养后的待测水样；再利用流式细胞仪测定经 过解化的培养后的待测水样中的最终细菌数T2; 阳166] 步骤六中所述的最终细菌数T2为流式细胞仪测定的活细菌数；
[0167] 屯、计算AOC含量：
[0168] 利用如下公式计算待测水样中的AOC含量： 阳 169]AOC(yg乙酸碳 /L)=化-Ti)A; 阳170] 上述式中： 阳171] Ti为解化后的待培养水样中的起始细菌数，单位为celIs/iiL; 阳172] Tz为培养后的待测水样中的最终细菌数，单位为cells/iiL; 阳17引k为细菌与乙酸碳的转换系数，k=lO^cells/ygAOC;
[0174] 根据上述公式计算出滤池出水中AOC含量，完成一种简单快速测定滤池出水中A0C含量的方法。
[01巧]实施例五步骤一中所述的待测水样与步骤二中所述的待测水样为同源水。 阳176] 对比试验：常规接种104cells/mL的同源菌测定滤池出水中A0C含量的方法是按 W下方法完成的：
[0177] -、预处理待测水样：使用孔径为0. 22ym微孔滤膜过滤待测水样，得到微孔滤膜 过滤后的待测水样；将微孔滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有微 孔滤膜过滤后的待测水样的无菌无碳的样品瓶；
[0178] 二、预处理接种水样：使用孔径为1.76ym玻璃纤维滤膜过滤待测水样，得到玻璃 纤维滤膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维滤膜过滤后的待测水样作为同源接种水；
[0179] 步骤二中所述的同源接种水的接种菌为同源菌； 阳180] 三计算接种体积：将500yL步骤二得到的预处理后的同源接种水与5yLSYBR GreenI染料共解化lOmin，得到解化后的接种水样；再利用流式细胞仪测定每iiL解化后 的同源接种水样中的细菌数T(celIs/yL); 阳181] 步骤=中所述的细菌数T流式细胞仪测定的活细菌数；
[0182] 四、接种：在无菌环境下将步骤二得到的同源接种水接种至步骤一得到的装有微 孔滤膜过滤后的待测水样的无菌无碳的样品瓶中，再使用满旋振荡器满旋振荡15s，得到待 培养水样； 阳183] 步骤四中所述的满旋振荡器的功率为30W; 阳184] 步骤四中所述的待培养水样中同源菌的浓度为104cells/血； 阳化5] 五、测定起始细菌数：将500yL步骤S得到的待培养水样与5yLSYBRGreenI 染料共解化lOmin，得到解化后的待培养水样；再利用流式细胞仪测定解化后的待培养水 样中的起始细菌数Ti;
[0186] 步骤五中所述的起始细菌数Ti为流式细胞仪测定的活细菌数；
[0187] 六、培养：将解化后的待培养水样置于溫度为3(TC的生化培养箱中避光培养2地， 得到培养后的待测水样； 阳188] 屯、测定最终细菌数：将500化步骤五得到的培养后的待测水样与5化SYBR GreenI染料共解化lOmin，得到经过解化的培养后的待测水样；再利用流式细胞仪测定经 过解化的培养后的待测水样中的最终细菌数T2; 阳189] 八、计算AOC含量：
[0190] 利用如下公式计算待测水样中的AOC含量：
[0191] AOC(y g乙酸碳 /L)=化-Ti) A ; 阳192] 上述式中： 阳193] Ti为解化后的待培养水样中的起始细菌数，单位为cells/yL; 阳194] Tz为培养后的待测水样中的最终细菌数，单位为cells/yL; 阳1巧]k为细菌与乙酸碳的转换系数，k=lO^cells/ygAOC;
[0196] 根据上述公式计算出滤池出水中AOC含量，完成一种简单快速测定滤池出水中 A0C含量的方法。 阳197] 实施例五和对比试验使用的待测水样为同一批次水。
[0198] 对实施例五和对比试验进行=次平行试验，取平均值，计算滤池出水中A0C值的 结果见表1。 阳199] 表1
阳201] 从表1结果表明，采用实施例五的方法测得的A0C值比对比试验采用常规的接种 104cells/mL所得结果高127%，说明采用实施例五的方法时，采用5%体积同源水接种能更 准确地测得滤池出水的A0C值。
【主权项】
1. 一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于一种简单快速测定滤池 出水中AOC含量的方法是按以下步骤完成的： 一、 预处理待测水样：使用微孔滤膜过滤待测水样，得到微孔滤膜过滤后的待测水样； 将微孔滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有微孔滤膜过滤后的待测 水样的无菌无碳的样品瓶； 二、 预处理接种水样：使用玻璃纤维滤膜过滤待测水样，得到玻璃纤维滤膜过滤后的待 测水样；将玻璃纤维滤膜过滤后的待测水样作为同源接种水； 三、 接种：在无菌环境下将步骤二得到的同源接种水接种至步骤一得到的装有微孔滤 膜过滤后的待测水样的无菌无碳的样品瓶中，再使用涡旋振荡器涡旋振荡15s~30s，得到 待培养水样； 步骤三中所述的待培养水样中同源接种水的体积分数为1 %~20% ; 四、 测定起始细菌数：将步骤三得到的待培养水样与SYBR Green I染料共孵化 IOmin~20min，得到孵化后的待培养水样；再利用流式细胞仪测定孵化后的待培养水样中 的起始细菌数T 1; 步骤四中所述的待培养水样与SYBR Green I染料的体积比为100:1 ; 五、 培养：将孵化后的待培养水样置于温度为25 °C~35 °C的生化培养箱中避光培养 24h~72h，得到培养后的待测水样； 六、 测定最终细菌数：将步骤五得到的培养后的待测水样与SYBR Green I染料共孵化 IOmin~20min，得到经过孵化的培养后的待测水样；再利用流式细胞仪测定经过孵化的培 养后的待测水样中的最终细菌数T 2; 步骤六中所述的培养后的待测水样与SYBR Green I染料的体积比为100:1 ; 七、 计算AOC含量： 利用如下公式计算待测水样中的AOC含量： AOC ( y g 乙酸碳 /L) = (T2-T1) /k ; 上述式中： T1为孵化后的待培养水样中的起始细菌数，单位为cells/ y L ; 1为培养后的待测水样中的最终细菌数，单位为cells/y L ; k为细菌与乙酸碳的转换系数，k = IO7ceIls/ y g AOC ; 根据上述公式计算出滤池出水中AOC含量，完成一种简单快速测定滤池出水中AOC含 量的方法。2. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤一中所述的微孔滤膜的孔径为〇. 22 y m。3. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤二中所述的玻璃纤维滤膜的孔径为1. 76 y m。4. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤三中所述的待培养水样中同源接种水的体积分数为5%。5. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤二中所述的同源接种水的接种菌为同源菌。6. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤四中所述的起始细菌数T1为流式细胞仪测定的活细菌数。7. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤六中所述的最终细菌数T2为流式细胞仪测定的活细菌数。8. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤五中将孵化后的待培养水样置于温度为30°C的生化培养箱中避光培养24h，得到培养 后的待测水样。9. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤三中所述的涡旋振荡器的功率为30W~50W。10. 根据权利要求1所述的一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，其特征在于 步骤三中所述的待培养水样中同源接种水的体积分数为10%。
【专利摘要】一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法，它涉及一种测定水中AOC含量的方法。本发明的目的是要解决现有测定滤池出水中AOC含量的方法实验周期长和难以准确测定滤后水体中AOC含量的问题。方法：一、预处理待测水样；二、预处理接种水样；三、接种；四、测定起始细菌数；五、培养；六、测定最终细菌数；七、计算AOC含量，完成一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法。本发明可获得一种简单快速测定滤池出水中AOC含量的方法。
【IPC分类】G01N33/18
【公开号】CN105116126
【申请号】CN201510594471
【发明人】赵明, 龙智云, 马军, 杨家轩
【申请人】哈尔滨工业大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月17日