一种血清肌酸激酶检测试剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种肌酸激酶检测试剂。本发明的试剂是由试剂R1和试剂R2按照体积比4：1的比例组成的，其中试剂R1是由咪唑缓冲液、葡萄糖、纳米粒子、N-乙酰半胱氨酸、乙二胺四乙酸二钠、腺苷二磷酸、辅酶Ⅰ、腺嘌呤核糖核苷酸、丙酮酸脱羧酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、己糖激酶和十二烷基苯磺酸钠组成的，试剂R2是由咪唑缓冲液、磷酸肌酸、防腐剂和十二烷基苯磺酸钠组成的。本发明的肌酸激酶检测试剂中添加丙酮酸脱羧酶和γ-Fe2O3纳米粒子，可有效清除血清样本中的干扰物质，十二烷基苯磺酸钠配合乙二胺四乙酸二钠螯合血清样本中的金属离子，减少对反应酶的影响，是一种稳定、准确、敏感、抗干扰性强的检测试剂。
【专利说明】一种血清肌酸激酶检测试剂
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种涉及生物试剂，具体涉及一种检测试剂，尤其涉及一种血清肌酸 激酶检测试剂。
【背景技术】
[0002] 肌酸激酶（Creatine Kinase，CK) (ATP: Creatine N-phosphotransferase EC 2.7.3.2)又名磷酸肌酸激酶（CPK)。CK主要存在于骨骼肌、脑和心肌中。肌酸激酶对诊断 急性心肌梗死有较高价值。通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体 中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP)再生有直接关系的重要 激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。CK活性增高：主要见于心肌梗塞及 各种类型进行性肌萎缩、骨胳肌损伤、肌营养不良、急性心肌炎、脑血管意外、脑膜炎、甲状 腺功能减退、剧烈运动、使用氯丙嗪、青霉素等药物。CK活性的测定对以上疾病的诊断具有 重要的价值。
[0003] CK活力的测定大多都是根据Oliver所建立的酶促体系，以后Rosalki等又加以改 进。一般有两种反应过程，可任选其一，其中（1)反应过程是可逆性反应，（2)是不可逆反 应。
[0004]
【权利要求】
1. 一种血清肌酸激酶检测试剂，其特征在于，该试剂由试剂R1和试剂R2,按照体积比 4 :1的比例组成的； 所述试剂R1是由以下配比的成分组成的： 咪唑缓冲液 50-100 mmol 葡萄糖 2〇-50mmo1 纳米粒子 10_50mmol/L N-乙酰半胱氨酸 20_30mmol 乙二胺四乙酸二钠 l-10mmol 腺苷二磷酸 l-10mmol 辅酶 I l-lOmmol 腺嘌呤核糖核苷酸 10-30mmol 丙酮酸脱羧酶 0. 5-2KU 6_磷酸葡萄糖脱氢酶 2-5KU 己糖激酶 2-5KU 十二烧基苯磺酸钠 l-20g 去离子水加至1L ; 所述试剂R2是由以下配比的成分组成的： 咪唑缓冲液 50-100mmol 憐酸肌酸 100-200mnio1 防腐剂 l-l〇g 十二烧基苯磺酸钠 l-20g 去离子水加至1L。
2. 根据权利要求1所述的肌酸激酶检测试剂，其特征在于，所述纳米粒子为Y_Fe203纳 米粒子，其粒径为3_50nm。
3. 根据权利要求1所述的肌酸激酶检测试剂，其特征在于，所述防腐剂为叠氮化钠、 Proclin300中的一种或是两种的混合物。
4. 根据权利要求1所述的肌酸激酶检测试剂，其特征在于，所述咪唑缓冲液的pH值为 6. 5-7. 5〇
5. 根据权利要求1所述的肌酸激酶检测试剂，其特征在于，所述试剂R1是由以下配比 的成分组成的： 咪唑缓冲液 70 mmol 葡萄糖 30mmol 纳米粒子 30mmol/L N-乙酰半胱氨酸 25mmol 乙二胺四乙酸二钠 6mmol 腺苷二磷酸 lOmmol 辅酶I 5mmol 腺嘌呤核糖核苷酸 20mmol 丙酮酸脱羧酶 1. 2KU 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 4KU 己糖激酶 3KU 十二烧基苯磺酸钠 l〇g 去离子水加至1L。
6.根据权利要求1所述的肌酸激酶检测试剂，其特征在于，所述试剂R2是由以下配比 的成分组成的： 咪唑缓冲液 80mmol 憐酸肌酸 150mmol 防腐剂 5g 十二烧基苯磺酸钠 l〇g 去离子水加至1L。
【文档编号】G01N21/31GK104374905SQ201410697698
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月28日 优先权日:2014年11月28日
【发明者】谢清华, 王进, 甘宜梧, 谭柏清, 李静, 赵新, 朱玉娥 申请人:山东博科生物产业有限公司