一种测定有机羧酸绝对含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种测定有机羧酸绝对含量的方法，特别涉及一种通过液相色谱测定 硝酸氧化醇酮反应产物中有机羧酸绝对含量的方法。
【背景技术】
[0002] 有机羧酸是重要的化工原料，在化工、染料、食品及医药等领域有着广泛的用途。 有机羧酸的分析在生产、生活许多领域的实际应用中非常重要。目前国内对有机羧酸绝对 含量分析通常采用分光光度法、气相色谱法、离子色谱法、采用碱性标准溶液进行酸碱滴定 等方法。其中气相色谱法（GC)测定有机酸时，常因酸的沸点较高、不易气化而需要先对其 衍生再进行测定，方法比较繁琐；离子色谱法（HPIC)是近来应用较多的测定植物体内有机 酸的方法，可以同时测定溶液中的有机酸根离子和无机阴离子，但大量无机阴离子的存在 通常增加了低含量有机酸的检测难度；滴定法虽然操作简单，但存在较大误差，且不能对同 一样品中的多种羧酸分别进行准确测定。目前国内还没有一种专门针对含有多种有机羧酸 的样品通过液相色谱一次进样即可快速准确地同时得到其各自含量的检测方法。因此建立 一种快速、准确、方便和经济的检测方法，有利于提高有机羧酸产品质量和降低生产成本。
[0003] 中国专利CN201210292901. 3公开了一种分光光度法测定水溶液中有机酸含量 的方法。中国专利CN201110028098. 8公开了 一种硫酸铜快速定量分析发酵液提取物中 长链二元酸含量的方法，该方法通过样品处理后利用比色法检测上清液吸光值，根据长链 二元酸含量与吸光值成线性关系计算出发酵液提取物中长链二元酸含量，只能对长链二 元酸总含量进行分析，不能确定各种组分的各自含量。中国专利CN201110070282.9公 开了 一种气相色谱法对空气中己二酸含量的测定方法。中国专利CN201210283199. 4公 开了一种气相色谱内标法测定丙酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯和丙酸含量的方法。中国专利 CN201210037343. 6公开了一种醋酸铜氨液中乙酸含量的测定方法及测定装置，该方法以酚 酞为指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定以此计算乙酸含量。这些方法针对有机羧酸总量或 单一有机羧酸进行分析，样品处理繁琐。
[0004] 中国专利CN200810018215. 0公开了一种液相色谱测定顺酐生产过程中离心废水 的有机酸及酯的方法。该方法是以水、甲醇、乙酸乙酯按一定的比例混合作为流动相，针对 顺酐生产过程中离心废水的有机酸及酯的测定方法。中国专利CN201010581633. 8公开了 一种检测尿液中戊二酸含量的方法，进行液相-质谱分析确定尿液中戊二酸含量。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种测定有机羧酸绝对含量的方法，克服有机羧酸在其他仪 器中响应值不高导致检出偏差较大的缺陷，通过适合的样品配置方法和最佳液相色谱条件 而提供一种用外标法同时定量分析多种有机羧酸绝对含量的方法。
[0006] 本发明所述的测定有机羧酸绝对含量的方法，包括以下步骤：
[0007] ( 1)标准样品溶液的配制
[0008] 分别准确称取一定质量的冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸和硝酸，用去离子 水溶解于100mL容量瓶中，摇匀作为标准溶液1，再用同样方法分别准确称取另一不同质量 的各物质配成不同浓度的标准溶液2和标准溶液3,标准溶液中上述各种物质浓度范围为 0·05 ~20mg/ml。
[0009] (2)标准工作曲线绘制
[0010] 该方法以安捷伦液相色谱柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4. 6*250mm，5 μ m，适用于有 机酸的分析）为分析柱，水、甲醇作为色谱柱冲洗的流动相，pH为2. 5的磷酸水溶液作为样 品测试时的流动相，流速I. 2mL/min，柱温40°C，紫外检测器检测波长210nm，进样量5 μ L， 运行时间25min，外标法定量对上述所配制的标准溶液进行液相色谱分析，测得各峰的峰面 积，用峰面积为纵坐标，浓度为横坐标分别绘制冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸等的 标准曲线，得到相应各物质浓度与峰面积的线性方程式以及线性相关系数。
[0011] (3)实际样品测定分析
[0012] 将待测样品混合均匀，准确称取1~2g置于100mL容量瓶中，用去离子水溶解并 定容，摇匀后过滤，取1~2ml该溶液置于安捷伦液相色谱分析专用的样品瓶中，摇匀，制成 样品溶液，放置于液相色谱分析自动进样盘中备用；以安捷伦液相色谱柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4. 6*250mm，5 μ m，适用于有机酸的分析）为分析柱，水、甲醇作为色谱柱冲洗的流动 相，pH为2. 5的磷酸水溶液作为样品测试时的流动相，流速I. 2mL/min，柱温40°C，紫外检 测器检测波长210nm，进样量5 μ L，运行时间25min，对制备的样品溶液进行液相色谱分析， 测得各组分的峰面积，根据峰面积直接由上述相应各组分对应的标准曲线上查得或由线性 方程式计算各组分浓度，再通过下面的公式计算各组分含量：
[0013] 计算公式：Wi% = (10Ci/m) %
[0014] 式中：Ci一待测组分的浓度，mg/ml ;
[0015] Wi%-待测组分的含量；
[0016] m-称取的样品质量，g。
[0017] 根据待测样品所含有机羧酸的组成选择不同的有机羧酸进行标准样品溶液的配 置，标准样品溶液为含有冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸有机羧酸中的一种或多种。
[0018] 标准样品溶液配置时加入硝酸，可使固体类有机羧酸溶解于去离子水中后稳定存 在。
[0019] 待测样品为硝酸氧化醇酮反应产物或其它含有有机羧酸的样品，含有冰乙酸、丙 酸、丁二酸、戊二酸、己二酸等有机羧酸中的一种或多种。
[0020] 待测样品若为易溶于水的固体或液体或固体液体混合物，可直接配置成待测样品 水溶液，待测样品若为非易溶于水的样品要进行处理，使待测样品中的羧酸组分溶解于去 离子水中配置成待测样品水溶液。
[0021] 在同一液相色谱分析条件下，仅需进样一次，即能同时得到冰乙酸、丙酸、丁二酸、 戊二酸、己二酸有机羧酸中的一种或多种的绝对含量。
[0022] 采用液相色谱柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4· 6*250_，5μπι，适用于有机酸的分 析）为分析柱，水、甲醇作为色谱柱冲洗的流动相，pH为2. 5的磷酸水溶液作为样品测试时 的流动相，流速I. 2mL/min，柱温40°C，紫外检测器检测波长210nm，