IGFBP-7作为先兆子痫中的标志物的制作方法

高血压病症代表妊娠的最常见的医学并发症，影响大约6％至8％的妊娠(ReportoftheNationalHighBloodPressureEducationProgramWorkingGrouponHighBloodPressureinPregnancy.AmJObstetGynecol.2000;183(1):S1-S22)。妊娠并发症一方面与孕妇的妊娠相关死亡率有关，另一方面也与新生儿的增加的发病率和死亡率有关。在39岁年龄以上的孕妇中，以每10万活产中14.5的比率的母亲死亡率是甚至更频繁的。除了高血压病症，出血、血栓性肺栓塞、感染、心肌病以及心血管和非心血管状况可引起并发症和增加的死亡率(Berg2010,ObstetricsandGynecology:116:1302-1309)。妊娠的高血压病症可以分类为：1)先兆子痫，2)慢性高血压(任何原因的)，3)具有并发先兆子痫的慢性高血压，和4)妊娠高血压(ACOGTaskForceonHypertensioninPregnancy.ObstetGyne-col2013;122:1122-31)。临床管理一般包括先兆子痫和慢性高血压情况下的血压控制、严重高血压或具有子痫发作(eclampticfit)的严重高血压情况下的癫痫发作预防、具有并发先兆子痫的慢性高血压情况下的提早分娩-34周对37周、和妊娠高血压情况下的加强产后监测(NICE(2011)NICEclinicalguideline107:HypertensioninPregnancy)。先兆子痫是妊娠期间最重要的高血压病症，其与母亲和胎儿/新生儿的死亡率和发病率相关。(Duley2009,SeminPerinatol:33:130-37)。先兆子痫通常被定义为妊娠相关或诱发的高血压。它的特征是高血压和蛋白尿。细节也可以在标准的医学教科书和各种临床学会的指南中找到，例如：BrownMA,:Theclassificationanddiagnosisofthehypertensivedisordersofpregnancy:statementfromtheInternationalSocietyfortheStudyofHypertensioninPregnancy(ISSHP).Hy-pertensPregnancy2001,20:IX-XIV或ACOGPracticeBulletin,ClinicalManagementGuidelinesforObstetrician-Gynecologists,no.:33,January2002或DGGG.Sl-Leitlinie:DiagnostikundTherapiehypertensiverSchwangerschaftserkrankungenderDeutschenGesellschaftfürGynäkologieundGeburtshilfe,AWMFonline,AWMFRegisterNummer015/018,KlasseSI或NICE(2011)NICEclinicalguideline107:HypertensioninPregnancy)。目前，除了分娩之外，对于先兆子痫没有疗法。先兆子痫的严重性可以从轻度到危及生命。轻度形式的先兆子痫可以用卧床休息和频繁监测来治疗。对于中度至严重病例，建议住院治疗，并开具血压药物或抗惊厥药物以预防癫痫发作。如果该状况对母亲或婴儿变得危及生命，则终止妊娠并使婴儿早产分娩。除先兆子痫外，存在其它的先兆子痫相关的不良后果如HELLP综合征和子痫。HELLP综合征是一种危及生命的产科并发症，并牵涉溶血性贫血、升高的肝功能检查(LFTs)和低血小板计数。HELLP通常在妊娠晚期期间开始。这种综合征的意外、突然和暴发过程是必不可少的。子痫通常被定义为在具有先兆子痫体征或症状的女性中在妊娠期间癫痫大发作活动和/或不明原因的昏迷的新发。来自子痫的死亡率从发达国家中的约1％到发展中国家中的高达15％变化(GhulmiyyahL,SibaiBM.MaternalMortalityfromPreeclampsia/Eclampsia.SeminPerinatol2012;36:56-59.)。根据目前的指南，先兆子痫的诊断是基于孕妇中妊娠20周后高血压和蛋白尿的新发。在具有先前正常血压的女性中，在妊娠20周后间隔至少4小时两次收缩压大于或等于140mmHg或舒张压大于或等于90mmHg的血压被考虑为高血压。在妊娠期间具有新发高血压的女性中，显著的蛋白尿的可靠检测是最重要的，因为它区分具有先兆子痫的那些妊娠和具有妊娠高血压的那些，并且这为未来的监测和管理做准备。显著的蛋白尿在国际上被定义为24小时期间内多于300mg蛋白的尿排泄，并且这包括在先兆子痫的定义中(NICE(2011)NICEclinicalguideline107:HypertensioninPregnancy)。蛋白尿的确定可以通过24小时尿收集、蛋白/肌酸酐比计算或试纸(dipstick)读数来实现。(ExecutiveSummary:HypertensioninPregnancy,AmericanCollegeofObstetriciansandGynecologist,ObstetGynecol2013;122:1122-31)。蛋白尿的确定通常用尿蛋白试纸进行，因为该方法允许快速测量蛋白尿。然而，它通常充满了不正确的结果，并且因此是确定肾功能障碍的一种非常不准确的方法。此外，由于定性确定的可变性，不鼓励该方法用于诊断用途，并且只有在其它定量方法不可得时才应使用该方法(ACOGTaskForce，2013)。尤其是在具有高血压问题的女性中，存在高比率的不正确的尿试纸结果。值得关注的是，发现多达66％的具有阴性尿试纸的高血压女性具有显著的蛋白尿。"(NorthR.Classificationanddiagnosisofpreeclampsia.InPreeclampsia:EtiologyandClinicalPractice,250-251页)。确定尿中蛋白的更准确方法是24小时尿测量(对于先兆子痫的诊断，通常大于或等于300毫克/24小时尿收集)或计算蛋白-肌酸酐比(通常大于或等于0.3，各自以mg/dl测量)。然而，这些方法也具有某些缺点。例如，它们更耗时，并且在某些条件下也易错。Bouzari等人发现，具有先兆子痫的患者中的蛋白尿(通过24小时尿测量确定)与妊娠中的不良后果相关。然而，它不是先兆子痫中不良后果的充分预测因子(BouzariZ,JavadiankutenaiM,DarziA,BaratS.:ClinExpObstetGynecol.2014;41(2):163-8)。最近，已经建议几种血管生成和抗血管生成蛋白作为用于先兆子痫的诊断或预后因子。已知的诊断或预后方法包括确定可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)、内皮糖蛋白或胎盘生长因子(PlGF)，以及确定这些因子之间的比(WO2004/008946,Young2010,J.Matern,FetalNeonatalMed23(5):20366-370;Hagmann2012,ClinicalChemistry58(5):1-9)。另外，sFlt-1/PlGF或内皮糖蛋白/PlGF的比可用于在特定时间窗内排除先兆子痫的发作(WO2014/001244)。然而，孕妇中妊娠20周后蛋白尿的确定仍然是用于先兆子痫的标准诊断因子。因此，将高度需要一种可靠、灵敏和定量的生物标志物来指示妊娠期间的肾功能障碍(NICE(2015)PlGF-basedtestingtohelpdiagnosesuspectedpre-eclampsia.Diagnosticassessmentprogramme)。IGFBP-7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)是已知由内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌的30kDa模块化糖蛋白(Ono,Y.等人,BiochemBiophysResComm202(1994)1490-1496)。WO2008/089994公开了IGFBP-7在评估心力衰竭中的用途。尿IGFBP-7联合TIMP-2(以Nephrocheck®销售)已显示为心脏手术后早期预测急性肾损伤(AKI)和预测肾脏恢复的灵敏和特异的生物标志物(Meersch等人，PLoSOne.2014Mar27;9(3))。EP2666872A1公开了用于肾损伤和肾衰竭的诊断和预后的各种标志物，包括标志物IGFBP-7。IGFBP-7也被描述为用于癌症的生物标志物，并且建议使用抗IGFBP-7抗体作为用于检测肿瘤疾病的诊断工具，所述肿瘤疾病包括肿瘤血管生成(WO2010/043037)。关于目前应用的确定具有疑似先兆子痫的女性中的蛋白尿的方法的缺点，强烈需要开发新方法来指示具有疑似先兆子痫的女性和一般孕妇中的蛋白尿，以筛查先兆子痫。因此，需要一种可靠且灵敏的生物标志物来指示妊娠中的先兆子痫或与先兆子痫相关的状况(例如蛋白尿)。可以将本发明所基于的技术问题视为提供用于服从上述需求的手段和方法。所述技术问题通过权利要求书和下文中表征的实施方式解决。令人惊讶的是，在本发明研究的背景下发现，测量来自妊娠对象的样品中IGFBP-7的量允许先兆子痫或先兆子痫相关状况(例如子痫、HELLP综合征或蛋白尿)的快速和可靠诊断。例如，具有疑似先兆子痫的女性中蛋白尿的鉴定比利用目前使用的方法如试纸蛋白测试更准确。因此，本发明涉及用于诊断对象中的先兆子痫或先兆子痫相关状况的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测量来自对象的样品中IGFBP-7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)的量，和(b)将测量的生物标志物的量与参考比较。在本发明的一个实施方式中，通过执行诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况的进一步的步骤(c)来诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况。所述诊断应基于步骤(b)中执行的比较的结果。优选地，本发明的方法是体外方法。此外，它可包括除了上面明确提到的那些之外的步骤。例如，进一步的步骤可涉及样品预处理或通过该方法获得的结果的评估。本发明的方法还可用于对象的监测、确认和子分类。该方法可手动执行或通过自动化辅助。优选地，步骤(a)、(b)和/或(c)可全部或部分地通过自动化辅助，例如，对于步骤(a)中的确定或者步骤(b)中计算机实现的计算通过合适的机械和传感设备。如本文所用的术语“诊断”意味着评估根据本发明方法提及的对象是否患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。如本领域技术人员将理解的，这种评估通常不意图对于待鉴定的所有(即100％)对象是正确的。然而，该术语要求可以正确评估统计学显著部分的对象(例如，队列研究中的队列)。本领域技术人员使用各种公知的统计学评估工具，例如确定置信区间、p值确定、学生t检验，Mann-Whitney检验等，可以不再费周折地确定一部分是否是统计学显著的。细节见于DowdyandWearden,StatisticsforResearch,JohnWiley&Sons,NewYork1983。优选的置信区间为至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％。p值优选为0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。更优选地，通过本发明的方法可以适当地评估群体对象的至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。根据本发明，应诊断对象中的先兆子痫或先兆子痫相关状况。先兆子痫或先兆子痫相关状况在本领域中是公知的。在一个实施方式中，先兆子痫相关状况选自子痫、HELLP综合征和蛋白尿。如本文所用的术语“先兆子痫”是指以高血压和蛋白尿为特征的医学状况。先兆子痫发生在妊娠的雌性对象中，并且在该背景下的高血压也被称为妊娠诱导的高血压。优选地，通过140mmHg(收缩压)和/或90mmHg(舒张压)或更高的两次血压测量，鉴定妊娠诱导的高血压存在于对象中，其中所述两次测量间隔至少6小时进行。可以通过在24小时尿样本中300mg蛋白或更多来鉴定存在蛋白尿。此外，蛋白尿可以通过下列鉴定：蛋白试纸分析(如果≥2+)，如果即时尿样中存在≥30mg/dL蛋白，或即时尿(spoturine)中蛋白/肌酸酐比为≥30mg蛋白/mmol肌酸酐。根据本发明的先兆子痫可以是轻度形式或严重形式先兆子痫。术语“轻度先兆子痫”和“严重先兆子痫”在本领域中是公知的。术语“轻度先兆子痫”优选地指，在妊娠20周之前血压正常的女性中2次存在蛋白尿和高血压(特别是血压≥140/90mmHg)，间隔至少6小时，但没有终末器官损害的证据。术语“严重先兆子痫”是指具有下列症状中至少一个的先兆子痫：160mmHg或更高的收缩压或110mmHg或更高的舒张压，2次，间隔至少6小时；24小时收集中多于5g、或间隔至少4小时收集的2个随机尿样本上多于3+的蛋白尿；少尿(特别是24小时内少于400mL尿)；持续性头痛；上腹痛；和/或受损的肝功能和血小板减少症。在本发明的上下文中执行的研究显示，可以可靠地诊断早发性和晚发性先兆子痫。早发性先兆子痫发生在妊娠的约20周至约34周之间。因此，设想在妊娠的约20周至约34周之间获得样品用于诊断早发性先兆子痫。晚发性先兆子痫发生在妊娠的34周后。因此，设想在妊娠的34周后获得样品用于诊断晚发性先兆子痫。先兆子痫可发展为子痫，子痫是一种危及生命的病症，其特征在于出现强直-阵挛性癫痫发作或昏迷状况。与严重先兆子痫相关的症状是在24小时内少于500ml的少尿、脑或视力障碍、肺水肿或紫绀、上腹或右上象限疼痛、受损的肝功能、血小板减少症。术语“HELLP综合征”在本领域中是公知的。HELLP综合征是一种危及生命的产科并发症，其通常被认为是先兆子痫的并发症。HELLP综合征通常发生在妊娠晚期。HELLP综合征与不良后果的高风险相关，所述不良后果如肾衰竭、包膜下肝血肿、复发性先兆子痫、或甚至死亡。“HELLP”是该综合征的三个主要特征的缩写：溶血、升高的肝酶和低血小板计数。因为患者间症状的变化(患者常常没有除一般性腹痛以外的症状)，HELLP综合征可以难以诊断，并且早期诊断是降低发病率的关键。如果不以及时方式治疗，患者可以因肝脏破裂/出血或脑水肿而变得重病或死亡。在具有可能的HELLP综合征的患者中，进行一批血液检查：全血计数，凝血组，肝酶，电解质和肾功能研究。通常，确定纤维蛋白降解产物(FDP)水平，其可以升高。乳酸脱氢酶是溶血的标志物并且升高(>600U/升)。在本发明的一个优选实施方式中，蛋白尿被诊断。术语“蛋白尿”是指其中过量蛋白存在于对象的尿中的状况。优选地，如果在24小时尿收集中尿蛋白的量超过0.3g，则对象患有蛋白尿。还优选地，如果在即时尿样、特别是间隔至少6小时从对象获得的至少两个运动尿(sporturine)样中蛋白量等于或大于30mg/dL，则对象患有蛋白尿。本文提及的“对象”优选是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养动物(例如，牛，绵羊，猫，狗和马)、灵长动物(例如，人和非人灵长动物例如猴)、兔和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。优选地，对象是人对象。在一个实施方式中，根据本发明的对象应是妊娠的。在该实施方式中，对象应为雌性。在一个实施方式中，妊娠对象在妊娠的约20周至约40周之间，特别是在妊娠的约24周至约40周之间。在一个实施方式中，待测对象(例如妊娠对象)患有高血压、患有先兆子痫、子痫、HELLP综合征和/或蛋白尿，或者待测对象可为对先兆子痫或者先兆子痫相关状况的风险人员。在一个实施方式中，待测对象患有高血压。在这种背景下，高血压定义为在两次独立测量下140mmHg(收缩压)和/或90mmHg(舒张压)或更高的血压，其中所述两次测量间隔至少6小时进行。在一个实施方式中，高血压是新发高血压。因此，设想妊娠对象在妊娠前不应患有高血压。在一个实施方式中，妊娠对象中的先兆子痫的诊断，例如，有先兆子痫风险或怀疑患有先兆子痫，是基于IGFBP-7和血压二者的测量。新发高血压以及增加量的IGFBP-7的新发二者的存在指示先兆子痫。根据更新的ACOG指南，先兆子痫也被定义为高血压的新发和肾功能不全的新发(ACOGTaskForceonHypertensioninPregnancy.ObstetGynecol2013;122:1122-31)。在一个实施方式中，待测对象应怀疑患有先兆子痫或患有先兆子痫相关状况。特别地，对象应怀疑患有先兆子痫。如果妊娠期间存在单独的高血压或蛋白尿，则怀疑对象患有先兆子痫。其它症状包括头痛、视力障碍、右上象限腹部(上腹)疼痛、水肿(手、脸或足的肿胀)和少尿(尿的低排出)-(NICE2015；DiagnosticAssessmentProgrammePlGF-basedtestingtohelpdiagnosesuspectedpre-eclampsia)。在一个实施方式中，怀疑患有先兆子痫的对象患有高血压，如本文其它地方所述。在另一个实施方式中，待测对象可为先兆子痫或先兆子痫相关状况的风险人员。先兆子痫或先兆子痫相关状况的风险人员优选是超过40岁的雌性对象和/或第一次妊娠中的雌性对象，具有先兆子痫家族史(例如，母亲或姐妹中的先兆子痫)的雌性对象，在先前妊娠中具有先兆子痫先前病史的雌性对象，在第一次接触时具有处于或高于35kg/m2的体重指数的雌性对象，或具有多胎妊娠或先前存在的血管疾病如高血压或糖尿病的雌性对象，例如如NICE(NationalInstituteforHealthandCareExcellence,AntenatalCareguidelineCG62,March2008)中所述。此外，设想待测对象未患有其中IGFBP-7是增加的或可为增加的先兆子痫或先兆子痫相关状况以外的状况。例如，设想对象未患有心力衰竭、急性或慢性肾损伤和/或癌症。特别地，对象未患有急性肾损伤。术语“样品”是指体液样品、分离细胞样品、或来自组织或器官的样品。体液样品可通过公知的技术获得，并且包括血液、血浆、血清、尿、淋巴液、痰液、腹水或任何其它身体分泌物或其衍生物的样品。组织或器官样品可通过例如活组织检查从任何组织或器官获得。可通过分离技术例如离心或细胞分选从体液或组织或器官获得分离细胞。例如，细胞、组织或器官样品可从表达或产生生物标志物的那些细胞、组织或器官获得。样品可为冷冻的、新鲜的、固定的(例如福尔马林固定的)、离心的和/或包埋的(例如石蜡包埋的)等。当然，在评估样品中标志物的量之前，细胞样品可以经受各种公知的收集后制备和储存技术(例如，核酸和/或蛋白提取、固定、储存、冷冻、超滤、浓缩、蒸发、离心等)。在一个优选的实施方式中，样品是血液(即全血)、血清或血浆样品。血清是允许血液凝固后获得的全血的液体级分。为了获得血清，通过离心除去凝块并收集上清液。血浆是血液的无细胞流体级分。为了获得血浆样品，将全血收集在抗凝剂处理的管中(例如柠檬酸盐处理的管或EDTA处理的管)。通过离心从样品中除去细胞，并且得到上清液(即血浆样品)。术语“测量”本文提及的生物标志物的量是指生物标志物的量化，例如，使用本文其它地方描述的适当检测方法来确定样品中生物标志物的水平。术语“测量”和“确定”在本文中可互换使用。在一个实施方式中，如下测量生物标志物的量：使样品与特异性地结合生物标志物的试剂接触，从而在试剂和所述生物标志物之间形成复合物，检测形成的复合物的量，并且从而测量所述生物标志物的量。可以使用本领域通常已知的方法检测本文提及的生物标志物。检测的方法通常包括量化样品中生物标志物的量的方法(定量方法)。技术人员通常已知下列方法中的哪种适于生物标志物的定性和/或定量检测。可以针对例如蛋白方便地测定样品，其使用可商购的蛋白质印迹和免疫测定，如ELISA、RIA、基于荧光和发光的免疫测定。检测生物标志物的其它合适方法包括测量对肽或多肽特异的物理或化学性质，例如其精确的分子量或NMR谱。所述方法包括例如生物传感器、与免疫测定偶联的光学装置、生物芯片、分析装置如质谱仪、NMR分析仪或色谱装置。此外，方法包括基于微孔板ELISA的方法、全自动或机械免疫测定(例如可在ElecsysTM分析仪上获得)、CBA(酶促钴结合测定，例如可在Roche-HitachiTM分析仪上获得)和乳胶凝集测定(例如可在Roche-Hitachi™分析仪上获得)。对于本文提及的生物标志物蛋白的检测，使用这种测定形式的宽范围的免疫测定技术是可得的，参见例如美国专利号4,016,043、4,424,279和4,018,653。这些包括非竞争性类型的以及在传统的竞争性结合测定中的单位点和双位点或“夹心”测定。这些测定还包括标记抗体与靶生物标志物的直接结合。夹心测定是最有用的免疫测定之一。采用电化学发光标记的方法是公知的。这些方法利用特殊金属络合物借助氧化实现激发态的能力，它们从该激发态衰变到基态，发出电化学发光。综述参见Richter,M.M.,Chem.Rev.104(2004)3003-3036。在一个实施方式中，待用于测量生物标志物的量的检测抗体(或其抗原结合片段)被钌化或铱化。因此，抗体(或其抗原结合片段)应包含钌标记。在一个实施方式中，所述钌标记是联吡啶-钌(II)络合物。或者抗体(或其抗原结合片段)应包含铱标记。在一个实施方式中，所述铱标记是WO2012/107419中公开的络合物。测量多肽(例如IGFBP-7)的量可优选地包括以下步骤：(a)使多肽与特异性地结合所述多肽的试剂接触，(b)(任选地)除去未结合的试剂，(c)测量结合的结合剂、即步骤(a)中形成的试剂的复合物的量。根据一个优选的实施方式，所述接触、除去和测量的步骤可由分析器单元执行。根据一些实施方式，所述步骤可由所述系统的单个分析器单元执行，或者由彼此可操作地通信的多于一个分析器单元执行。例如，根据一个具体实施方式，本文公开的所述系统可包括用于执行所述接触和除去步骤的第一分析器单元、和通过运输单元(例如，机械臂)可操作地连接到所述第一分析器单元的第二分析器单元，所述第二分析器单元执行所述测量步骤。特异性地结合生物标志物的试剂(本文也称为“结合剂”)可共价或非共价偶联于标记，允许检测和测量结合的试剂。加标记可通过直接或间接方法进行。直接加标记牵涉将标记直接(共价或非共价)偶联到结合剂。间接加标记牵涉二级结合剂与第一结合剂的结合(共价或非共价)。二级结合剂应特异性地结合第一结合剂。所述二级结合剂可与合适的标记偶联和/或是结合二级结合剂的三级结合剂的靶(受体)。合适的二级和更高级结合剂可包括抗体、二级抗体和公知的链霉抗生物素蛋白-生物素系统(VectorLaboratories，Inc.)。结合剂或底物也可用本领域已知的一种或多种标签“标签化”。然后，这样的标签可为用于更高级结合剂的靶。合适的标签包括生物素、地高辛、组氨酸标签、谷胱甘肽-S-转移酶、FLAG、GFP、myc-标签、甲型流感病毒血凝素(HA)、麦芽糖结合蛋白等。在肽或多肽的情况下，标签优选在N-末端和/或C-末端。合适的标记是通过适当的检测方法可检测的任何标记。典型的标记包括金颗粒、乳胶珠、吖啶酯、鲁米诺、钌络合物、铱络合物、酶活性标记、放射性标记、磁性标记(“例如磁珠”，包括顺磁性和超顺磁性标记)和荧光标记。酶活性标记包括例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、荧光素酶及其衍生物。用于检测的合适底物包括二氨基联苯胺(DAB)、3,3'-5,5'-四甲基联苯胺、NBT-BCIP(4-硝基蓝四唑氯化物和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸酯，可作为来自RocheDiagnostics的现成原液)、CDP-Star™(AmershamBiosciences)、ECF™(AmershamBiosciences)。合适的酶-底物组合可产生荧光或化学发光的有色反应产物，其可以根据本领域已知的方法测量(例如使用光敏膜或合适的照相机系统)。至于测量酶促反应，上面给出的标准类似地适用。典型的荧光标记包括荧光蛋白(如GFP及其衍生物)、Cy3、Cy5、德克萨斯红、荧光素和Alexa染料(如Alexa568)。其它荧光标记可得自例如MolecularProbes(俄勒冈州)。还考虑使用量子点作为荧光标记。放射性标记可以通过任何已知和适当的方法检测，例如，光敏膜或磷成像仪。多肽的量也可优选地如下测量：(a)使包含如本文其它地方所述的对于多肽的结合剂的固相支持体与包含肽或多肽的样品接触，和(b)测量与支持体结合的肽或多肽的量。用于制造支持体的材料在本领域中是公知的，并且尤其包括市售柱材料、聚苯乙烯珠、乳胶珠、磁珠、胶体金属颗粒、玻璃和/或硅芯片和表面、硝酸纤维素条、膜、片、duracytes、反应盘的孔和璧、塑料管等。在另一个方面，在测量形成的复合物的量之前，从结合剂和至少一种标志物之间形成的复合物中除去样品。因此，在一个方面，结合剂可固定在固相支持体上。在另一个方面，可以通过施加洗涤溶液从固相支持体上形成的复合物中除去样品。“夹心测定”是最有用和常用的测定之一，包括夹心测定技术的许多变化。简而言之，在典型的测定中，未标记的(捕获)结合剂被固定或可被固定在固相基质上，并使待测样品与捕获结合剂接触。在适当的温育期、持续足以允许形成结合剂-生物标志物复合物的一段时间后，然后添加用能够产生可检测信号的报告分子标记的第二(检测)结合剂并温育，允许时间足以形成结合剂-生物标志物-标记的结合剂的另一复合物。可洗掉任何未反应的物质，并且通过观察由与检测结合剂结合的报道分子产生的信号来确定生物标志物的存在。结果可为通过简单观察可见信号定性的，或可为通过与含有已知量的生物标志物的对照样品比较定量的。典型的夹心测定的温育步骤可以根据需要和适当地变化。这些变化包括例如同时温育，其中共温育两种或更多种结合剂和生物标志物。例如，将待分析样品和标记的结合剂二者同时加入固定的捕获结合剂。首先温育待分析样品和标记的结合剂、然后加入结合固相或能够结合固相的抗体也是可能的。特异性结合剂和生物标志物之间形成的复合物应与样品中存在的生物标志物的量成比例。应当理解，待应用的结合剂的特异性和/或灵敏度限定了能够被特异性地结合的样品中包含的至少一种标志物的比例程度。关于可以如何执行测量的进一步细节也见于本文其它地方。形成的复合物的量应转化为反映样品中确实存在量的生物标志物的量。术语“结合剂”、“特异性结合剂”、“分析物特异性结合剂”、“检测剂”和“特异性地结合生物标志物的试剂”在本文中可互换使用。优选地，它涉及包含特异性地结合相应生物标志物的结合部分的试剂。“结合剂”或“试剂”的实例是核酸探针、核酸引物、DNA分子、RNA分子、适体、抗体、抗体片段、肽、肽核酸(PNA)或化学化合物。优选的试剂是特异性地结合待测量生物标志物的抗体。本文中的术语“抗体”以最广泛的含义使用并且包括各种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的抗原结合活性即可(即其抗原结合片段)。优选地，抗体是多克隆抗体。更优选地，抗体是单克隆抗体。术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指结合反应，其中结合对分子在它们不显著结合其它分子的条件下表现出彼此结合。当提及蛋白或肽作为生物标志物时，术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指结合反应，其中结合剂以至少10-7M的亲和力结合相应的生物标志物。术语“特异性结合”或“特异性地结合”优选是指对其靶分子至少10-8M或甚至更优选至少10-9M的亲和力。术语“特异性”或“特异性地”用于指示样品中存在的其它分子不显著结合对靶分子特异的结合剂。根据本发明，应测量胰岛素样生长因子结合蛋白7(=IGFBP-7)的量。优选地，测量IGFBP-7多肽的量。IGFBP-7是已知由内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌的30-kDa模块化糖蛋白(Ono,Y.等人，BiochemBiophysResComm202(1994)1490-1496)。优选地，术语“IGFBP-7”指人IGFBP-7。该蛋白的序列在本领域中是公知的，并且例如，可经由Uni-Prot(Q16270,IBP7_HUMAN)或经由GenBank(NP_001240764.1)访问。生物标志物IGFBP-7的详细定义例如在WO2008/089994中提供，其全部内容通过引用并入本文。有两个IGFBP-7同种型，同种型1和2，它们通过可变剪接产生。在本发明的一个实施方式中，测量两个同种型的总量(对于序列，参见UniProt数据库条目(Q16270-1和Q16270-2)。在一个实施方式中，本发明的方法基于检测包含人IGFBP-7和非人或嵌合IGFBP-7特异性结合剂的蛋白复合物。在这样的实施方式中，本发明读取了用于诊断妊娠的人对象中的先兆子痫或先兆子痫相关状况的方法，所述方法包括以下步骤：(a)将来自所述对象的样品与非人IGFBP-7特异性结合剂温育，(b)测量在(a)中形成的IGFBP-7特异性结合剂和IGFBP-7之间的复合物，和(c)将测量的复合物量与参考量比较。处于或高于参考量的复合物的量指示先兆子痫或先兆子痫相关状况。如本文所用的术语“量”包括本文提及的生物标志物的绝对量、所述生物标志物的相对量或浓度以及与其相关或可由其衍生的任何值或参数。这些值或参数包括通过直接测量从所述肽获得的、来自所有特定物理或化学性质的强度信号值，例如质谱或NMR谱中的强度值。此外，包括通过本说明书中其它地方指定的间接测量获得的所有值或参数，例如，响应于从特异性地结合的配体获得的肽或强度信号从生物读出系统测量的响应量。应当理解，也可以通过所有标准数学运算获得与上述量或参数相关的值。如本文所用的术语“比较”是指将来自对象的样品中生物标志物的量与本说明书中其它地方指定的生物标志物的参考量比较。应当理解，如本文所用的比较通常指相应参数或值的比较，例如，将绝对量与绝对参考量比较，同时将浓度与参考浓度比较，或将从样品中的生物标志物获得的强度信号与从参考样品获得的相同类型的强度信号比较。比较可手动执行或可为计算机辅助的。因此，比较可由计算装置执行。来自对象的样品中的生物标志物的测量或检测的量的值和参考量可以例如被彼此比较，并且所述比较可以由实行用于比较的算法的计算机程序自动执行。执行所述评估的计算机程序将以合适的输出格式提供所需的评估。对于计算机辅助的比较，可通过计算机程序将测量的量的值与对应于存储在数据库中的合适参考的值比较。计算机程序可进一步评估比较的结果，即以合适的输出格式自动提供所需的评估。对于计算机辅助的比较，可通过计算机程序将测量的量的值与对应于存储在数据库中的合适参考的值比较。计算机程序可进一步评估比较的结果，即以合适的输出格式自动提供所需的评估。根据本发明，应将生物标志物IGFBP-7的量与参考比较。参考优选是参考量。如本文所用的术语“参考量”是指这样的量，其允许将对象分配到(i)患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象组、或(ii)未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象组中。可连同(即同时或随后)测试样品从待分析参考样品确定合适的参考量。原则上，通过应用标准的统计学方法，基于用于给定生物标志物的平均值或均值，可以对上文指定的对象队列计算参考量。特别地，诸如旨在诊断事件与否的方法的测试的准确性通过其接收器操作特性(ROC)最佳地描述(特别参见Zweig1993,Clin.Chem.39:561-577)。ROC图是在观察的整个数据范围内连续改变决策阈值而产生的所有灵敏度比特异性对的图。诊断方法的临床性能取决于其准确性，即其正确地将对象分配到某一预后或诊断的能力。ROC图通过对适于进行区分的整个阈值范围绘制灵敏度比1-特异性来指示两个分布之间的重叠。在y轴上是灵敏度或真阳性分数，其被定义为真阳性测试结果的数量与真阳性的数量和假阴性测试结果的数量的乘积之比。这也被称为存在疾病或状况中的阳性。它仅由受影响的亚组计算。在x轴上是假阳性分数或1-特异性，其定义为假阳性结果的数量与真阴性的数量和假阳性结果的数量的乘积之比。它是特异性的指标，并且完全由未受影响的亚组计算。因为真和假阳性分数是完全分开计算的，通过使用来自两个不同亚组的测试结果，ROC图独立于队列中事件的普遍性(prevalence)。ROC图上的每个点代表对应于特定决策阈值的灵敏度/1-特异性对。具有完美区分的测试(在两个结果分布中没有重叠)具有穿过左上角的ROC图，其中真阳性分数为1.0或100％(完全灵敏度)，以及假阳性分数是0(完全特异性)。对于没有区分的测试的理论图(对于两组的结果的相同分布)是从左下角到右上角的45°对角线。大多数图介于这两个极端之间。如果ROC图完全低于45°对角线，这通过将用于“阳性”的标准从“大于”反转为“小于”而容易地纠正，或反之亦然。定性地，图越接近左上角，测试的整体准确性越高。取决于期望的置信区间，可以从ROC曲线导出阈值，允许分别以灵敏度和特异性的适当平衡对给定事件进行诊断。因此，优选地通过如上所述为所述队列建立ROC并从中导出阈值量，可以产生待用于本发明的上述方法的参考，即允许在妊娠对象队列中区分患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象、或未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的那些对象的阈值。取决于对诊断方法所需的灵敏度和特异性，ROC图允许导出合适的阈值。应当理解，期望最佳灵敏度用于排除患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象(即排除)，而对于待评估为患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象设想最佳特异性(即纳入)。在某些实施方式中，本文中的术语“参考量”是指预定值。所述预定值应允许区分患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象和未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象。优选地，处于或高于参考量的测试对象样品中IGFBP-7的量指示对象患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。还优选地，低于参考量的样品中IGFBP-7的量指示对象未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。在一个实施方式中，参考量来自已知未患有待诊断疾病或状况(即先兆子痫或先兆子痫相关状况)的妊娠对象或一组妊娠对象。优选地，参考量来自妊娠对象或妊娠对象组，其与待测对象处于妊娠的同一阶段(例如，三个月、月或周)。如果i)参考量来自已知未患有待诊断疾病或状况的妊娠对象或一组妊娠对象，则与参考量相比减少的对象样品中生物标志物IGFBP-7的量指示未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象。如果ii)参考量来自已知未患有待诊断疾病或状况的妊娠对象或其组，则与参考量相同或与参考量相比增加的对象样品中生物标志物IGFBP-7的量指示患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象。在一个实施方式中，参考量在约70至110ng/ml的范围内，尤其是在80至90ng/ml内。例如，参考量是约85ng/ml的量。在本发明方法的一个实施方式中，所述方法还包括根据比较结果推荐和/或启动至少一种合适的支持措施的步骤。优选地，如果对象患有先兆子痫或先兆子痫相关状况，则推荐或启动所述至少一种合适的支持措施。本文应用的术语“推荐”意味着建立对可应用于对象的合适支持措施的提议。合适的支持措施是指可以应用于患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象，以便治愈、避免或处理所述健康状况的所有措施。例如，患者管理措施包括监测的程度(例如，密切、定期或弱监测)、住院或走动维持、应用或抑制药物治疗、或生活方式推荐。特别地，所述至少一种合适的支持措施选自：密切监测、允许进入重症监护室、施用皮质类固醇、允许硫酸镁和施用降血压剂。如上文所公开，诊断可以基于步骤b)中执行的比较步骤。然而，还预期另外确定用于诊断的其它生物标志物(furtherbiomarkers)的量。在本发明的一个实施方式中，该方法包括测量来自对象的样品中至少一种其它生物标志物的量，所述其它生物标志物选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)。在一个实施方式中，进行所述至少一种其它生物标志物的量的测量，用于诊断先兆子痫。如本文所用的术语“sFlt-1”是指多肽，其是fms样酪氨酸激酶1的可溶形式。该多肽在本领域中也称为可溶性VEGF受体1(sVEGFR1)(参见，例如，Sunderji2010,AmJObstetGynecol202:40el-7)。在人脐静脉内皮细胞的条件培养基中鉴定出sFlt-1。内源性sFlt-1受体在色谱上和免疫学上与重组人sFlt-1相似，并以类似的(comparable)高亲和力结合[125I]VEGF。显示人sFlt-1在体外与KDR/Flk-1的细胞外结构域形成VEGF稳定的复合物。优选地，sFlt-1是指如Kendall1996,BiochemBiophysResCommun226(2):324-328中所述的人sFlt-1；对于氨基酸序列，也参见例如GenBank登录号P17948，GI：125361(对于人)和BAA24499.1，GI：2809071(对于小鼠sFlt-1)。内皮糖蛋白是位于细胞表面上的I型膜糖蛋白，并且是TGF(转化生长因子)β受体复合物的一部分。它是具有未还原约180kDa、还原后约95kDa、和以其还原和N-去糖基化形式约66kDa的分子量的多肽。优选地，术语“内皮糖蛋白”是指可溶性内皮糖蛋白。该多肽能够形成二聚体并与TGF-β和TGF-β受体结合。优选地，内皮糖蛋白是指人内皮糖蛋白。更优选地，人内皮糖蛋白具有如GenBank登录号AAC63386.1，GI：3201489中所示的氨基酸序列。已经描述了两个内皮糖蛋白同种型，S-内皮糖蛋白和L-内皮糖蛋白。L-内皮糖蛋白由总共633个氨基酸组成，具有47个氨基酸的胞质尾，而S-内皮糖蛋白由600个氨基酸组成，具有14个氨基酸的胞质尾。如本文所用的术语“PlGF(胎盘生长因子)”优选是指胎盘衍生的生长因子，其是具有149个氨基酸长度并且与人血管内皮生长因子(VEGF)的血小板衍生生长因子样区域高度同源的多肽。与VEGF类似，PlGF在体外和体内具有血管生成活性。例如，衍生自转染的COS-1细胞的PlGF的生物化学和功能特征揭示，它是糖基化的二聚体分泌蛋白，其能够在体外刺激内皮细胞生长(Maqlione1993,Oncogene8(4):925-31)。优选地，PlGF是指人PlGF，更优选是指具有如GenBank登录号P49763，GI：17380553中所示氨基酸序列的人PlGF。可以在与IGFBP-7的量相同的样品中或在不同的样品中测量一种或多种其它生物标志物的量。特别地，在相同的样品或其等分试样中测量该量。优选地，测量选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)的两种其它生物标志物的量。更优选地，测量生物标志物内皮糖蛋白和PlGF的量。更优选地，测量生物标志物sFlt-1和PlGF的量。如果测量如上所述的两种其它生物标志物的量，则本发明的方法可包括计算两种生物标志物的量的比的进一步步骤。例如，可以计算(i)生物标志物sFlt-1和PlGF或(ii)生物标志物内皮糖蛋白和PlGF的量的比。在进一步的步骤中，将计算的比与参考比比较。先兆子痫或先兆子痫相关状况的诊断优选地基于计算的比与参考比的比较结果、以及基于IGFBP-7的量与参考量的比较。本文提及的术语“计算比”涉及通过除以所述量或通过执行任何其它类似的(comparable)数学计算来计算sFlt-1或内皮糖蛋白的量与PlGF的量的比，所述数学计算使sFlt-1或内皮糖蛋白的量对于PlGF的量建立关联。优选地，将sFlt-1或内皮糖蛋白的量除以PlGF的量以便计算比(因此，计算sFlt-1或内皮糖蛋白的量与PlGF的量的比)。还优选地，将PlGF的量除以sFlt-1或内皮糖蛋白的量以便计算比(因此，计算PlGF的量与sFlt-1或内皮糖蛋白的量的比)。参考比应允许区分患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象和未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象。在一个实施方式中，如上文所述针对参考量确定参考比。在一个实施方式中，计算sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比。因此，参考比应为sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的参考比。优选地，处于或高于参考量的IGFBP-7的量联合处于或高于参考比的sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比指示，对象患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。还优选地，低于参考量的IGFBP-7的量联合低于参考比的sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比指示，对象未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。一个实施方式涉及用于诊断妊娠对象中的先兆子痫的方法，所述方法包括以下步骤：(a)测量来自对象的样品中IGFBP-7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)的量，(b)测量(i)生物标志物sFlt-1和PlGF、或(ii)生物标志物内皮糖蛋白和PlGF中的至少一个的比，(c)血压，和(d)将(a)中测量的生物标志物的量、(b)中测量的比和(c)中测量的血压与参考比较。本文上面给出的定义和解释变通适用于(applymutatismutandisto)以下方法，用于评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性，以及变通适用于以下方法，用于监测先兆子痫或先兆子痫相关状况。在一个实施方式中，根据本发明的方法涉及在患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象中评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性，所述方法包括以下步骤：(a)测量来自对象的样品中生物标志物IGFBP-7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)的量，和(b)将测量的生物标志物的量与参考比较。在本发明的上述方法的一个实施方式中，通过执行c)评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性的进一步步骤，评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性。所述评估应基于步骤b)中执行的比较的结果。优选地，该方法是体外方法。如本文所用的表述“评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性”优选是指区分轻度形式和严重形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。还优选地，该术语涉及先兆子痫或先兆子痫相关状况的分期。通常，来自对象的样品中IGFBP-7的量越增加，待评估疾病或状况越严重。本领域技术人员已知先兆子痫或先兆子痫相关状况的轻度形式和严重形式。另外，表述“轻度形式的先兆子痫”和“严重形式的先兆子痫”在上文中与诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况的方法有关地进行定义。该定义相应地适用。术语“对象”已在上面定义。该定义相应地适用。然而，在上述方法的背景下，设想对象患有先兆子痫或先兆子痫相关状况。例如，先兆子痫的严重性应在患有先兆子痫的对象(例如妊娠对象)中评估或蛋白尿的严重性应在患有蛋白尿的对象中评估。在前述方法的一个优选实施方式中，评估患有先兆子痫的妊娠对象中蛋白尿的严重性。在另一个优选的实施方式中，评估怀疑患有先兆子痫的妊娠对象中蛋白尿的严重性。要应用的参考优选地是参考量。在前述方法的一个优选实施方式中，参考量是预定值。所述预定值应允许区分轻度和严重形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。优选地，高于参考量的来自对象的样品中的IGFBP-7的量指示，对象患有严重形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。还优选地，低于参考量的来自对象的样品中的IGFBP-7的量指示，对象未患有严重形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。因此，对象患有轻度形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性的方法可进一步包括，测量来自对象的样品中选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)的至少一种生物标志物的量(如上所述，用于诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况的方法)。在一个实施方式中，测量生物标志物sFlt-1和PlGF的量。在一个可选的实施方式中，测量生物标志物内皮糖蛋白和PlGF的量。此外，设想计算(i)生物标志物sFlt-1和PlGF或(ii)生物标志物内皮糖蛋白和PlGF的量的比(如上所述)。在进一步的步骤中，将如此计算的比与参考比比较。先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性的评估优选基于计算的比与参考比的比较的结果、以及基于IGFBP-7的量与参考量的比较。参考比应允许区分严重形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况和轻度形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。在一个实施方式中，参考比如上文所述确定。在一个实施方式中，计算sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比。因此，参考比应为sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的参考比。优选地，高于参考量的IGFBP-7的量联合高于参考比的sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比指示，对象患有严重的先兆子痫或先兆子痫相关状况。还优选地，低于参考量的IGFBP-7的量联合低于参考比的sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比指示，对象患有轻度形式的先兆子痫或先兆子痫相关状况。本发明进一步涉及用于监测患有先兆子痫或与先兆子痫相关状况的对象中的先兆子痫或与先兆子痫相关状况的方法，包括以下步骤：(a)测量来自对象的第一样品中生物标志物IGFBP-7的量，(b)测量来自对象的第二样品中生物标志物IGFBP-7的量，和(c)比较第二样品中生物标志物的量与第一样品中生物标志物的量。优选地，监测先兆子痫或先兆子痫相关状况是基于比较步骤c)的结果。优选地，前述方法是体外方法。如本文所用，术语“监测”是指评估对象(例如妊娠对象)中的先兆子痫或先兆子痫或先兆子痫相关状况的过程。在前述方法的一个实施方式中，监测患有先兆子痫的妊娠对象中的蛋白尿。在另一个实施方式中，监测怀疑患有先兆子痫的妊娠对象中的蛋白尿。术语“样品”已在上面定义。该定义相应地适用。可以在先兆子痫或先兆子痫相关状况发作后的任何时间获得在上述方法的背景中提及的第一样品。第二样品应在第一样品后获得。优选地，第二样品不在第一样品之后太早获得(为了观察足够显著的变化以允许监测)。因此，第二样品优选在第一样品后1至30天内、更优选2至14天内、并且最优选2至7天内获得。此外，预期第二样品在第一样品后至少一天获得。如结合前述方法使用的术语“比较”包括比较第二样品中生物标志物IGFBP-7的量与第一样品中所述生物标志物的量。优选地，与所述第一样品中的量相比，所述第二样品中IGFBP-7的量的增加、并且更优选地统计学上显著的增加指示，先兆子痫或先兆子痫相关状况的恶化。因此，在获得第一和第二样品之间的时期内，先兆子痫或先兆子痫相关状况已经恶化。优选地，与所述第一样品相比，所述第二样品中IGFBP-7的量的减少指示，先兆子痫或先兆子痫相关状况的改善。因此，在获得第一和第二样品之间的时期内，先兆子痫或先兆子痫相关状况已经改善。特别地，显著增加(或减少)是大小的增加(或减少)，其被认为是显著的，特别是统计上显著的。术语“显著的”和“统计上显著的”是本领域技术人员已知的。本领域技术人员使用各种公知的统计学评估工具，可以不再费周折地确定增加(或减少)是否是统计学显著的。优选地，统计学上显著的增加(或减少)是至少5％的增加(或减少)。与所述第一样品相比，所述第二样品中未改变的量、特别是基本上未改变的量优选地指示，所述先兆子痫或先兆子痫相关状况的状态没有变化。监测先兆子痫或先兆子痫相关状况的方法可进一步包括测量来自对象的第一和第二样品中来自对象的样品中至少一种生物标志物的量，所述生物标志物选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)。此外，设想对第一和第二样品计算(i)生物标志物sFlt-1和PlGF或(ii)生物标志物内皮糖蛋白和PlGF的量的比。在进一步的步骤中，将对于第二样品如此计算的比与对于第一样品计算的比比较。监测先兆子痫或先兆子痫相关状况优选基于第二和第一样品中计算的比的比较的结果和IGFBP-7的量。在一个实施方式中，对第一和第二样品计算sFlt-1与PlGF、或内皮糖蛋白与PlGF的比。优选地，与第一样品中的量相比增加的第二样品中IGFBP-7的量联合与第一样品中的比相比增加的第二样品中sFlt-1与PlGF的比指示，先兆子痫或先兆子痫相关状况的恶化。还优选地，与第一样品中的量相比降低的第二样品中IGFBP-7的量联合与第一样品中的比相比降低的第二样品中sFlt-1与PlGF的比指示，先兆子痫或先兆子痫相关状况的改善。上文给出的定义和解释变通适用于以下：而且，本发明涉及：i)生物标志物IGFBP-7，和任选地选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)的至少一种其它生物标志物，或ii)特异性地结合IGFBP-7的试剂，和任选地选自特异性地结合sFlt-1的试剂、特异性地结合内皮糖蛋白的试剂和特异性地结合PlGF的试剂的至少一种其它试剂，在来自对象的样品中用于诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况的用途。此外，本发明涉及：i)生物标志物IGFBP-7，和任选地选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)的至少一种其它生物标志物，或ii)特异性地结合IGFBP-7的试剂，和任选地选自特异性地结合sFlt-1的试剂、特异性地结合内皮糖蛋白的试剂和特异性地结合PlGF的试剂的至少一种其它试剂，在来自对象的样品中用于评估先兆子痫或先兆子痫相关状况的严重性的用途。此外，本发明涉及：i)生物标志物IGFBP-7，和任选地选自sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)、内皮糖蛋白和PlGF(胎盘生长因子)的至少一种其它生物标志物，或ii)特异性地结合IGFBP-7的试剂，和任选地选自特异性地结合sFlt-1的试剂、特异性地结合内皮糖蛋白的试剂和特异性地结合PlGF的试剂的至少一种其它试剂，在来自对象的第一和第二样品中用于监测先兆子痫或先兆子痫相关状况的用途。在前述三种用途的一个实施方式中，应用：i)生物标志物IGFBP-7、sFlt-1和PlGF，或ii)特异性地结合IGFBP-7的试剂、特异性地结合sFlt-1的试剂、以及特异性地结合PlGF的试剂。上述用途优选为体外用途。上文定义了“特异性地结合生物标志物的试剂”。该定义相应地适用。在一个实施方式中，所述试剂是抗体或其抗原结合片段，其特异性地结合各自的生物标志物。本发明还涉及适于执行本发明方法的试剂盒，其包含特异性地结合IGFBP-7的试剂和任选地用于执行所述方法的说明书。试剂盒可进一步包含选自特异性地结合sFlt-1的试剂、特异性地结合内皮糖蛋白的试剂和特异性地结合PlGF的试剂的至少一种其它试剂。在一个实施方式中，试剂盒还包含特异性地结合sFlt-1的试剂和特异性地结合PlGF的试剂。在一个可选的实施方式中，试剂盒还包含特异性地结合内皮糖蛋白的试剂和特异性地结合PlGF的试剂。如本文所用的术语“试剂盒”是指优选地单独提供或在单个容器内提供的上述组分的集合。容器还包括用于执行本发明方法的说明书。这些说明书可为手册的形式或者可由计算机程序代码提供，该计算机程序代码能够执行本发明的方法中提及的计算和比较，并且当在计算机或数据处理装置上实现时相应地建立诊断。计算机程序代码可提供在数据存储介质或装置例如光学存储介质(例如，光盘)上，或者直接提供在计算机或数据处理装置上。此外，试剂盒可优选地包含用于生物标志物IGFBP-7的标准量用于校准目的。此外，本发明涉及优选地通过执行本发明的方法适于诊断对象是否患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的装置，包括：a)分析单元，其包含特异性地结合IGFBP-7的至少一种试剂，所述单元适于测量对象的样品中IGFBP-7的量；和b)评估单元，其包含存储的参考和数据处理器，所述数据处理器已经实现了用于比较由(a)的分析单元测量的IGFBP-7的量与存储的参考的算法，由此诊断先兆子痫或先兆子痫相关状况。本发明的方法可以通过上述装置实现。如本文应用的装置应至少包括上述单元。装置的单元可操作地彼此连接。如何以操作方式链接单元将取决于装置中包含的单元的类型。例如，在分析单元中应用用于自动定量测量IGFBP-7的工具的情况下，由所述自动操作单元获得的数据可以由评估单元处理，例如，由在作为数据处理器的计算机上运行的计算机程序处理，以便促进诊断。在一个实施方式中，数据处理器实行生物标志物的量与参考的比较。优选地，在这种情况下，单元由单个装置构成。然而，分析单元和评估单元也可为物理上分离的。在这种情况下，可以经由允许数据传输的单元之间的有线和无线连接来实现操作连接(operativelinkage)。无线连接可使用无线LAN(WLAN)或互联网。有线连接可通过单元之间的光学和非光学电缆连接实现。用于有线连接的电缆优选地适于高通量数据传输。用于确定IGFBP-7的优选的分析单元包括试剂，例如本文其它地方指定的特异性地识别IGFBP-7的抗体(或其抗原结合片段)，以及用于使所述检测试剂与待测样品接触的区域。试剂可固定在用于接触的区域上，或者可在样品已装载后应用到所述区域。分析单元应优选地适于定量测量试剂和IGFBP-7的复合物的量。在本发明的装置的一个优选实施方式中，所述存储的参考是预定值(如本文其它地方所述)。优选地，高于参考量的生物标志物IGFBP-7的量指示患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象。在本发明的装置的另一个优选实施方式中，所述储存的参考是来自已知未患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象或对象组的参考量、或来自已知患有先兆子痫或先兆子痫相关状况的对象或对象组的参考量。在一个实施方式中，本发明的装置包含的分析单元还包含特异性地结合sFlt-1(或内皮糖蛋白)的试剂和特异性地结合PlGF的试剂。在该实施方式中，评估单元优选地进一步包括存储的参考比，并且实现算法还应允许比较计算的sFlt-1(或内皮糖蛋白)和PlGF的量的比(如其它地方所述)与参考比。优选地，评估单元还包括用于计算量的比的工具。本说明书中引用的所有参考文献在此通过引用它们的全部公开内容和本文说明书中具体提及的公开内容而并入。附图显示：图1：按不同的试纸测量划分的针对IGFBP-7的箱线图。IGFBP-7血清水平随着通过孕妇中蛋白试纸结果检测的尿中蛋白的增加量而增加。图2：具有蛋白[mg]/24h尿对IGFBP-7[ng/ml]的所有患者的散点图。具有蛋白尿的孕妇中IGFBP-7血清水平增加超过阈值，所述蛋白尿定义为24小时时期中多于300毫克蛋白的尿排泄(蛋白[mg]/24尿)，其由图2中垂直虚线所示。使用85ng/mL的阈值。图3：按对照组、PE(先兆子痫)组和严重PE组划分的针对IGFBP-7[ng/ml]的箱线图。与不具有先兆子痫/严重先兆子痫/子宫内生长受限(IUGR)的对照女性相比，具有诊断的先兆子痫和严重先兆子痫的孕妇中IGFBP-7血清水平增加。在严重先兆子痫(严重PE)的情况下，血清IGFBP-7的均值比在具有先兆子痫(PE)的女性中更增加。因此，IGFBP-7血清水平反映了根据AmericanCollegeofObstetriciansandGynecologists:DiagnosisandManagementofPreeclampsiaandEclampsia.ACOGPracticeBulletinNo.33.ObstetGynecol2002;99:159-67定义的先兆子痫的严重性。图4：对于对照组和PE和严重PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7的ROC曲线。在用于区分没有先兆子痫/HELLP综合征的孕妇(对照，n=100)和具有诊断的先兆子痫的孕妇的血清IGFBP-7的ROC曲线中，AUC为91.9％。先兆子痫组(n=50)包括PE和严重PE病例。根据妊娠20周后高血压和蛋白尿的新发，在此定义先兆子痫。图5：对于对照组和PE和严重PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7的ROC曲线。图6：对于对照组和PE和严重PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7之和的ROC曲线。图7：对于对照组和早期PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7的ROC曲线。图8：对于早期PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7之和的ROC曲线。图9：对于晚期PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7的ROC曲线。图10：对于晚期PE病例针对sFlt-1/PlGF比和IGFBP-7之和的ROC曲线。实施例本发明将仅通过以下实施例说明。然而，所述实施例不应以限制本发明范围的方式解释。实施例1：用于血清或血浆中IGFBP-7的全自动定量的免疫测定的开发已开发出ElecsysIGFBP-7免疫测定，用于在cobas®平台(RocheDiagnostics)上全自动定量血清或血浆中的分析物IGFBP-7。图1显示，IGFBP-7血清水平随着通过孕妇中蛋白试纸结果检测的尿中蛋白的增加量而增加。具有蛋白尿的孕妇中IGFBP-7血清水平增加(见图2)超过阈值，所述蛋白尿定义为24小时时期中多于300毫克蛋白的尿排泄(蛋白[mg]/24尿)，其由图2中垂直虚线所示。因此，建议约85ng/mL的阈值用于高灵敏度。与不具有先兆子痫/严重先兆子痫/子宫内生长受限(IUGR)的对照女性相比，具有诊断的先兆子痫和严重先兆子痫的孕妇中IGFBP-7血清水平增加。在严重先兆子痫(严重PE)的情况下，血清IGFBP-7的均值比在具有先兆子痫(PE)的女性中更增加。因此，IGFBP-7血清水平似乎反映了根据AmericanCollegeofObstetriciansandGynecologists:DiagnosisandManagementofPreeclampsiaandEclampsia.ACOGPracticeBulletinNo.33.ObstetGynecol2002;99:159-67定义的先兆子痫的严重性。图3显示了按对照组、PE组和严重PE组划分的针对IGFBP-7[ng/ml]的箱线图。图4中显示了具有诊断的先兆子痫/子痫比对照的IGFBP-7的ROC分析。在用于区分没有先兆子痫/HELLP综合征的孕妇(对照，n=100)和具有诊断的先兆子痫的孕妇的针对血清IGFBP-7的ROC曲线中，AUC为91.9％。先兆子痫组(n=50)包括PE和严重PE病例(参见图4和表1)。根据妊娠20周后高血压和蛋白尿的新发，在此定义先兆子痫。表1：针对ROC曲线的汇总表。分组PE和严重PE。病例N_病例对照N_对照AUCAUC_CI灵敏度@90特异性@90Ca.50Contr.10091.9%[86.4%,97.4%]0.0%100.0%实施例2：诊断为先兆子痫的患者中针对IGFBP-7和sFlt-1/PlGF比的ROC曲线的计算先兆子痫比对照的IGFBP-7和sFlt-1/PlGF的ROC分析显示在图5至10和表2至7中。IGFBP-7和sFlt-1/PlGF的组合允许先兆子痫/子痫/HELLP综合征的更特异性诊断。1.对于PE和严重PE病例的ROC结果单独地IGFBP-7和sFlt-1/PlGF的分析显示在图5和表2中。表2：针对ROC曲线的汇总表。严重PE和PE病例。变量阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CIIGFBP-7_ng_mL101.872.0%[57.5%,83.8%]95.0%[88.7%,98.4%]IGFBP-7_ng_mL78.494.0%[83.5%,98.7%]26.0%[17.7%,35.7%]sFlt_1_PlGF_比56.896.0%[86.3%,99.5%]95.9%[89.9%,98.9%]sFlt_1_PlGF_比75.094.0%[83.5%,98.7%]99.0%[94.4%,100.0%]IGFBP-7和sFlt-1/PlGF之和的分析显示在图6和表3中。表3：针对ROC曲线的汇总表。严重PE和PE病例。阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CI149.096.0%[86.3%,99.5%]95.9%[89.9%,98.9%]167.794.0%[83.5%,98.7%]99.0%[94.4%,100.0%]2.对于早期PE病例的ROC结果单独地IGFBP-7和sFlt-1/PlGF的分析显示在图7和表4中。表4：针对ROC曲线的汇总表。早期PE病例变量阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CIIGFBP-7_ng_mL77.6100.0%[83.9%,100.0%]9.1%[1.1%,29.2%]IGFBP-7_ng_mL162.74.8%[0.1%,23.8%]100.0%[84.6%,100.0%]sFlt_1_PlGF_比52.3100.0%[83.9%,100.0%]9.1%[1.1%,29.2%]sFlt_1_PlGF_比1335.14.8%[0.1%,23.8%]100.0%[84.6%,100.0%]IGFBP-7和sFlt-1/PlGF之和的分析显示在图8和表5中。表5：针对ROC曲线的汇总表。早期的PE病例阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CI146.8100.0%[83.9%,100.0%]9.1%[1.1%,29.2%]1445.84.8%[0.1%,23.8%]100.0%[84.6%,100.0%]3.对于晚期PE病例的ROC结果单独地IGFBP-7和sFlt-1/PlGF的分析显示在图9和表6中。表6：针对ROC曲线的汇总表。晚期PE病例变量阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CIIGFBP-7_ng_mL90.390.9%[70.8%,98.9%]9.5%[1.2%,30.4%]IGFBP-7_ng_mL148.54.5%[0.1%,22.8%]81.0%[58.1%,94.6%]sFlt_1_PlGF_比142.240.9%[20.7%,63.6%]9.5%[1.2%,30.4%]sFlt_1_PlGF_比636.64.5%[0.1%,22.8%]66.7%[43.0%,85.4%]IGFBP-7和sFlt-1/PlGF之和的分析显示在图10和表7中。表7：针对ROC曲线(总和)的汇总表。晚期PE病例阈值灵敏度灵敏度_CI特异性特异性_CI262.440.9%[20.7%,63.6%]9.5%[1.2%,30.4%]739.54.5%[0.1%,22.8%]66.7%[43.0%,85.4%]当前第1页1 2 3