测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法【专利摘要】本发明提供了一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，旨在提供一种检测灵敏度高，重复性好的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法；该方法是量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1：1的甲醇和乙腈其溶解，并体积比1：1的甲醇和乙腈稀释至刻度，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入液相色谱仪进行检测；属于化学检测
技术领域：
。【专利说明】测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法
技术领域：
[0001]本发明提供一种测定黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，具体地说，是一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法;属于化学检测
技术领域：
。【
背景技术：
】[0002]感冒止咳糖浆由黄芩、金银花、葛根等9味药材加工而成，收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第三册，具有解表清热、止咳化痰之功效，用于感冒或流感、头痛鼻塞、肢痛等症。黄芩具有清热燥湿、泻火解毒等作用，用于肺热咳嗽，高热烦咳等证。原标准仅以性状、检查项目评价其质量，而无对黄芩质量进行控制的指标。黄芩主含黄酮类化合物，是黄芩的主要有效成分，黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素均为黄芩中的黄酮类化合物，现在还没有同时控制这三个成分的方法。【
发明内容】[0003]针对上述不足，本发明的目的是提供一种检测灵敏度高，重复性好的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。[0004]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：[0005]-种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，该方法依次包括下述步骤:量取本品lml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，并体积比1:1的甲醇和乙腈稀释至刻度，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入液相色谱仪进行检测；[0006]所述的色谱条件如下：[0007]色谱柱：StableBondSB-苯基柱；[0008]流动相：甲醇A-0.3%甲酸水溶液B;[0009]流动相A为甲醇，流动相B为0.5%甲酸;梯度洗脱程序:0~4min，80%A、20%B;4~14min，85%~15%A、15%~85%B;14~2111^11，50%厶、50%8;在50%厶、50%8下平衡311^11。[0010]流速0.7mL/min;[0011]波长：275nm，278nm;[0012]柱温：30°C。[0013]进样量:5μ1。[0014]进一步的，上述的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，所述的高效液相色谱仪为安捷伦Agilent-1200。[0015]进一步的，上述的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，所述的色谱柱规格:250mmX4.6mm，5μηι。[0016]与现有技术相比，本发明提供的技术方案建立了高效液相色谱同时测定感冒止咳糖浆中黄芩三个成分黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，检测灵敏度高，重复性好，可作为感冒止咳糖浆中黄芩的质量控制指标。【具体实施方式】[0017]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。[0018]本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。[0019]实施例1[0020]-种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，该方法依次包括下述步骤:量取本品lml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，并体积比1:1的甲醇和乙腈稀释至刻度，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入安捷伦Agilent-1200进行检测；[0021]所述的色谱条件如下：[0022]色谱柱StableBondSB-苯基柱(250mmX4.6mm，5ym);[0023]流动相：甲醇A-0.3%甲酸水溶液B;[0024]流动相A为甲醇，流动相B为0.5%甲酸;梯度洗脱程序:0~4min，80%A、20%B;4~14min，85%~15%A、15%~85%B;14~2111^11，50%厶、50%8;在50%厶、50%8下平衡311^11。[0025]流速0.7mL/min;[0026]波长：275nm，278nm;[0027]柱温：30°C。[0028]进样量:5μ1;[0029]为了验证本法明提供的技术方案，按照同法制备缺黄芩的的阴性对照品，按照上述方法制备对照品溶液，在同样的谱条件进样检测。结果阴性供试品在黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素峰位置无吸收峰，表明处方中的其他成分对黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量测定无阴性干扰。[0030]将同一份对照品溶液重复进样6次，按峰面积计算黄芩苷的RSD为0.97%，黄芩素的RSD为0.75%，汉黄芩素的RSD为0.89%，结果表明：仪器精密度良好。[0031]精密称取黄芩苷对照品15.4lmg置10ml容量瓶中，黄芩素12.12mg、汉黄芩素16.40mg分别置100ml容量瓶中，均加加体积比1:1的甲醇和乙腈使溶解并稀释至刻度，混匀即得，作为对照品储备液。并用移液管精密量取上述三样对照品储备液各1ml，加到50ml容量瓶中并加加体积比1:1的甲醇和乙腈制成lml含30.8yg黄芩苷、2.42yg黄芩素和3.28yg汉黄芩素的混和溶液，作为对照品溶液。[0032]按上述色谱条件分别精密吸取上述对照品溶液0.2、1、2、3、5以1注入色谱仪，测定，以峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线，得柚皮苷的回归方程为:Υ=3216·1Χ+4·13(r=0.9996);橙皮苷的回归方程为:Y=2513.6X+3.65(r=0.9997);黄芩苷的回归方程为:￥=2201.9乂-3.2&=0.9998)。结果表明：柚皮苷在33.6~840ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系;橙皮苷在19~476ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系;黄芩苷在24~600ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系[0033]按照上述方法进行测定，按外标法以峰面积计算含量，其结果如下表所示：[0034]样品测定结果(n=3)[0037]从上表中可以看出本发明提供的技术方案检测结果重复性好，为感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法的提供新的方法。【主权项】1.一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，其特征在于，该方法依次包括下述步骤:量取本品lml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，并体积比1:1的甲醇和乙腈稀释至刻度，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入液相色谱仪进行检测；所述的色谱条件如下：色谱柱：StableBondSB-苯基柱；流动相：甲醇A-0.3%甲酸水溶液B;流动相A为甲醇，流动相B为0.5%甲酸；梯度洗脱程序：0~4min，80%A、20%B;4~14min，85%~15%A、15%~85%B;14~2111^11，50%厶、50%8;在50%厶、50%8下平衡311^11。流速〇.7mL/min;波长:275nm，278nm;柱温：30°C。进样量:5μ1。2.根据权利要求1所述的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，其特征在于，所述的高效液相色谱仪为安捷伦Agilent-1200。3.根据权利要求1所述的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，其特征在于，所述的色谱柱规格:250_X4.6mm，5μηι。【文档编号】G01N30/02GK105866282SQ201610259696【公开日】2016年8月17日【申请日】2016年4月25日【发明人】陈学松,林冬杰,李亚,梁慧敏,李澄【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所