酸(40: 60: 2)为流 动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；
对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制
成Iml含20 μ g的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约
1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测
定，即得；
相当于Ig生药材的本品含香加皮以4-甲氧基水杨醛(C8H8O3)计，不得少于101.58Pg。
方法二:
鉴别:
(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐；
(2)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加乙醚20ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯17:3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
(3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸15:1:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，力口甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸10:8:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加80%丙酮20ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水5:0.3:1:1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
含量测定:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲
醇-水-醋酸(40: 60: 2)为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；
对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成
Iml含20μ g的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约
1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，超声处理40分钟，功率为250W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测
定，即得；
相当于Ig生药材的本品含香加皮以4-甲氧基水杨醛(C8H8O3)计，不得少于101.58Pg。
方法三:
鉴别:
(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐；
(2)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加乙醚40ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-二乙胺20:6:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
(3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸25:4:0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)取相当于生药材27.56g的本品，研细，加甲醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，力口甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸60:5:2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加80%丙酮30ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水 9:0.6:3:4为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
含量测定:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲
醇-水-醋酸(40: 60: 2)为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；
对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制
成Iml含20 μ g的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约
1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，回流提取40分钟，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45μπι微孔滤膜滤过，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测
定，即得；
相当于Ig生药材的本品含香加皮以4-甲氧基水杨醛(C8H8O3)计，不得少于101.58Pg。本发明所述的一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，其中该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草
I1.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成药剂学上任一种剂型，通过舒经活络、活血散瘀，用于筋骨疼痛，肢体拘挛，腰背酸痛，跌打损伤。所提供的该制剂的质量检测方法稳定、可靠，优于中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂)第十三册WS3-B-2624-97所提供的检测方法，更有效的保证了产品的质量。发明人对该中药制剂中4-甲氧基水杨醛的含量做了如下研究:一、实验药品
1.实验药品的处方:
红花21g醋香附78.6g烫狗脊104.8g
香加皮52.4g络石藤78.6g伸筋草78.6g
泽兰叶78.6g槲寄生104.8g鸡血藤78.6g
煅自然铜13.1g
2.实验药品的制备:以上十味，先将红花、醋香附、烫狗脊、香加皮粉碎成细粉，过筛。煅自然铜加水煎煮2小时，然后加入络石藤、伸筋草、泽兰叶、槲寄生、鸡血藤煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过。滤液静置8 10小时，上清液浓缩成相对密度为1.25 1.35 (70°C)的稠膏，加入上述细粉混匀，加入淀粉适量、麦芽糖39g，制成颗粒，干燥，压制成1000片，包薄膜衣，即得。二、研究过程:
1、仪器与试药
仪器=Agilent 1100型高效液相色谱仪，G1314A型紫外检测器(美国安捷伦科技公司)；BP21ID型电子分析天平(德国赛多利斯集团公司);KQ250B型超声波清洗器(功率250W，频率40kHz)，(昆山市超声仪器有限公司)；UV-1800型紫外可见分光光度计，(日本岛津公司)。试剂:甲醇为色谱 纯(美国Honeywell公司);水为二次蒸馏水；其余试剂均为分析纯(西安化学试剂厂)。 对照品:4_甲氧基水杨对照品购自中国药品生物制品检定所(批号0790-200202 含量测定用)。2、测定波长的选择取4-甲氧基水杨醛对照品溶液，用紫外可见分光光度计，在190 400nm波长范围内进行扫描测定。结果表明，4-甲氧基水杨醒最大吸收波长为278nm。3、色谱条件
色谱柱:Agilent TC-C18 (250mmX4.6mm 5μ)色谱柱；流动相:甲醇-水-醋酸(40:60:2);流速:lml/min ;柱温:室温；检测波长:278nm ;进样量:10μ1。在选定条件下，4-甲氧基水杨醛与制剂中其它组分色谱峰可达到基线分离，4-甲氧基水杨醛与相邻峰的分离度为3.26，5.81。理论板数以4-甲氧基水杨醛峰计为15806。4、供试品溶液的制备
(I)、提取溶媒的确定参考文献及《中国药典》2010年版一部香加皮药材项下4-甲氧基水杨醛的含量测定，确定60%甲醇为提取溶媒。(2)、提取方法的确定取本品，研细，取约1.5g，二份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60%甲醇25ml，称定重量，一份超声处理(功率250W，频率40kHz ) 40分钟，另一份回流提取40分钟，放凉，称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。续滤液用微孔滤膜(0.45 μ m)滤过,测定，结果见表I。表I提取方法的比较
方法I 峰面积枳分均值 I峰面积枳分值原样量(A/g)
回薇法1344.3341.2
S声^ 1282.6I833.6结果表明，回流法与超声法测定结果无明显差异，故选简便易行的超声法作为提取方法。(3)、提取时间的确定取本品，研细，取约1.5g，四份，精密称定，置具塞锥形瓶
中，精密加60%甲醇25ml，称定重量，分别超声处理(功率250W，频率40kHz ) 10、20、30、40分钟，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。续滤液用微孔滤膜(0.45 μ m)滤过,测定,结果见表2。表2提取时间的比较
权利要求
1.一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草11.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法包括鉴别方法与含量测定方法: 鉴别:(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐； (2)取相当于生药材13.78 20.67g的本品，研细，加乙醚20 40ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材0.5g Ig,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ I,分别点于同一娃胶薄层板上，以正己烧-乙酸乙酯-二乙胺9 20:3 6:0 I为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点； (3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸15 25:1 4:0.1 0.8为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取相当于生药材13.78 27.56g的本品，研细，加甲醇40 60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成 每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸10 60:0 8:0 5:1 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)取相当于生药材13.78 20.67g的本品，研细，加80%丙酮20 30ml，浸溃I小时，时时振摇,滤过,滤液作为供试品溶液,另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮IOml,振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各IOy 1，分别点于同一娃胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水5 9:0.3 0.6:1 3:1 4为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定: 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸40: 60: 2为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于 2000 ； 对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成Iml含20μ g的溶液，摇匀，即得； 供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，回流或超声处理30 40分钟，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为.0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.根据权利要求1所述的一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草.11.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法包括鉴别方法与含量测定方法: 鉴别:(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐； (2)取相当于生药材17.23g的本品，研细，加乙醚30ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯9:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点； (3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以以石油醚60 90°C-乙酸乙酯-冰醋酸20:3:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每 次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛 对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸60:5:2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)取相当于生药材17.23g的本品，研细，加80%丙酮30ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水7:0.4:2:3为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定: 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸40: 60: 2为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成1ml含20μ g的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约.1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.根据权利要求1所述的一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草.11.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法包括鉴别方法与含量测定方法: 鉴别:(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐；(2)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加乙醚20ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯17:3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点； (3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸15:1:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸10:8:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)取相当于生药材13.78g的本品，研细，加80%丙酮20ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水5:0.3:1:1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定:色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸40: 60: 2为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ；对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成Iml含20μ g的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，超声处理40分钟，功率为250W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45 μ m微孔滤膜滤过，即得；`测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.根据权利要求1所述的一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草I1.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成，其特征在于该中药制剂的质量检测方法包括鉴别方法与含量测定方法: 鉴别:`(1)取本品，置显微镜下观察:花冠碎片黄色，有红棕色或黄棕色分泌管；分泌细胞类圆形，含淡黄色至红棕色分泌物，其周围细胞作放射状排列；梯纹管胞淡黄色至金黄色，纹孔排列整齐； (2)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加乙醚40ml，放置I小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液，另取香附对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-二乙胺20:6:1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点； (3)取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液及上述(2)项下的供试品溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60 90°C -乙酸乙酯-冰醋酸25:4:0.8为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (4)取相当于生药材27.56g的本品，研细，加甲醇60ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用盐酸调PH值至I 2，摇匀，加乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取原儿茶醛对照品，力口甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸`60:5:2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点`； (5)取相当于生药材20.67g的本品，研细，加80%丙酮30ml，浸溃I小时，时时振摇，滤过，滤液作为供试品溶液，另取红花对照药材0.5g,加80%丙酮10ml，振摇15分钟，静置，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水9:0.6:3:4为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点； 含量测定: 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-醋酸40: 60: 2为流动相；检测波长278nm，理论塔板数按4-甲氧基水杨醛峰计算，应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取4-甲氧基水杨醛对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成Iml含20 μ g的溶液，摇匀，即得； 供试品溶液的制备取相当于生药材13.78g的本品，精密称定，研细，取约,1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇25ml，称定重量，回流提取40分钟，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，滤过，弃去初滤液，续滤液用孔径为0.45μπι微孔滤膜滤过，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
5.根据权利要求1或2、3、4所述的一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，其特征在于相当于I g生药材的本品含香加皮以4-甲氧基水杨醛C8H8O3计，不得少于,101.58l^g0
全文摘要
本发明涉及一种舒筋活络、活血散瘀的中药制剂的质量检测方法，其中该中药制剂由红花3.05%、醋香附11.41%、烫狗脊15.21%、香加皮7.6%、络石藤11.41%、伸筋草11.41%、泽兰叶11.41%、槲寄生15.21%、鸡血藤11.41%、煅自然铜1.9%制成药剂学上任一种剂型，通过舒经活络、活血散瘀，用于筋骨疼痛，肢体拘挛，腰背酸痛，跌打损伤。本发明提供的质量检测方法稳定、可靠，优于中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂)第十三册WS3-B-2624-97所提供的检测方法，更有效的保证了产品的质量。
文档编号G01N30/90GK103149319SQ201310068988
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月5日 优先权日2013年3月5日
发明者黄小华, 付彬, 张 浩, 耿小秀, 王海亮 申请人:西安碑林药业股份有限公司