一种离体神经组织损伤程度检测装置的制作方法

本发明涉及一种用于离体神经组织损伤程度的检测装置。

背景技术：

组织损伤使得细胞膜发生破裂，细胞内外的成分可通过这一受损区域进出细胞，所述的成分包括维持细胞结构和功能的离子和分子，从而使得神经组织的结构和功能发生改变。目前有多种方法致力于促进神经损伤的修复，但修复效果的评价多是通过复合动作电位的恢复程度来反映治疗方法对组织功能的修复效果，或者是通过病理切片直接观察组织的形态结构。复合动作电位检测的方法只能单一地反映治疗后组织的功能修复程度，无法表征组织内环境的变化情况，这可能导致该评价方法对治疗效果的评价不准确。组织切片方法需要获取组织标本，无法实时的表征组织的损伤程度。这些问题的存在严重制约了组织损伤修复的研究。

损伤电位是指组织损伤后损伤处与正常处之间存在的直流电位差，它是由细胞外钙、钠等阳离子大量向细胞内流动形成的，故损伤电位的出现是受损组织微环境发生改变的重要标志。此外，损伤电位与损伤程度密切相关，损伤越严重，损伤电位越大。在损伤后对组织的复合动作电位和损伤电位同时进行测量，可全面地反映损伤组织的结构和功能情况，从而实现损伤程度的检测。为确保离体神经组织的活性，需将组织浸泡在生理液中，生理液的阻抗较低，使得用表面电极记录到的损伤电位和复合动作电位与实际值之间相差较大。文献Effective repair of traumatically injured spinal cord by nanoscale block copolymer micelles(Shi et al.,2010)中介绍了双蔗糖间隙检测池，通过用等渗蔗糖溶液灌流组织来增加细胞外液的阻抗，以实现用表面电极记录复合动作电位，但无法用表面电极准确测量到损伤电位。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有评价方法的不足，提出一种用于离体神经组织损伤程度的检测装置。本发明能够在保证细胞活性的情况下，实现快速准确的检测离体神经组织的损伤程度。

本发明离体神经组织损伤程度检测装置，采用记录电极和损伤电位测量电极分别测量神经组织损伤前、后的复合动作电位和损伤电位，通过损伤前后复合动作电位的差值与损伤前复合动作电位幅值之比，反映离体神经组织功能的受损程度，同时通过将测量得到的损伤电位与事先测定的不同损伤程度下的损伤电位的数值比对，获得损伤组织内环境的变化情况。综合离体神经损伤组织的内环境和组织功能的变化情况，得到离体神经组织的损伤程度。

本发明离体神经组织损伤程度检测装置包括检测池、刺激电极、刺激电压发生电路、记录电极、电生理记录仪、损伤电位测量电极和电压显示设备。所述的检测池用于培养离体神经组织，以确保离体神经组织的活性。所述的刺激电极与刺激电压发生电路相连接，刺激电压发生电路产生脉冲刺激，并通过刺激电极将脉冲刺激施加到离体神经组织的头侧。刺激电极中，正电极放置在负电极的左侧。所述的记录电极共有2个，用于检测离体神经组织尾侧的复合动作电位。2个记录电极均放置在离体神经组织的尾侧，且记录电极中的负电极位于正电极的左侧。所述的电生理记录仪与记录电极相连，用于显示记录电极检测到的复合动作电位的波形。所述的损伤电位测量电极共有2个，2个损伤电位测量电极的头部分别贴在损伤处和损伤处尾侧的组织上，两者之间的电位差即为损伤电位。两个损伤电位测量电极与电压显示设备相连，用于显示损伤电位的数值。

所述的检测池内有7个腔室、侧面开有5个液体输入孔、5个液体输出孔、2个刺激电极安装孔和2个记录电极安装孔。检测池采用具有良好生物相容性的材料加工而成。

所述的7个腔室均为矩形腔，腔室的两端为半圆形，组成跑道形腔。跑道形腔两端的圆边是以矩形短边的中点为圆心，以矩形的短边边长为直径所做的半圆。7个腔室并列分布在一条直线上，从左到右依次为第一腔室至第七腔室，且7个腔室的深度相等。第一腔室和第七腔室的形状相同，大小相等，第三腔室矩形的大小与第一腔室矩形的大小相等，第二腔室和第五腔室的形状相同，大小相等，第四腔室和第六腔室的形状相同，大小相等。第一腔室与检测池左侧面的距离和第七腔室与检测池右侧面的距离相等。在第三腔室两端的圆边上各开一个圆弧形凹槽，上述的两个圆弧形凹槽关于第三腔室的中心对称。液体经过圆弧形凹槽缓冲后流入或流出第三腔室，防止第三腔室内的液体产生波动，从而减少液体流动对插入到第三腔室内的电极的影响，确保系统的稳定性。在所述的第一腔室的中心设有第一凸台，第七腔室的中心设有第三凸台，分别用于支撑离体神经组织的头侧和尾侧，防止安装在检测池内的离体神经组织出现拉伸损伤。在第三腔室中心设有第二凸台，该凸台为圆边矩形凸台，用于支撑离体神经组织的中间部位，并保证在任何情况下离体神经组织的宽度都小于圆边矩形凸台的长度。第一凸台、第二凸台和第三凸台的高度相等。

相邻的腔室之间设有隔开壁，用于将腔室分隔。在所述隔开壁的中心开有矩形槽，矩形槽的底面为圆弧形，矩形槽的底面与第一凸台的上顶面位于同一水平面。所述的矩形槽用于将离体神经组织安装、固定在检测池内，矩形槽的槽宽与离体神经组织的直径相等，矩形槽底面圆弧的直径与槽宽相等。

所述的5个液体输入孔与2个记录电极安装孔位于检测池的同一侧面。在液体输入孔内开有与液体输入孔同轴的圆柱形通孔，圆柱形通孔的直径小于液体输入孔的直径。5个圆柱形通孔从左至右分别依次与第二腔室、第三腔室、第四腔室、第五腔室、第六腔室连通。5个液体输入孔的中心位于同一高度。在记录电极安装孔内亦开有与记录电极安装孔同轴的圆柱形通孔，2个圆柱形通孔分别与第三腔室和第七腔室连通。2个记录电极安装孔的中心位于同一高度，且与第二凸台的上顶面在同一高度上，使得插入到记录电极安装孔内的记录电极位于离体神经组织的正下方，贴近但不接触离体神经组织。

对应的，5个液体输出孔和2个刺激电极安装孔也位于检测池的同一侧面，且位于液体输入孔所在侧面的对侧面。在液体输出孔内开有与液体输出孔同轴的圆柱形通孔，圆柱形通孔的直径小于液体输出孔的直径。5个圆柱形通孔从左至右分别依次与第二腔室、第三腔室、第四腔室、第五腔室、第六腔室连通。5个液体输出孔的中心轴线互相平行，位于同一水平面上。5个液体输出孔高于5个液体输入孔，使得检测池内的液面始终与液体输出孔的下沿在同一高度，保证了液面的平稳，并使得离体神经组织能完全浸没在液体内。液体输入孔和液体输出孔均外接软管，便于与外围设备相连。所述的刺激电极安装孔与记录电极安装孔的直径和深度均相等，且刺激电极安装孔与记录电极安装孔等高。所述的2个刺激电极安装孔内开有与刺激电极安装孔同轴的圆柱形通孔，这两个圆柱形通孔分别与第一腔室和第三腔室连通。刺激电极安装孔和记录电极安装孔内均装有圆柱形医用硅胶塞，以便于安装、固定刺激电极和记录电极。

所述的刺激电极和记录电极均由导电性高，稳定性好，具有生物相容性的材料组成，如银或铂铱合金，外加绝缘以及连接线。所述的电压显示设备可以是万用表、示波器或数据采集卡。损伤电位测量电极采用盐桥电极，由电极导线、塞子、甘汞电极、上玻璃管、内盐桥液、琼脂、下玻璃管、外盐桥液和多孔陶瓷组成。上玻璃管和下玻璃管均呈上粗下细的中空圆柱状，下玻璃管内装有外盐桥液，外盐桥液为生理盐水，即质量百分比为0.9％的氯化钠溶液。下玻璃管的下端口用多孔陶瓷封堵。上玻璃管内装有内盐桥液，内盐桥液为饱和氯化钾溶液，上玻璃管的下端口用琼脂封堵，甘汞电极置于上玻璃管中，浸泡在饱和氯化钾溶液中，上玻璃管的上端用塞子封堵。电极导线的一端与甘汞电极相连，电极导线的另一端从塞子穿出，和电压显示设备相连。使用时将上玻璃管下端插入下玻璃管内的外盐桥液中，并将两个玻璃管固定在一起，多孔陶瓷封堵的一端为损伤电位测量电极的头部。

利用本发明装置进行离体神经组织损伤程度测量的操作步骤如下：

步骤1，将离体神经组织安装、固定在检测池内，刺激电极和记录电极分别安装在刺激电极安装孔和记录电极安装孔内，刺激电极和记录电极均位于脊髓的正下方，但不与脊髓直接接触。

步骤2，向检测池的7个腔室内加入液体。第一腔室和第七腔室内的液体是不流动的，其余腔室内的液体通过液体输入孔和液体输出孔连续地灌流。第一腔室和第七腔室充满的是等渗氯化钾溶液，使得处于第一腔室和第七腔室内的神经组织去极化。第三腔室和第五腔室内的液体为生理液，经过生理液的持续灌流，离体神经组织可存活数小时。第二腔室、第四腔室和第六腔室内的液体为等渗蔗糖溶液，经过一定时间的灌流，位于第二腔室、第四腔室和第六腔室内的神经组织的神经纤维间的体液逐渐被等渗蔗糖溶液取代，使得细胞外液的阻抗显著增加，进而可进行复合动作电位和损伤电位的测量。

步骤3，测量离体神经组织损伤前和损伤后的复合动作电位，测量时开启刺激电压发生电路，通过刺激电极给离体神经组织施加脉冲刺激，用记录电极检测离体神经组织的复合动作电位，电生理记录仪显示记录电极检测到的复合动作的波形。计算损伤前后复合动作电位的差值与损伤前复合动作电位幅值之比，这一比值为损伤后组织功能的紊乱程度，反映了组织功能的受损程度。

步骤4，测量损伤电位，测量时损伤电位测量电极的头部轻轻地贴在离体神经组织上。两个损伤电位测量电极分别位于离体神经组织损伤处和损伤处尾侧的离体神经组织上，观察电压显示设备上的示数，将电压显示设备上的示数与事先测定的特定损伤程度下的损伤电位的数值比对，获得损伤组织内环境的变化情况。综合步骤3和步骤4的测量结果，获得离体神经组织的内环境变化情况和组织功能的紊乱程度，从而实现损伤程度检测的目的。

本发明能够克服现有评价方法不全面，以及用表面电极测量到的电生理信号不准确的缺点。通过高阻抗的等渗蔗糖溶液灌流组织使细胞外液的阻抗增加，来提高用表面电极测量损伤电位和复合动作电位的准确性。损伤电位和复合动作电位能够分别反映离体神经组织的内环境状态和传导特性，故可较全面地表征离体神经组织的损伤程度，从而为组织损伤治疗方法的治疗效果提供可靠的评价方法。

本发明装置与现有的双蔗糖间隙检测池相比，增加了一个生理液灌流腔和一个等渗蔗糖溶液的灌流腔，给位于损伤处和正常处之间的离体神经组织一个高的细胞外阻抗，使得离体神经组织的损伤处与正常处之间的直流电位差，即损伤电位可用表面电极测量，从而使得本发明能够在检测复合动作电位的同时用表面电极检测损伤电位，从而实现快速全面评价离体神经组织的损伤程度。

附图说明

图1是本发明用于离体神经组织损伤程度检测装置实施例的原理图；

图2是本发明检测池的三维结构图；

图3是本发明的检测池的前视面图；

图4是本发明的检测池的后视面图；

图5是本发明损伤电位测量电极的结构图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明。

如图1所示，本发明用于离体神经组织损伤程度检测装置的实施例包括检测池1，一对刺激电极31、32，刺激电压发生电路4，一对记录电极33、34，电生理记录仪5，一对损伤电位测量电极21、22，以及电压显示设备6。

所述的检测池1用于培养离体神经组织7，以确保离体神经组织7的活性。所述的刺激电极31、32和刺激电压发生电路4相连接，刺激电压发生电路4产生脉冲刺激，并通过刺激电极31、32将脉冲刺激施加在离体神经组织上。所述的记录电极33、34用于检测离体神经组织的复合动作电位，电生理记录仪5与记录电极33、34相连，用于记录、显示复合动作电位的波形。损伤电位测量电极21、22分别贴在损伤处和损伤处尾侧的组织上，测量得到离体神经组织的损伤电位。电压显示设备6与损伤电位测量电极21、22相连接，用于显示损伤电位的数值。

所述的检测池1采用具有良好生物相容性的有机玻璃块加工而成，尺寸为60×65×25mm。检测池1内有7个腔室，侧面开有5个液体输入孔、5个液体输出孔、2个刺激电极安装孔、以及2个记录电极安装孔。所述的7个腔室均为矩形腔，腔室的两端为半圆形，组成跑道形腔。所述的跑道形腔的圆边是以矩形短边的中点为圆心，以矩形的短边边长为直径所做的半圆，如图2所示。

图2为检测池1的三维视图，其中A为上表面，B为前侧面，C为后侧面，D为左侧面，E为右侧面。从检测池1的上表面向下开第一腔室A1，第一腔室A1的中心与左侧面D的距离为10mm，与前侧面B的距离为30mm。第一腔室A1的宽度为10mm，长度为20mm。在第一腔室A1的右侧依次开有形状相同的第二腔室A2、第三腔室A3、第四腔室A4、第五腔室A5、第六腔室A6和第七腔室A7，且7个腔室的中心位于同一直线上。第三腔室A3、第七腔室A7与第一腔室A1的大小相等，且第三腔室A3的中心与左侧面D的距离为29mm，第七腔室A7与右侧面E的距离相等，为10mm。第二腔室A2与第五腔室A5的大小相等，腔室的宽度为4mm，长度为29mm。第二腔室A2的中心距离第一腔室A1的中心9.5mm，第五腔室A5的中心距离第二腔室A2的中心22.5mm。第四腔室A4与第六腔室A6的大小相等，腔室的宽度为2mm，长度为30mm。第四腔室A4的中心距离第三腔室A3的中心8.5mm，且第六腔室A6的中心距离第四腔室A4的中心9mm。上述的7个腔室的深度相等，均为22mm。

在第三腔室A3靠近后侧面C的圆边上开有第一圆弧形凹槽A33，第一圆弧形凹槽A33的中心位于第三腔室A3靠近后侧面C的圆边上，且与第三腔室A3的中心的横轴距离为3mm，与第三腔室A3的中心的纵轴距离为14mm。圆弧形凹槽A33的半径为2.5mm，圆心角为202度，深度与第三腔室A3的深度相等。对应的，以第三腔室A3的中心为对称中心，在第三腔室A3靠近前侧面B的圆边上开有一个与第一圆弧形凹槽A33成中心对称的第二圆弧形凹槽A32。液体经过第二圆弧形凹槽A32、第一圆弧形凹槽A33的缓冲后流入、流出第三腔室A3，防止第三腔室A3内的液体产生波动，从而减少液体流动对插入到第三腔室A3内的电极产生影响，确保系统的稳定性。

在第一腔室A1的中心设有第一凸台A11，第七腔室A7的中心设有第三凸台A71，第一凸台A11和第三凸台A71分别用于支撑离体神经组织的头部和尾部，防止安装在检测池内的离体神经组织出现拉伸损伤。第一凸台A11和第三凸台A71为尺寸相等的圆柱形凸台，凸台直径为5mm，高度为7mm。在第三腔室A3的中心设有第二凸台A31，该凸台为圆边矩形凸台，用于支撑离体神经组织的中间部位。第二凸台A31的高度与第一凸台A11的高度相等，宽度为5mm，长度为10mm，使得即使在完全挤压的状态下离体神经组织的宽度仍小于第二凸台A31的长度。

所述的7个腔室的相邻腔室之间有隔开壁A8，用于将各腔室分隔。在隔开壁A8的中心开有矩形槽A81，矩形槽A81的底面为圆弧形，矩形槽A81的底面与第一凸台A11的上顶面位于同一水平面。所述的矩形槽A81用于将离体神经组织安装、固定在检测池1内。矩形槽A81的槽宽与离体神经组织的直径相等，矩形槽A81的底面圆弧的直径与槽宽相等。

如图2和图3所示，在检测池1的前侧面B上开有5个液体输入孔B1、B2、B4、B5、B6，以及2个记录电极安装孔B3、B7，5个液体输入孔和2个记录电极安装孔的孔深均为11mm。第一液体输入孔B1、第二液体输入孔B2、第四液体输入孔B5和记录电极安装孔B3、B7的直径均为4mm，第三液体输入孔B4和第五液体输入孔B6的直径为2mm。在第一液体输入孔B1、第二液体输入孔B2和第四液体输入孔B5内开有直径为2mm的圆柱形通孔B11、B21、B51，3个圆柱形通孔B11、B21、B51分别与与液体输入孔B1、B2和B5同轴，第一圆柱形通孔B11与第二腔室A2连通，第二圆柱形通孔B21与第二圆弧形凹槽A32连通，第三圆柱形通孔B51与第五腔室A5连通。在第三液体输入孔B4和第五液体输入孔B6内分别开有直径为1mm的圆柱形通孔B41、B61，圆柱形通孔B41、B61分别与第三液体输入孔B4、第五液体输入孔B6同轴，第四圆柱形通孔B41与第四腔室A4连通，第五圆柱形通孔B61和第六腔室A6连通。5个液体输入孔的中心轴线在同一水平面上，且与检测池1的上表面A平行，距离为20mm。在所述的记录电极安装孔B3、B7内亦开有同轴的圆柱形通孔B31、B71，圆柱形通孔B31和B71的直径为1.5mm。第六圆柱形通孔B31与第三腔室A3连通，第七圆柱形通孔B71与第七腔室A7相连通。所述的电极安装孔B3、B7的中心轴线在同一水平面上，且与第二凸台A31的上顶面在同一高度上，使得经由电极安装孔B3、B7和第六圆柱形通孔B31、第七圆柱形通孔B71插入到检测池1内的记录电极33、34位于离体神经组织的正下方，贴近但不接触离体神经组织。

如图2和图4所示，对应的，在检测池1的后侧面C上开有5个液体输出孔C2、C4、C5、C6、C7，以及2个刺激电极安装孔C1和、C3，5个液体输出孔和2个刺激电极安装孔的孔深均为11mm。第一液体输出孔C2、第二液体输出孔C4、第四液体输出孔C6和刺激电极安装孔C1、C3的直径相等，均为4mm，第三液体输出孔C5和第五液体输出孔C7的直径均为2mm。在第一液体输出孔C2、第二液体输出孔C4和第四液体输出孔C6内开有直径为2mm的圆柱形通孔C21、C41、C61，三个圆柱形通孔C21、C41、C61分别与液体输出孔C2、C4、C6同轴，圆柱形通孔C21与第二腔室A2连通，圆柱形通孔C41与第一圆弧形凹槽A33连通，圆柱形通孔C61与第五腔室A5连通。在第三液体输出孔C5和第五液体输出孔C7内开有直径为1mm的圆柱形通孔C51、C71，圆柱形通孔C51、C71分别与第三液体输出孔C5和第五液体输出孔C7同轴，圆柱形通孔C51与第四腔室A4连通，圆柱形通孔C71和第六腔室A6连通。5个液体输出孔的中心轴线在同一水平面上，且与检测池1的上表面A平行，距离检测池1的上表面A 5mm。液体输出孔的位置高于液体输入孔，使得检测池1内的液面始终与液体输出孔的下沿等高，保证液面的平稳，并使得离体神经组织能完全浸没在液体内。所述的刺激电极安装孔C1、C3与记录电极安装孔B3、B7等高且直径相等。在刺激电极安装孔C1、C3内分别开有直径为1.5mm的同轴圆柱形通孔C11、C31，圆柱形通孔C11与第一腔室A1连通，圆柱形通孔C31与第三腔室A3连通。液体输入孔和液体输出孔均外接软管，以便与外围设备相连。刺激电极安装孔和记录电极安装孔内均装有圆柱形医用硅胶塞，刺激电极和记录电极插入圆柱形医用硅胶塞的中心以固定。

所述的刺激电极31、32和记录电极33、34均由导电性高，稳定性好，具有生物相容性的材料组成，如银或铂铱合金，外加绝缘及连接线。所述的电压显示设备6可以是万用表、示波器或数据采集卡。

图5所示为本发明损伤电位测量电极。本发明的损伤电位测量电极21、22采用盐桥电极的结构，由电极导线2i、塞子2h、甘汞电极2g、上玻璃管2e、内盐桥液2f、琼脂2c、下玻璃管2d、外盐桥液2b和多孔陶瓷2a组成。上玻璃管2e和下玻璃管2d均呈上粗下细的中空圆柱状。下玻璃管2d内装有外盐桥液2b，外盐桥液2b为生理盐水，即质量百分比0.9％的氯化钠溶液。下玻璃管2d的下端用多孔陶瓷2a封堵。上玻璃管2e内装有内盐桥液2f，内盐桥液2f为饱和氯化钾溶液，上玻璃管2e的下端用琼脂2c封堵。甘汞电极2g置于上玻璃管2e中，浸泡在內盐桥液2f中。上玻璃管2e的上端用塞子2h封堵。电极导线2i的一端与甘汞电极2g相连接，电极导线2i的另一端从塞子2h穿出，和电压显示设备6相连。使用时将上玻璃管2e插入下玻璃管2d的外盐桥液2b中，并将两个玻璃管固定在一起，多孔陶瓷2a封堵的一端为损伤电位测量电极21、22的头部。

利用本发明装置进行离体神经组织损伤程度测量的过程如下：

步骤1，将离体神经组织7通过第一凸台A11、第二凸台A31、第三凸台A71以及圆弧底面矩形槽A81安装在检测池1内，在圆弧底面矩形槽A81处用少量的真空硅脂和医用硅胶片将离体神经组织7固定。刺激电极31、32分别穿过第一圆柱形医用硅胶塞81、第二圆柱形医用硅胶塞82，经由圆柱形通孔C11、圆柱形通孔C31插入到第一腔室A1、第三腔室A3内。对应的，记录电极33、34分别穿过第三圆柱形医用硅胶塞83、第四圆柱形医用硅胶塞84，经由圆柱形通孔B31、圆柱形通孔B71分别插入到第三腔室A3、第七腔室A7内。

步骤2，向检测池的7个腔室内加入液体。第一腔室A1和第七腔室A7内充满的是等渗氯化钾溶液，使得位于第一腔室A1和第七腔室A7内的神经组织去极化。第三腔室A3和第五腔室A5通过第二液体输入孔B2、第四液体输入孔B5将生理液导入到腔室内，并分别通过对应的第二液体输出孔C4、第四液体输出孔C6流出，生理液的流速为2ml/min。生理液的持续灌流使得离体组织可存活数小时，确保了系统的稳定性。同时，通过第一液体输入孔B1、第三液体输入孔B4、第五液体输入孔B6外接软管，将等渗蔗糖溶液分别导入第二腔室A2、第四腔室A4及第六腔室A6内，并通过对应的第一液体输出孔C2、第三液体输出孔C5、第五液体输出孔C7流出，蔗糖溶液的流速为1ml/min。蔗糖溶液可迅速进入离体神经组织的细胞外空间，由于蔗糖溶液的高阻抗，因而有效地增大了细胞外液的阻抗，从而使得通过蔗糖这段的电压降要比通过此条电路的细胞膜和细胞内部阻抗上的电压降大得多，进而可进行复合动作电位和损伤电位的测量。同时，蔗糖溶液的连续流动，避免了由于组织内离子渗透造成的特别阻抗的降低，从而增加测量的稳定性。

步骤3，测量离体神经组织损伤前和损伤后的复合动作电位。测量时开启刺激电压发生电路4，通过刺激电极31、32给离体神经组织7施加脉冲刺激，离体神经组织7会产生相应的响应。由于位于第四腔室A4和第六腔室A6内的神经组织经等渗蔗糖溶液的持续灌流，使得位于第四腔室A4和第六腔室A6内的神经组织的神经纤维间的体液被等渗蔗糖溶液取代，因此处于第四腔室A4、第五腔室A5、第六腔室A6中的神经组织节段的细胞外阻抗可等效为一高阻抗。故离体神经组织7产生的响应动作电位可通过记录电极33、34接收，并显示在电生理记录仪5上。计算损伤前后的复合动作电位的差值与损伤前复合动作电位的比值，这一比值为损伤后组织功能的紊乱程度，反映了组织功能的受损程度。

步骤4，测量损伤电位。测量时损伤电位测量电极21、22的头部分别轻轻地贴在离体神经组织7的损伤处7a和第五腔室A5内的离体神经组织7上，观察电压显示设备6上的示数。将电压显示设备上的示数与事先测定的不同损伤程度下的损伤电位的数值比对，获得损伤组织内环境的变化情况。综合步骤3和步骤4的测量结果，获得离体神经损伤组织的内环境和功能的变化，从而实现损伤程度检测的目的。