专利名称：一种野黄芩苷的纯化方法
技术领域：
本发明属中药制备方法，涉及一种基于盐纯化工艺的野黄芩苷的纯化方法。
背景技术：
野黄芩苷(Scutellarin)别名黄芩素苷、灯盏乙素、灯盏花乙素，其化学名称为4’ -羟基黄芩素-7-0-葡萄糖醛酸甙，其植物来源有唇形科植物高黄芩(Scutellaria altissima L.)的叶，黄芩[S. baicalensis Georgi]的莲、叶以及半枝莲(S. Barbara D. Don)全草等。临床研究结果表明，野黄芩苷具有降低脑血管阻力，改善脑血循环、增加脑血流量及抗血小板凝集的作用，临床用于脑血管病后瘫痪的治疗。虽然野黄芩苷(灯盏花乙素)对缺血性脑血管病及冠心病的治疗有非常明确的疗效，但是由于提取工艺的限制，目前灯盏花乙素制剂普遍存在纯度不高，疗效不稳定的情况。因此，近年来国内业界十分重视野黄芩苷(灯盏花乙素)的分离纯化新技术的研究。专利CN 101376669A提出用大孔树脂柱分离野黄芩苷的工艺方法，该工艺将野黄芩苷溶解在碱水中，离心后滤液加入到DlOl大孔树脂柱上，通过大孔树脂洗脱，再用10倍量的丙酮抗溶剂结晶，得到灯盏花素盐。再将其盐用50%丙酮-水溶解，用酸调pH至酸性，得野黄芩苷。 该方法虽然能够达到较理想的精制效果，但是工艺过程复杂，致使生产成本居高不下，同时也存在着安全隐患。专利CN 101830951 A则提出另一种用甲醇-DMF-水作为流动相制备液相色谱柱分离野黄芩苷的方法，所得产品虽然纯度比较高，但设备投资量大且生产成本， 难以工业化应用。专利CN 101497637公开了一种以灯盏花为原料制备高纯度野黄芩苷的方法。该方法将灯盏花经溶剂提取、絮凝剂澄清、大孔树脂分离和膜浓缩等步骤，最后采用有机溶剂沉淀方法得到野黄芩苷产品。该方法的不足之处在于，工艺繁长、操作难度大且产品质量不稳定。由于野黄芩苷在常规的溶剂中的溶解度较小，采用溶剂重结晶的精制工艺难以提高工业设备的效率。这是现有的制备高纯度野黄芩苷技术的通病。专利CN 1715288A、 CN1727355A和CN 1718584A分别提出了有机溶剂抗溶剂结晶纯化野黄芩苷的工艺方法。三种工艺虽然各有自己的特点，但技术路线相同，即用碱金属弱酸盐调PH，使目标产物的粗提物溶解，再用大量的甲醇、乙醇、丙酮等为抗溶剂，析出其盐结晶，然后通过碱溶酸沉工艺获得纯度较高的目标产物。上述抗溶剂工艺的缺陷在于需要加入数倍体积的抗溶剂，有机溶剂用量大；而且碱性条件下，大量的甲醇或乙醇易于与鞣质发生缔合，致使结晶难以析出或结晶纯度不高。
发明内容
本发明针对现有野黄芩苷纯化技术过程复杂、有机溶剂用量大的不足之处，提出了一种新颖的纯化野黄芩苷的纯化方法，通过以下步骤实现首先在一定温度下，将野黄芩苷粗品放入到一定量的溶剂中，用碱溶液调PH，直至野黄芩苷全部溶解于溶液中；然后通过蒸发或降温的方法析出结晶，过滤，洗涤，干燥，得到精制的野黄芩苷盐的中间体；重新选择溶剂，将结晶状中间体产品溶于其中，加入适当的酸性溶液，调节溶液的PH，使野黄芩苷盐转变为野黄芩苷形式并从溶液中析出；再经过滤、洗涤、干燥，得到野黄芩苷结晶。本发明所述野黄芩苷的分子结构为
权利要求
1. 一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，通过以下步骤实现(1)在4(T60°C下，将野黄芩苷粗品按重量体积比1 5 1 20g/mL加入溶剂溶液中，用质量浓度为5 20%的碱溶液调pH至8. (Γ9. 0，使野黄芩苷全部溶解，然后在圹10°C下放置结晶，经36 48小时后，过滤，用水洗涤，干燥，得中间体野黄芩苷钠盐或钾盐的结晶；(2)在1(T35°C下，将野黄芩苷钠盐或钾盐的结晶，按重量体积比l:l(Tl:20g/mL加入到溶剂溶液中溶解，用质量浓度为5 20%的碱溶液调pH至8. (Γ9. 0使盐全部溶解，再用质量浓度为5 10%的HCl或H2SO4溶液调pH至1. 5 2. 5，放置4飞小时，过滤，用水洗涤沉淀，干燥，得到纯化的野黄芩苷结晶；所述野黄芩苷的分子结构为
2.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，步骤(1)所用的溶剂选用水、乙醇、乙酸乙酯或其混合物。
3.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，步骤(1)所用碱溶液选用NaOH、NaHC03、Na2C03、KOH、KHCO3, K2CO3、磷酸盐、氨水或碱性氨基酸溶液。
4.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，步骤(1)结晶的方法选用降温结晶、溶剂蒸发结晶或抗溶剂结晶方法。
5.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，步骤(2)中所用的溶剂选用水、甲醇、乙醇、乙酸、乙酸乙酯或者其混合物，其中溶质与溶剂的重量体积比为 l:10 l:20g/mL。
6.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，步骤(2)中所用的酸溶液为无机酸或有机酸，选用硫酸、盐酸、硝酸或乙酸的水溶液。
7.根据权利要求1所述的一种野黄芩苷的纯化方法，其特征在于，高效液相色谱测定的色谱条件为，流动相甲醇-0. 4%磷酸体积比35:65 ；流动相流速1 mL/min ；检测波长 335nm;柱温箱温度45°C。
全文摘要
本发明提供一种野黄芩苷的纯化方法，先将野黄芩苷的粗品溶解于碱性溶液中变成盐，然后直接在水溶液中降温结晶分离杂质，再酸化回到原始分子状态，得到含量99%以上的精致产品。本发明充分利用野黄芩苷的钠盐或钾盐的溶解度性质，将野黄芩苷精制过程转化为其盐的分离与纯化过程，可获得高纯度的野黄芩苷产品。本发明方法操作步骤少，简单易行，成本低廉，产品收率高而且质量稳定，而且使用水作为结晶的溶剂，避免了大量有机溶剂的使用，增加了生产的安全性，便于工业化生产。
文档编号C07H1/06GK102225958SQ201110143319
公开日2011年10月26日 申请日期2011年5月27日 优先权日2011年5月27日
发明者刘雪松, 孙笛, 梅彦红, 王龙虎, 陈勇 申请人:浙江大学