液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，旨在提供一种快速有效、重现性好、回收率高的液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法；该方法是取样品粉末1g，置于10mL萃取池中，用乙腈对样品在温度60℃，静态提取5min，重复提取2次，提取完成后将提取液用乙腈定容至20mL，吸取1mL于离心管中，漩涡2min，离心3min，收集上清液，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入色谱仪进行检测；属于化学检测技术领域。
【技术领域】
[0001] 本发明提供一种测定脱水穿心莲内酯的方法，具体地说，是一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 穿心莲片收载于《中国药典》2005年版一部，其检查项为片剂制剂通则中规定的内容。中药口服固体制剂多以药物粉末或提取物为材料，有效成分必须通过崩解及溶出的过程释放，吸收进入血液而起到治疗作用。
[0003] 照高效液相色谱法(2010年版药典一部附录VID)测定方法如下。
[0004] 1、色谱条件与系统适用性试验
[0005] 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一水(60:40)为流动相；检测波长为 254nm。理论板数按脱水穿心莲内酯峰计算应不低于2000。
[0006] 2、对照品溶液的制备
[0007] 取脱水穿心莲内酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.lmg的溶液，即得。
[0008] 3、供试品溶液的制备
[0009] 取本品20片(小片)或10片(大片)，除去包衣，精密称定，研细，取0.5g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理(功率250W，频率33kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 l〇ml (剩余的续滤液备用)，加在中性氧化铝柱(200?300目，5g，内径为1.5cm)上，用甲醇 20ml洗脱，收集洗脱液，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
[0010] 4、测定
[0011] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0012] 本品每片含脱水穿心莲内酯(C20H2804)，小片不得少于4.0mg，大片不得少于 8.0mg
【发明内容】
[0013] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种快速有效、重现性好、回收率高的液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法。
[0014] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下:
[0015] —种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，该方法依次包括下述步骤:取样品粉末lg，置于10mL萃取池中，用乙腈对样品在温度60°C，静态提取5min，重复提取 2次，提取完成后将提取液用乙腈定容至20mL，吸取lmL于离心管中，漩祸2min，离心3min，收集上清液，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入色谱仪进行检测；
[0016] 所述的色谱条件如下:
[0017] 色谱柱:YMC Carotenoid C30;
[0018] 流动相:甲醇A-0.05 %乙酸的乙腈溶液，梯度洗脱；
[0019] 流速 1.0mL/min;
[0020] DAD检测器，检测波长298nm;
[0021] 柱温 25Γ;
[0022] 进样量 10yL;
[0023] 质谱条件:
[〇〇24] 色谱柱流出组分进入质谱仪的流速为lOyL/min，正离子质谱，扫描范围m/z50-1200，气化温度2000 °C，毛细管电压3000V，干燥气体流速2L/min，雾化器压力为3ps i。
[0025] 进一步的，上述的一种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，梯度洗脱程序:〇?lmin，90%A、10%B;l?10.5min，85%?15%A、15%?85%B;10.5?13min， 50%A、50%B;在 50%A、50%B 下平衡 2min。
[0026] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案快速有效、重现性好、回收率高。
【具体实施方式】
[〇〇27]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
[0028] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。
[0029] 实施例1
[0030] —种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，该方法依次包括下述步骤:取样品粉末lg，置于10mL萃取池中，用乙腈对样品在温度60°C，静态提取5min，重复提取 2次，提取完成后将提取液用乙腈定容至20mL，吸取lmL于离心管中，漩祸2min，离心3min，收集上清液，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入色谱仪进行检测；
[0031] 所述的色谱条件如下:
[0032] 色谱柱:YMC Carotenoid C30;
[0033] 流动相:甲醇A-0.05 %乙酸的乙腈溶液，梯度洗脱;梯度洗脱程序:0?lmin，90% 八、10%8;1?10.511^11，85%?15%厶、15%?85%8;10.5?1311^11，50%厶、50%8;在50%八、 50%8下平衡211^11
[0034] 流速 1.0mL/min;
[0035] DAD检测器，检测波长298nm;
[0036] 柱温 25Γ;
[0037] 进样量 10yL;
[0038] 质谱条件:
[〇〇39] 色谱柱流出组分进入质谱仪的流速为lOyL/min，正离子质谱，扫描范围m/z50-1200，气化温度2000 °C，毛细管电压3000V，干燥气体流速2L/min，雾化器压力为3ps i。
[0040]取同一份样品溶液，连续进样6次，计算穿心莲内酯峰面积的RSD = 0.5 %，脱水穿心莲内酯的峰面积RSD = 0.3 %，表明该方法精密度良好
[〇〇411 取供试品溶液，于0，2，4，8，12，24h测定。结果24h内穿心莲内酯的峰面积RSD = 0.69 % (η = 6)，脱水穿心莲内酯的峰面积RSD = 0.28 % (η = 6)，表明本品稳定性良好。
[0042] 取同一批样品粉末5份，按本申请提供的方法测定，测得脱水穿心莲内酯平均含量分别为49.9mg.g—1，RSD分别为 1.38% %。
[0043] 对照品溶液:各取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品适量，加甲醇制成含脱水穿心莲内酯10.2g.mL—1的对照品溶液，即得。
[〇〇44]取上述已知含量的样品粉末约0.042g，精密称定，精密加入脱水穿心莲内酯对照品2mL(1.02mg.m厂同法处理，按上述色谱条件进样，分别于287nm处测定吸收度，脱水穿心莲内酯平均回收率99.98%，RSD1.58%。
【主权项】
1.一种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，其特征在于，该方法依次 包括下述步骤:取样品粉末lg，置于10mL萃取池中，用乙腈对样品在温度60°C，静态提取 5min，重复提取2次，提取完成后将提取液用乙腈定容至20mL，吸取lmL于离心管中，漩涡 2min，离心3min，收集上清液，混匀过0.22微米的滤膜，取滤液注入色谱仪进行检测； 所述的色谱条件如下: 色谱柱:YMC Carotenoid C30; 流动相:甲醇A-0.05 %乙酸的乙腈溶液，梯度洗脱； 流速 1.0mL/min； DAD检测器，检测波长298nm; 柱温25°C; 进样量1〇此； 质谱条件: 色谱柱流出组分进入质谱仪的流速为10yL/min，正离子质谱，扫描范围m/z50-1200,气 化温度2000°C，毛细管电压3000V，干燥气体流速2L/min，雾化器压力为3psi。2.根据权利要求所述的一种液质串联法测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，其特 征在于，梯度洗脱程序:〇?lmin，90%A、10%B;l?10.5min，85%?15%A、15%?85%B; 10.5?1311^11，50%厶、50%8;在50%厶、50%8下平衡211^11。
【文档编号】G01N30/02GK105954395SQ201610259586
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 陈江涛, 梁慧敏, 李亚, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所