Ase-hplc测定罗汉果茶中山奈素含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种ASE?HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，旨在提供一种分析效率高，检测结果重现好的ASE?HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法；其技术方案：取本品，精密称定，研细，取1g置于10mL萃取池中，用70％乙醇对样品进行提取，再以甲醇为提取溶剂提取；提取液减压蒸干，残渣加甲醇14ml使溶解，加10％磷酸溶液5ml，置水浴加热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，吸取1.5mL于装有300mgPSA的2mL离心管中，漩涡2min，15000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法
技术领域
[0001 ]本发明提供一种测定山奈素含量的方法，具体地说，是一种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002]罗汉果茶是由罗汉果提取、加工制成的茶剂。经大量的临床试验证明，罗汉果茶对于治疗急性支气管炎痰热壅肺所致咳嗽、痰多、口干等症有良好效果，根据文献报道，罗汉果中除含葫芦烷类化合物外，还得到了2种黄酮苷；由于黄酮类化合物具有消炎、强心、降压、扩张冠状动脉、降低胆固醇、利尿、止咳祛痰、保肝等作用，故通过测定罗汉果茶中黄酮类化合物的含量，达到控制产品质量的目的，前人已对罗汉果鲜果中槲皮素含量进行了研究。
【发明内容】
[0003]针对上述不足，本发明的目的是提供一种分析效率高，检测结果重现好的ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法。
[0004]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下:
[0005]—种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，依次包括下述步骤:
[0006]I)取本品，精密称定，研细，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇对样品进行提取，所述的提取温度为60°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积65%，再以甲醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次;减压蒸干，残渣加甲醇14ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，吸取1.5mL于装有300mg PSA的2mL离心管中，漩涡2min，15000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析；
[0007]2)高效液相色谱法进行分析时参数设置如下:
[0008]流动相:70%乙醇-水-乙腈，用甲酸调解pH值为4.0;流速:lml/min;柱温:35°C ;
[0009]色谱柱:PhenomenexC18柱；
[0010]检测波长27 Inm;
[0011 ] 所述的流动相中70 %乙醇-水-乙腈的体积比为10:10:80?25:25:50;所述的流动相在O分钟至4分钟时间段内70 %乙醇-水-乙腈的体积比为30:30:40升至35:35:30;然后在4分钟至9分钟时间段内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在40:40:20，再在9-12分钟内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60。
[0012]进一步的，上述的一种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，所述的色谱柱的规格为 5μηι，4.6mm X 250mm。
[0013]与现有技术相比，本发明提供的技术方案用HPLC法测定山奈素含量，来反映黄酮类化合物的含量，并对含量计算方法进行了实验探讨研究。通过ASE快速提取，梯度洗脱检测，该操作方法简单快速，结果显示本法准确，可靠，无干扰，重现性好，可用于罗汉果茶的质量控制。
【具体实施方式】
[0014]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
[0015]本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。
[0016]实施例1
[0017]—种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，依次包括下述步骤:
[0018]取本品，精密称定，研细，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇对样品进行提取，所述的提取温度为60°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积65%，再以甲醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次；减压蒸干，残渣加甲醇14ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，吸取1.5mL于装有300mg PSA的2mL离心管中，漩涡2min，15000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析；
[0019]2)高效液相色谱法进行分析时参数设置如下:
[0020]流动相:70%乙醇-水-乙腈，用甲酸调解pH值为4.0;流速:lml/min;柱温:35°C ;
[0021]色谱柱:PhenomenexC18柱(5ym，4.6mmX250mm);
[0022]检测波长271nm;
[0023]所述的流动相中70 %乙醇-水-乙腈的体积比为10:10:80?25:25:50;所述的流动相在O分钟至4分钟时间段内70 %乙醇-水-乙腈的体积比为30:30:40升至35:35:30;然后在4分钟至9分钟时间段内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在40:40:20，再在9-12分钟内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60。
[0024]取经五氧化二磷减压干燥过夜的山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含I Oyg的溶液，即得对照品溶液。
[0025]分别吸取对照品溶液10μ1、供试品溶液及阴性样品溶液各20μ1，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件记录色谱图，山奈素峰的测定无干扰，山奈素的保留时间为12分钟左右，山奈素峰与相邻近的蜂分离度良好。
【主权项】
1.一种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤: 1)取本品，精密称定，研细，取Ig置于1mL萃取池中，用70%乙醇对样品进行提取，所述的提取温度为60°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积65%，再以甲醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次;减压蒸干，残渣加甲醇14ml使溶解，加10 %磷酸溶液5ml，置水浴加热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，吸取1.5mL于装有300mg PSA的2mL离心管中，漩祸2min，15000r/min离心3min，取上清液进行高效液相分析； 2)高效液相色谱法进行分析时参数设置如下: 流动相:70 %乙醇-水-乙腈，用甲酸调解pH值为4.0;流速:lml/min;柱温:35°C ; 色谱柱:Phenomenex C18柱； 检测波长27 Inm; 所述的流动相中70%乙醇-水-乙腈的体积比为10:10:80?25:25:50;所述的流动相在O分钟至4分钟时间段内70%乙醇-水-乙腈的体积比为30: 30:40升至35:35:30；然后在4分钟至9分钟时间段内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在40:40: 20，再在9-12分钟内70%乙醇-水-乙腈的体积比恒定在20:20:60。2.根据权利要求1所述的一种ASE-HPLC测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，其特征在于，所述的色谱柱的规格为5ym，4.6_X250mm。
【文档编号】G01N30/02GK105954390SQ201610259369
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 陈江涛, 梁慧敏, 李亚, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所