一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸及其制备方法与流程

文档序号:11109971阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:包括底板(1),底板(1)的顶部设置有检测层(4),检测层(4)上设置有检测线(6)和对照线(7),检测层(4)的顶部靠近对照线(7)的一侧设置有吸收层(5),靠近检测线(6)的一侧设置有免疫金标垫(3),免疫金标垫(3)的顶部设置有样品垫(2);

免疫金标垫(3)上涂覆有胶体金颗粒,该胶体金颗粒上结合有SPA标记物,检测线(6)上涂覆/浸润有A型口蹄疫病毒样颗粒,对照线(7)上涂覆/浸润有兔IgG。

2.如权利要求1所述的一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:所述免疫金标垫(3)上胶体金与SPA的比例为2×104:1~2。

3.如权利要求2所述的一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:所述免疫金标垫(3)上胶体金与SPA的比例为2×104:1.3。

4.如权利要求1所述的一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:所述免疫金标垫(3)的吸附比例为10~50μL/cm。

5.如权利要求1所述的一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:所述检测线(6)上涂覆/浸润有浓度为0.5~1mg/mL的A型口蹄疫病毒样颗粒。

6.如权利要求1所述的一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸,其特征在于:所述对照线(7)上涂覆/浸润有浓度为0.8~1.5mg/mL的免疫兔血清IgG。

7.一种用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸的制备方法,其特征在于、包括以下步骤:

A、制备LgG,制备并纯化胶体金,将胶体金与SPA按质量比为2×104:1~1.5反应,得到免疫胶体金,将浓度为1~1.2g/ml的免疫胶体金按吸附比为10~50μL/cm吸附在玻璃膜上,得到免疫金标垫(3);

B、使用硝酸纤维膜作为检测层(4)基材,在检测线(6)上喷涂浓度为0.5~1mg/mL的A型口蹄疫病毒样颗粒,在对照线(7)上喷涂浓度为0.8~1.5mg/mL的免疫兔血清IgG;

在检测层(4)的中部距检测线(6)0.3~1cm处,喷涂对照线(7),喷膜量为5~15μl/1cm进行喷膜,喷膜后干燥得到检测层(4);

C、在底板1的顶部设置检测层(4),并将检测层(4);压平,将吸收层(5)一部分固定在底板(1)上,一部分固定在检测层(4);上靠近对照线(7)的部分,将免疫金标垫(3)的一侧固定在底板(1)上,另一侧固定在检测层(4);靠近检测线(6)的一侧,样品垫(2)的一侧固定在底板(1)上,样品垫(2)的一侧固定在底板(1)上,另一侧固定在免疫金标垫(3)上。

8.如权利要求7所述的用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸的制备方法,其特征在于:免疫金标垫(3)的制备方法为:使用浓度为0.1M的K2CO3调整胶体金的pH值为5.9,按质量比为2×104::1~1.5将相应的SPA溶液加入胶体金中放置30min后,在转速为10000r/min、温度为4℃的条件下离心30min,将沉淀溶于重悬液中混合均匀,用玻璃膜吸附后晾干。

9.如权利要求7所述的用于测试动物A型口蹄疫的胶体金试纸的制备方法,其特征在于:所述检测线(6)上A型口蹄疫病毒样颗粒的浓度为0.8mg/mL,所述对这线(7)上免疫兔血清IgG的浓度为1mg/mL。

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