在线衍生测定化妆品中甲醛的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种在线衍生-液相色谱法测定化妆品中甲醛的测定方法。
【背景技术】
[0002] 甲醛俗称福尔马林，是无色、具有强烈气味的刺激性气体，其35%~40%的水溶 液通称福尔马林。甲醛被世界卫生组织确认为致癌和致畸物质，在我国有毒化学品控制名 单上高居第二。2011年1月，欧盟非食品消费类产品快速预警系统通报了我国输欧化妆品 中的游离甲醛含量超标问题。对照欧盟的化妆品指令76/768/EEC中的限量，被通报的三批 护发素中游离甲醛含量超过了限量值的8倍之多，将遭到退货乃至销毁处理。2011年11月， 美国安全化妆品运动联盟宣布，部分强生婴儿洗发水含有可致癌的二恶烷及释放出微量甲 醛的季铵盐-15,并号召消费者抵制强生婴儿洗发水，直至这些产品不再含有害化学物质。 化妆品中甲醛超标问题越来越引起消费者的关注。
[0003] 化妆品中含有甲醛以及可释放甲醛的杀菌防腐剂，甲醛缓释剂通常被添加至化妆 品中，通过缓慢释放甲醛或衍生物达到杀菌防腐目的。我国《化妆品卫生规范》（2007版） 规定甲醛为限用物质，口腔卫生产品< 0. 1%，其他产品< 0. 2% (均以游离甲醛计），指甲 硬化剂<5%，同时禁止用于喷雾产品。当成品中甲醛质量分数超过0.05% (以游离甲醛 计）时，必须在产品标签上标印"含甲醛"。化妆品中使用率较高的甲醛缓释剂类防腐剂主 要有：2_溴-2-硝基-1，3-丙二醇、双（羟甲基）咪唑烷基脲、咪唑烷基脲、DMDM乙内酰脲、 季铵盐-15、乌洛托品、多聚甲醛等，多达十几种，《化妆品卫生规范》（2007版）规定其限量 为0. 1%~0.6%不等。
[0004] 国外某研宄组分析了瑞典的润肤霜，结果显示10%的样品中含有甲醛（0.02%~ 0.09% )，这些产品虽没有直接加入甲醛，但大多含有可释放甲醛的防腐剂。国内市场上有 许多除臭或抑汗类化妆品含有高达20%~40%浓度的乌洛托品，可能对消费者的健康构 成威胁。文献报道甲醛引起过敏或皮炎所需的阈浓度很低，分别为30 μ g/L(0. 003%)和 250 yg/L(0. 0025% )〇
[0005] 欧盟化妆品化学分析方法工作组在开发甲醛缓释剂类防腐剂的分析方法时发现， 这些物质在溶于水和其它极性溶剂时很快释放出甲醛。甲醛供体释放甲醛量的多少和甲醛 释放体所处的物理化学环境有关，随PH值、温度和时间的增加而增加。化妆品中甲醛的测 定方法主要有比色法、柱前衍生-色谱法、柱后衍生法和核磁共振法。化妆品中甲醛检测的 难点是，在样品前处理过程中，甲醛缓释剂大量分解导致甲醛检测结果偏高。比色法能测定 甲醛总量，在衍生化过程中甲醛缓释剂分解，检测甲醛为游离甲醛、复合甲醛和聚合甲醛总 量。柱后衍生法能测定游离甲醛，液相色谱将游离甲醛和甲醛缓释剂分开，柱后衍生避免了 甲醛缓释剂的干扰，但是在样品提取和净化过程，甲醛缓释剂在溶于水或其它极性溶剂时 会释放出甲醛。柱前衍生-色谱法，采用衍生反应-萃取阻断法，能有效抑制甲醛缓释剂 分解释放甲醛，但是人工操作耗时，重现性不佳。核磁共振法作为一种纯物理方法，虽不会 影响游离甲醛和甲醛缓释剂之间的平衡，但核磁共振仪器昂贵，方法难以推广。
【发明内容】
[0006] 为了解决上述的化妆品中甲醛的测定方法中存在的技术缺陷，本发明的目的是提 供一种在线衍生-液相色谱法测定化妆品中甲醛的方法，该方法采用乙腈提取样品中甲 醛，2,4_二硝基苯肼的乙腈-乙酸（4 :l，v/v)溶液为衍生液，在线自动衍生，液相色谱法测 定。
[0007] 为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：
[0008] 在线衍生测定化妆品中甲醛的方法，该方法包括以下的步骤：
[0009] 1)提取
[0010] 称取试样〇. 2g，精确至0. 001g，置于IOmL具塞刻度离心管中，加入适量乙腈，涡旋 溶解；用乙腈定容至10mL，盖上塞后祸旋混勾lmin，以不低于3000r/min的速率离心3min ; 过微孔滤膜，滤液2h内供HPLC测定；
[0011] 2)甲醛标准工作溶液的制备
[0012] 移取适量的甲醛标准储备溶液，置于IOmL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，盖上塞 后涡旋混匀，供HPLC测定；上述的甲醛标准储备溶液的浓度为100mg/L ;
[0013] 3)测定
[0014] 根据样液中甲醛浓度的情况选定峰面积相近的标准工作溶液系列，标准工作溶液 和样液中甲醛衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，标准工作溶液和样液等体积 参插进样测定，用保留时间定性，外标法定量；液相色谱条件为：
[0015] a)色谱柱：C18柱，150_X4. 6mm内径，5 μπι，或相当者；
[0016] b)流动相：乙腈-水，体积比为65 :35 ;
[0017] c)流速：L OmT ,/mi η ；
[0018] d)检测波长：355nm ;
[0019] e)自动衍生程序：吸取衍生液10 μ L，样品溶液5 μ L，衍生液10 μ L，充分混合， 反应2min，进样；上述的衍生液为2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液与乙酸构成的混合溶液，2， 4-二硝基苯肼的浓度为2g/L，衍生液中乙腈：乙酸的体积比为4 :1 ;
[0020] 4)空白试验
[0021] 除不加试样外，按上述1)和3)操作步骤进行；
[0022] 5)结果计算和表述
[0023] 按以下公式计算试样中甲醛的残留量或采用色谱数据处理系统计算，计算结果需 扣除空白值：
【主权项】
1.在线衍生测定化妆品中甲醛的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤： 1) 提取 称取试样〇.2g，精确至O.OOlg，置于IOmL具塞刻度离心管中，加入适量乙腈，涡旋溶 解；用乙腈定容至10mL，盖上塞后祸旋混勾lmin，以不低于3000r/min的速率离心3min ;过 微孔滤膜，滤液2h内供HPLC测定； 2) 甲醛标准工作溶液的制备 移取适量的甲醛标准储备溶液，置于IOmL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，盖上塞后涡 旋混匀，供HPLC测定；上述的甲醛标准储备溶液的浓度为100mg/L ; 3) 测定 根据样液中甲醛浓度的情况选定峰面积相近的标准工作溶液系列，标准工作溶液和样 液中甲醛衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，标准工作溶液和样液等体积参插 进样测定，用保留时间定性，外标法定量；液相色谱条件为： a) 色谱柱：C18柱，150mmX4. 6mm内径，5 μπι，或相当者； b) 流动相：乙腈-水，体积比为65 :35 ; c) 流速：1. OmL/min ; d) 检测波长：355nm ; e) 自动衍生程序：吸取衍生液10 μ L，样品溶液5 μ L，衍生液10 μ L，充分混合，反应 2min，进样；上述的衍生液为2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液与乙酸构成的混合溶液，2,4-二 硝基苯肼的浓度为2g/L，衍生液中乙腈：乙酸的体积比为4 :1 ; 4) 空白试验 除不加试样外，按上述1)和3)操作步骤进行； 5) 结果计算和表述 按以下公式计算试样中甲醛的残留量或采用色谱数据处理系统计算，计算结果需扣除 空白值： " AxcxV X -- As X m 式中： X--试样中甲醛的残留量，单位为μ g/g ; A一一样液中甲醛衍生物的峰面积； c一一标准溶液中甲醛衍生物的浓度，单位为mg/L ; V 样液最终定容体积，单位为mL ; As一一标准溶液中甲醛衍生物的峰面积； m一一试样溶液所代表的试样质量，单位为g。
【专利摘要】本发明涉及一种在线衍生-液相色谱法测定化妆品中甲醛的测定方法，步骤如下：1)提取：称取试样，置于具塞刻度离心管中，加入适量乙腈，涡旋溶解；用乙腈定容，盖上塞后涡旋混匀；过微孔滤膜，滤液2h内供HPLC测定；2)甲醛标准工作溶液的制备；3)测定：根据样液中甲醛浓度的情况选定峰面积相近的标准工作溶液系列，标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，用保留时间定性，外标法定量；4)空白试验：除不加试样外，按上述1)和3)操作步骤进行；5)结果计算和表述：按公式计算试样中甲醛的残留量或采用色谱数据处理系统计算，计算结果需扣除空白值。本发明简化了样品制备步骤，提高了检测效率，快速、简便、重现性高。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104634889
【申请号】CN201410754274
【发明人】吕春华, 侯建波, 黄超群, 谢文, 陈笑梅
【申请人】浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2014年12月10日