一种用于制备薄层色谱的薄层点样方法与流程

本发明属于薄层色谱分析及制备技术领域，具体涉及一种制备薄层点样的方法。

背景技术：

薄层色谱设备简单，操作方便，适应性广，可以快速给出可靠、准确的实验结果，是一种可供选择的经济、可靠、快速的分析方法。常用的薄层色谱载样量少，多用于定性分析，无法大量制备样品，而制备色谱是对常用薄层色谱应用的扩展，克服了常用薄层色谱载样量少的缺点，既保留了快速高效的分离效果又可对混合物达到制备的作用，具有操作方便、设备简单、分析制备速度快的优点。虽然柱色谱为纯化样品常用方法，但对于少量待分离或难分离样品，柱色谱中的固定相可能会浪费一些样品且成本大，而且由于不能实时检测，分离效果差，不易得到纯品。因此对于少量样品的制备，制备色谱是一种低成本、设备简单，分离速度快的有效方法。

常规的制备方法，在制备板上点样时，常用点状点样，在薄层板上呈现波浪状条带，这样对于分离效果差的样品，多个化合物的条带可能出现交叉，难以分析和样品分离制备。

技术实现要素：

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种用于薄层色谱分析的薄层点样的制备方法，本发明的方法具有设备简单、易操作、步骤少、快捷、方便，并且成本低，点样准确的优点，使少量样品通过本发明的方法有效的得到分离制备。

本发明采用的技术方案为：一种用于制备薄层色谱分析的薄层点样方法，包括以下步骤：

1)薄层板的制备：取硅胶和羧甲基纤维素钠水溶液混合均匀，搅拌至硅胶完全润湿，超声处理4-5min，充分排出溶液中的气泡，然后将调制好的硅胶于玻璃板上涂匀，室温下干燥后，置于烘箱中，于100-110℃下烘干20-40min，得薄层板；

2)点样装置的制备：取玻璃胶头滴管和脱脂棉，将脱脂棉揉搓成1cm长细条状后从胶头滴管下端塞入胶头滴管，下端出口端外留出0.4-0.6cm的脱脂棉，呈毛笔状；

3)点样：将标尺放于距薄层板下端1-5cm处，与薄层板下缘平行，使用铅笔沿标尺轻轻画一条点样线，将点样装置脱脂棉一端浸没样品，吸取适量样品，然后匀速沿点样线点板；

4)样品展开：配制流动相，将点样后的薄层板在层析缸中展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；

5)样品富集：沿展开带边界用刮刀将展开带刮下，用有机溶剂将展开带上的样品组分溶解，过滤，滤液在旋转蒸发仪中减压浓缩，得粉末样品。

上述的一种用于制备薄层色谱的薄层点样方法，其特征在于，所述的玻璃胶头滴管的出口端直径为2-5mm。

本发明具有以下有益效果：

1.本发明，通过对点样装置和点样方式的创新，使得少量样品的分析和制备，操作更加方便，而且点样效果更好。

2.本发明，通过对点样装置和点样方式的创新，使得点样时，克服了传统的波浪状线条的缺陷，本发明的点样方式使样品呈现平行的色谱带，使得样品分离效果更好，多个化合物的条带不会出现交叉，便于展开和样品制备。

3.本发明，用于样品的定性分析和分离制备，使得分析过程更加高效，快速，分析结果更加准确。

4.本发明，对设备和费用要求较低，且操作简便，步骤少，灵活性大。

5.本发明便于推广，可以不需要特殊设备即能开展工作，对于少量或难分离样品的分析兼分离制备来说是一种很好的方法。

6.本发明，所制备的点样装置末端是材质柔软的脱脂棉，点样时能防止划破薄层板从而能更好的在薄层板上划线，利于样品展开。

附图说明

图1为本发明点样装置的结构示意图。

图2为本发明点样装置的局部放大图。

图3为常规点样的效果图。

图4为采用本发明点样装置点样效果示意图。

具体实施方式

本专利以白芍提取液为例，进行薄层色谱分析时，通过制备薄层的点样对本发明做进一步说明。

实施例1

白芍提取液采用现有技术的方法获得。

1)薄层板的制备

称取粘合剂羧甲基纤维素钠(cmc-na)5g于烧杯中，加入蒸馏水1l，在电炉上加热搅拌约30min至完全溶解，冷却，配成0.5％cmc水溶液，备用。称取40g硅胶与70ml的0.5％cmc水溶液，混合均匀，不断搅拌，静置，再搅拌直至所有硅胶完全润湿，最后用超声波处理约4-5min，充分排出溶液中的气泡。使用牛角匙把调制好的硅胶倒在一片20cm×20cm的正方形玻板上，用牛角匙涂匀，在桌面轻震至表面平坦光滑。室温干燥后，置于烘箱中，105℃加热30min后，制得薄层板5，放入干燥器中，保存。

2)点样装置的制备

取实验室常用的干燥洁净的100mm长玻璃胶头滴管1，所述的玻璃胶头滴管的出口端直径为约3mm，戴一次性手套取脱脂棉2少许，将脱脂棉揉搓成1cm长细条状后，从胶头滴管下端塞入胶头滴管，下端出口端外留出0.4cm的脱脂棉，呈毛笔状，制得点样装置。

3)点样

取干燥洁净的标尺放于距薄层板下端1.5cm处，与薄层板下缘平行，使用铅笔沿标尺轻轻画一条点样线。将点样装置脱脂棉一端浸没样品，缓慢松开胶头同时使脱脂棉一端始终在样品液面下端，吸取适量样品，然后使用点样装置匀速沿点样线连续点板。

4)样品展开

以二氯甲烷和甲醇配制展开剂，按体积比，二氯甲烷:甲醇＝5:1，将点样后的薄层板放在层析缸中展开，取出，晾干，置紫外灯(254nm)下检视。

结果如图3所示，按照常规方法使用毛细管点样3后，经展开剂展开后，在紫外灯检视到两个呈波浪状的条带4。如图4所示，使用本发明所制备的点样装置点样6，经展开剂展开后，能够在紫外灯检视到两个几乎平行的条带7。由图3和图4显而易见，对于难分离的样品，使用常规毛细管点样后观察到的多个化合物的条带出现交叉，难以达到样品完全分离以及分析制备的目的，另外使用毛细管点样时很容易划破薄层板，从而影响分离效果。而采用本发明制备的点样装置末端是材质柔软的脱脂棉，点样时能防止划破薄层板，并能使样品达到最大限度的分离并可后续用于样品的分析和制备。

5)样品富集

用铅笔轻轻沿两个展开带边界划出展开带的轮廓，并用刮刀将两个展开带分别刮下，置于两个100ml烧杯中。在烧杯中加入适量甲醇超声，充分溶解刮下的展开带上的组分样品，再分别将两个烧杯中的溶液在装有滤纸的漏斗中过滤，取滤液置旋转蒸发仪中减压浓缩蒸干，得到粉末样品。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种用于制备薄层色谱的薄层点样方法。属于薄层色谱分析及制备技术领域。本发明方法主要包括以下步骤：薄层板的制备、点样装置的制备、点样、样品展开和样品富集。本发明方法具有设备简单、易操作、快捷、方便、成本低、样品展开后分离效果好的优点。

技术研发人员：刘玉峰;孙珊珊;朱丽君;胡延喜;徐亮;桑育黎;卢晓丹
受保护的技术使用者：辽宁大学
技术研发日：2017.05.12
技术公布日：2017.08.22