一种简单快速测定滤池出水中aoc含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种测定水中A0C含量的方法。
【背景技术】
[0002] 可生物同化有机碳（assimil油leorganiccarbon,A0C)是指溶解性有机碳中能 被微生物同化成自身菌体的部分，代表了最容易被生物降解的有机碳，作为表征饮用水处 理单元出水的可生化性指标。滤池是最常用的饮用水常规处理单元，可生化性是评价其运 行状况及处理效果的重要指标。因此，测定滤池出水的A0C浓度可W用于评价滤池的处理 效果及运行状况。
[0003]A0C的测定方法最早由VanderKooij提出，即在水样中接种测试菌巧光假单胞菌 P17和螺旋菌N0X，在特定条件下培养3~14天，通过平板计数获得培养的细菌数，利用标 准曲线将测试菌在水样中生长的最大值换算为A0C值。但是Kooij的测定方法操作复杂、 实验周期长（20天）。2005年，Hammes提出全新的A0C测定方法，利用流式细胞仪来测定 微生物生长量，并采用Evian水（一种商业饮用水）作为接种液。该方法相较于传统方法 具有明显的优势，不仅检测时间缩短至3天，而且操作简单。
[0004] 虽然Hammes的方法大大简化了A0C的测定过程，但是滤池出水由于滤池内部生物 作用导致其细菌结构与常规饮用水水体具有明显的不同，采用常规的测定方法难W准确测 定其A0C值，同时长达S天的测定时间难W高效地指导工程实际，因此需要开发一种简单 快速的适于滤池水质条件的A0C测定方法。
【发明内容】
阳0化]本发明的目的是要解决现有测定滤池出水中A0C含量的方法实验周期长和难W准确测定滤后水体中A0C含量的问题，而提供一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方 法。
[0006] 一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方法，是按W下步骤完成的：
[0007] 一、预处理待测水样：使用微孔滤膜过滤待测水样，得到微孔滤膜过滤后的待测水 样；将微孔滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有微孔滤膜过滤后的 待测水样的无菌无碳的样品瓶；
[0008] 二、预处理接种水样：使用玻璃纤维滤膜过滤待测水样，得到玻璃纤维滤膜过滤后 的待测水样；将玻璃纤维滤膜过滤后的待测水样作为同源接种水；
[0009] S、接种：在无菌环境下将步骤二得到的同源接种水接种至步骤一得到的装有微 孔滤膜过滤后的待测水样的无菌无碳的样品瓶中，再使用满旋振荡器满旋振荡15s~30s， 得到待培养水样；
[0010] 步骤=中所述的待培养水样中同源接种水的体积分数为1%~20% ;
[0011] 四、测定起始细菌数：将步骤S得到的待培养水样与SYBRGreenI染料共解化 lOmin~20min，得到解化后的待培养水样；再利用流式细胞仪测定解化后的待培养水样中 的起始细菌数Ti;
[0012] 步骤四中所述的待培养水样与SYBRGreenI染料的体积比为100:1 ;
[0013] 五、培养：将解化后的待培养水样置于溫度为25°C~35°C的生化培养箱中避光培 养24h~72h，得到培养后的待测水样；
[0014] 六、测定最终细菌数：将步骤五得到的培养后的待测水样与SYBRGreenI染料共 解化lOmin~20min，得到经过解化的培养后的待测水样；再利用流式细胞仪测定经过解化 的培养后的待测水样中的最终细菌数T2;
[0015] 步骤六中所述的培养后的待测水样与SYBRGreenI染料的体积比为100:1 ;
[0016] 屯、计算AOC含量：
[0017] 利用如下公式计算待测水样中的AOC含量： 阳0化]AOC(yg乙酸碳/L)=化-Ti) A ;
[0019] 上述式中：
[0020] Ti为解化后的待培养水样中的起始细菌数，单位为cells/yL;
[0021] T2为培养后的待测水样中的最终细菌数，单位为cells/iiL; 阳02引 k为细菌与乙酸碳的转换系数，k=lO^cells/ygAOC; 阳023] 根据上述公式计算出滤池出水中AOC含量，完成一种简单快速测定滤池出水中 A0C含量的方法。
[0024] 本发明的原理及优点：
[00巧]一、本发明提供了一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方法，待测水样的除 菌通过采用0. 22ym的微孔滤膜过滤而实现，微孔滤膜过滤后的待测水样做稀释水用，与 传统的己氏灭菌法相比，不仅缩短了操作时间，而且保证了待测水体的水质不受影响，同时 除菌效果更好；
[00%] 二、本发明的一种简单快速测定滤池出水A0C含量的方法，W同源菌作为接种菌， 并通过比例稀释的方法来确定接种量；同源菌代表了该水体中最具优势的菌群，W同源菌 作为接种菌更符合工程实际，避免了某特定测试菌种难W在该水体水中生长或生长滞缓 的问题，能够更准确地反映待测水体的A0C含量；稀释接种法较传统的特定菌定量接种更 为简单，可省去特定菌菌浓度测定步骤，也避免了加入的异源接种水对待测水样水质的影 响；
[0027]S、本发明的一种简单快速测定滤池出水A0C含量的方法，接种水样是使用 1. 76ym的玻璃纤维滤膜过滤待测水样而得到，不仅可W保留接种水中的±著菌，而且去除 了水样中的不可溶解的物质，保证测定能准确进行；
[0028] 四、本发明的一种简单快速测定滤池出水A0C含量的方法，通过优化实验条件， 将培养时间缩短至24h，大大节省了测定时间；由于滤池出水中的微生物大部分为滤池中 脱落生物膜上的微生物，处于稳定期和衰亡期为多；因此W该水体作为接种菌培养测定其 A0C含量时，达到稳定期所需的时间较水源水或管网水短；若W常规的3d作为培养周期，将 会大大低估滤后水体的A0C含量；通过实验确定24h为最佳的培养周期，不仅比常规的A0C 测定方法节省2/3的时间，而且大大提高了测定准确性；
[0029] 五、本发明的有益效果是建立了一种更适用于滤后水的生物可同化有机碳测定方 法，解决了现有测定方法难W准确测定滤后水体A0C含量的难题，同时建立了比例稀释的 同源菌接种方法，大大地简化了操作步骤，并较现有的AOC测定方法缩短了 2/3的时间，更 适用于工程实际应用。
[0030] 本发明可获得一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方法。
【附图说明】 阳03U 图1为滤池出水中AOC含量的测定曲线，图1中1为实施例一中AOC含量随培养 时间的变化曲线，2为实施例二中A0C含量随培养时间的变化曲线，3为实施例S中A0C含 量随培养时间的变化曲线，4为实施例四中A0C含量随培养时间的变化曲线。
【具体实施方式】
【具体实施方式】 [0032] 一：本实施方式是一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方法是 按W下步骤完成的：
[0033] 一、预处理待测水样：使用微孔滤膜过滤待测水样，得到微孔滤膜过滤后的待测水 样；将微孔滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有微孔滤膜过滤后的 待测水样的无菌无碳的样品瓶；
[0034] 二、预处理接种水样：使用玻璃纤维滤膜过滤待测水样，得到玻璃纤维滤膜过滤后 的待测水样；将玻璃纤维滤膜过滤后的待测水样作为同源接种水；
[0035]=、接种：在无菌环境下将步骤二得到的同源接种水接种至步骤一得到的装有微 孔滤膜过滤后的待测水样的无菌无碳的样品瓶中，再使用满旋振荡器满旋振荡15s~30s， 得到待培养水样；
[0036] 步骤S中所述的待培养水样中同源接种水的体积分数为1%~20% ;
[0037] 四、测定起始细菌数：将步骤S得到的待培养水样与SYBRGreenI染料共解化 lOmin~20min，得到解化后的待培养水样；再利用流式细胞仪测定解化后的待培养水样中 的起始细菌数Ti; 阳03引步骤四中所述的待培养水样与SYBRGreenI染料的体积比为100:1 ;
[0039] 五、培养：将解化后的待培养水样置于溫度为25°C~35°C的生化培养箱中避光培 养24h~72h，得到培养后的待测水样；
[0040] 六、测定最终细菌数：将步骤五得到的培养后的待测水样与SYBRGreenI染料共 解化lOmin~20min，得到经过解化的培养后的待测水样；再利用流式细胞仪测定经过解化 的培养后的待测水样中的最终细菌数T2;
[0041] 步骤六中所述的培养后的待测水样与SYBRGreenI染料的体积比为100:1 ; W42] 屯、计算A0C含量：
[0043] 利用如下公式计算待测水样中的A0C含量： W44]A0C(y g乙酸碳 /L)=化-Ti) A ;