本发明属于检测血液透析液中枸橼酸根含量高效液相色谱法领域，尤其涉及一种检测血液透析液中枸橼酸根含量高效液相色谱法。
背景技术：
柠檬酸是一种重要的有机酸，又名枸橼酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸，结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。
用于食品工业；因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。在所有有机酸的市场中，柠檬酸市场占有率70％以上，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。一分子结晶水柠檬酸主要用作清凉饮料、果汁、果酱、水果糖和罐头等的酸性调味剂，也可用作食用油的抗氧化剂。
用于化工和纺织业：柠檬酸在化学技术上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂；用作络合剂，掩蔽剂；用以配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性；使污垢和灰分散和悬浮；提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂。
用于化妆品：柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，常用于乳液、乳霜、洗发精、美白用品、抗老化用品、青春痘用品等。角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解等。
用于杀菌：柠檬酸与80℃温度联合作用具有良好杀灭细菌芽孢的作用，并可有效杀灭血液透析机管路中污染的细菌芽孢。享有“西餐之王”美誉的柠檬具有很强的杀菌作用，对食品卫生很有好处，再加上柠檬的清香气味，人们历来喜欢用其制作凉菜，不仅美味爽口，也能增进食欲。
用于医药：在凝血酶原激活物的形成及以后的凝血过程中，必须有钙离子参加。枸橼酸根离子与钙离子能形成一种难于解离的可溶性络合物，因而降低了血中钙离子浓度，使血液凝固受阻。该品在输血或化验室血样抗凝时，用作体外抗凝药。
技术实现要素：
为了解决上述技术问题，本发明提供一种检测血液透析液中枸橼酸根含量高效液相色谱法，包括使用磺酸基阴离子交换树脂为填充剂，使用浓度为0.025mol/l硫酸水溶液作为流动相，在色谱条件为r＞1.5，n＞3000，t为0.7～1.3的高效液相色谱仪中检测枸橼酸根含量，检测枸橼酸根含量方法为：
s1：枸橼酸钠标准曲线绘制：精密称取枸橼酸钠对照品200mg于100ml容量瓶中，以透析用水稀释定容，分别精密量取上述枸橼酸钠标准品储备液1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml,置10ml容量瓶中，加透析用水定容，制成0.200mg/ml、0.300mg/ml、0.400mg/ml、0.500mg/ml和0.600mg/ml的标准工作液，在上述色谱条件下，在液相色谱中分别注入20μl，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制回归曲线y＝ax+b，r2≥0.9995；
s2：供试液的制备与测定：精密量取6.2.5法制备的供试液，并按适当的稀释倍数用透析用水稀释后作为待测液，以0.45μm膜过滤，取20μl待测液注入液相色谱仪测定，平行进样两次，rsd＜2％，计算峰面积的平均值，按下述枸橼酸根含量公式计算：
优选的，所述枸橼酸根含量公式中ax为供试品中枸橼酸根的峰面积，m为样品稀释倍数。
优选的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的柱温设置为30℃。
优选的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的波长为210nm。
优选的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的流速设置为1ml/min。
优选的，所述枸橼酸钠包含2分子结晶水。
本发明的有益效果为：本发明操作方法简便，利用高效液相色谱法达到了定性定量测定的要求，重现性好，准确性高，有利于血液透析液中对枸橼酸根的含量控制。
具体实施方式
以下对本发明做进一步描述：
实施例：
一种检测血液透析液中枸橼酸根含量高效液相色谱法，包括使用磺酸基阴离子交换树脂为填充剂，使用浓度为0.025mol/l硫酸水溶液作为流动相，在色谱条件为r＞1.5，n＞3000，t为0.7～1.3的高效液相色谱仪中检测枸橼酸根含量，检测枸橼酸根含量方法为：
s1：枸橼酸钠标准曲线绘制：精密称取枸橼酸钠对照品200mg于100ml容量瓶中，以透析用水稀释定容，分别精密量取上述枸橼酸钠标准品储备液1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml,置10ml容量瓶中，加透析用水定容，制成0.200mg/ml、0.300mg/ml、0.400mg/ml、0.500mg/ml和0.600mg/ml的标准工作液，在上述色谱条件下，在液相色谱中分别注入20μl，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制回归曲线y＝ax+b，r2≥0.9995；
s2：供试液的制备与测定：精密量取6.2.5法制备的供试液，并按适当的稀释倍数用透析用水稀释后作为待测液，以0.45μm膜过滤，取20μl待测液注入液相色谱仪测定，平行进样两次，rsd＜2％，计算峰面积的平均值，按下述枸橼酸根含量公式计算：
具体的，所述枸橼酸根含量公式中ax为供试品中枸橼酸根的峰面积，m为样品稀释倍数。
具体的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的柱温设置为30℃。
具体的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的波长为210nm。
具体的，所述检测枸橼酸根时的高效液相色谱仪的流速设置为1ml/min。
具体的，所述枸橼酸钠包含2分子结晶水。
实施例1
选取磺酸基阴离子交换树脂为填充剂，使用浓度为0.025mol/l硫酸水溶液作为流动相；
s1：精密称取枸橼酸钠对照品200mg于100ml容量瓶中，以透析用水稀释定容，分别精密量取上述枸橼酸钠标准品储备液1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml,置10ml容量瓶中，加透析用水定容，制成0.200mg/ml、0.300mg/ml、0.400mg/ml、0.500mg/ml和0.600mg/ml的标准工作液，在色谱条件为r＞1.5，n＞3000，t为0.7～1.3情况下，在液相色谱中分别注入20μl，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制回归曲线y＝ax+b，r2≥0.9995；
s2：供试液的制备与测定：精密量取6.2.5法制备的供试液，并按适当的稀释倍数用透析用水稀释后作为待测液，以0.45μm膜过滤，取20μl待测液注入液相色谱仪测定，平行进样两次，rsd＜2％，计算峰面积的平均值，按下述枸橼酸根含量公式计算：
需要说明的是，在本文中，而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。