一种检测蒸馏酒醉度的方法及应用
【技术领域】
[0001]本发明属于酿造技术领域，特别涉及一种检测蒸馏酒醉度的方法及应用。
【背景技术】
[0002]蒸馏酒是指白酒、白兰地、威士忌等经发酵、蒸馏酿制而成的、高酒精度(含酒精18?70%)的酒，也包括用这些酒浸泡、勾兑形成的各种功能酒。由于酿酒原料很多，酿造方法各异，造成酒的风格各有千秋。如传统的白酒是利用淀粉质原料和辅料，以酒饼、酵母等为发酵剂，经蒸煮、糖化、发酵、蒸馏、陈酿、勾兑等工序酿制而成，每一个环节都会对白酒的质量造成影响。因此，不同品牌、或同一品牌不同品种的酒，其质量优劣都有差异。如今消费者已经从注重白酒的香型、风格、口感等表观属性，提升到注重酒后的舒适度与健康度。不容易喝醉的酒一一低醉度酒，成为消费者和生产厂商追求的一种趋势。
[0003]乙醇是一种中枢神经抑制剂，少量饮酒会使人感觉兴奋、愉悦、话多，但随着饮用剂量的增大，认知和记忆判断能力会减弱，运动技能下降，步伐不稳、左右摇摆、腿脚乏力等症状，或导致人昏睡、失去意识，这是测量行为学醉酒的依据。
[0004]酒后人的血液中乙醇浓度升高，浓度大小与喝酒量、酒的质量及酒后时间有直接关系，这是测量血液乙醇浓度醉酒的依据。
[0005]酒的醉度是反映酒固有特性的指标之一。对于同酒度的酒，原则上醉度越低，质量越好。白酒中水和乙醇的含量占到98%，影响酒的醉度的关键因素是其余2%左右的物质，包括杂醇、酯类、酸类和其他微量物质，以及由它们混合形成的酒体结构。从而，不同酒的醉度存在差异。但是，目前仍缺乏科学有效检测蒸馏酒醉度的方法。
【发明内容】
[0006]本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种检测蒸馏酒醉度的方法。
[0007]本发明的另一目的在于提供所述检测蒸馏酒醉度方法的应用。
[0008]本发明的目的通过下述技术方案实现:一种检测蒸馏酒醉度的方法，包括如下步骤:
[0009](I)用色谱纯级无水乙醇和超纯水配制成一种体积浓度或不同体积浓度的乙醇标准溶液；
[0010](2)用乙醇标准溶液和待测蒸馏酒分别给小鼠灌胃；其中，按纯酒精剂量计算，使用η个灌胃剂量的乙醇标准溶液对小鼠灌胃后得到的小鼠形成对照组，使用η个灌胃剂量的待测蒸馏酒对小鼠灌胃后得到的小鼠形成试验组；每个灌胃剂量设置至少2个重复；
[0011](3)对对照组和试验组进行如下参数测定:
[0012]①测定小鼠灌酒前及灌酒后t时间点的行为参数值；t时间点为两个，定义为tl和t2 ；
[0013]站立参数At，一分钟内旷场站立次数，次/分钟；
[0014]跑滚筒参数Bt，一分钟内跑滚筒圈数，圈/分钟；
[0015]游泳参数Ct，一分钟内游泳距离，米/分钟；
[0016]翻正参数Dt，仰卧翻正需要的时间，秒；
[0017]②测定灌酒后t时间点的小鼠血液乙醇浓度，为Nt，单位为mg/L ;
[0018](4)对步骤(3)得到的测定数据进行如下处理:
[0019]1、站次比Rlt =酒后t时间一分钟站立次数A t/酒前一分钟站立次数Atl;
[0020]I1、滚圈比R2t =酒后t时间一分钟跑滚筒次数B J酒前一分钟跑滚筒次数B。；
[0021]II1、游距比R3t =酒后t时间一分钟游泳的距离C J酒前一分钟游泳距离C。；
[0022]IV、翻正比 R4t= (T-翻正时间 D t)/T ；
[0023]其中T为小鼠酒后t时间后可翻正的最长时间，即在T时间内不能翻正的小鼠，在该时间段后5?10分钟内将不能翻正；大于T秒翻正按Dt= T计算；T的单位为秒；
[0024]V、小鼠行为醉酒指数 St= l_(a*R lt+b*R2t+c*R3t+d*R4t)
[0025]其中，a =站立权重，b =跑滚筒权重，c =游泳权重，d =翻正权重，a+b+c+d = 1，O彡St彡I ;
[0026]St= O时，表示喝酒前，小鼠的行为参数正常，正常的站、跑、游、翻正，即Rlt= R2t
=^3t= R 4t= I ；
[0027]S t= I时，表示完全醉，小鼠行为参数异常，失去行为能力，不能站、不能跑、不能游、不能翻正，即 Rlt= R2t= R3t= R4t= O ；
[0028]以小鼠血液乙醇浓度Nt为横坐标，站次比Rlt、滚圈比R2t、游距比R3t、翻正比R4t分别为纵坐标，作图，进行线性回归分析，得到回归直线方程以及R2 ;进行计算，得到a、b、c和d的值，从而计算出S ^直；
[0029]V1、酒的行为致醉率Xt
[0030]Xt =—定剂量酒后小鼠行为醉酒指数S J乙醇溶液标准剂量后小鼠行为醉酒指数 Sts;
[0031]其中，乙醇溶液标准剂量是步骤(2)的乙醇标准溶液灌胃剂量中选定的一个灌胃剂量；
[0032]VI1、酒的平均行为致醉率X
[0033]X = (Xtl+Xt2) /2 ；
[0034]其中，Xtl、Xt2表示11时间和t2时间分别得到的X值；
[0035]VII1、酒的血液致醉率Yt
[0036]Yt =—定剂量酒后小鼠血液乙醇浓度N J乙醇溶液标准剂量后小鼠血液乙醇浓度 Nts;
[0037]此处的乙醇溶液标准剂量与Xt相同；
[0038]IX、酒的平均血液致醉率Y
[0039]Y = (Ytl+Yt2) /2 ；
[0040]X、酒的综合致醉率Z
[0041]Z = (X+Y) /2 ；
[0042]X1、酒的综合醉度Q
[0043]蒸馏酒醉度Q的定义:用蒸馏酒和乙醇标准溶液给小鼠灌胃，达到相同综合致醉率Z时，灌乙醇标准溶液纯酒精剂量/灌蒸馏酒纯酒精剂量的比值，即为蒸馏酒醉度；
[0044]乙醇标准溶液在η个灌胃剂量下就会得到η个综合致醉率Z乙醇鎌，同样蒸馏酒试样在η个灌胃剂量下也会得到η个综合致醉率Zsilis ;以乙醇溶液的η个综合致醉率Z乙曹?为纵坐标，对应η个灌胃剂量为横坐标作图，进行线性回归分析，得到回归直线，求出斜率为K乙醇溶液，问样求出K蒸馆酒；
[0045]酒的综合醉度Q = K蒸馆酒/K乙醇溶液。
[0046]步骤(I)中所述的乙醇标准溶液优选为不同体积浓度的乙醇标准溶液，以便于在给小鼠灌胃时，控制在无影响灌胃剂量下达到不同的纯酒精剂量的目的；
[0047]步骤⑵中所述的蒸馏酒为白酒、白兰地或威士忌；
[0048]步骤⑵中所述的小鼠包括清洁(CL)级小鼠和无特定病原体动物(SPF)级小鼠；优选为SPF级小鼠；
[0049]步骤⑵中所述的小鼠优选为体重为20土3g的SPF级小鼠；
[0050]步骤⑵中所述的η为自然数，η的数值的设置以得到综合致醉率与灌胃剂量之间线性回归R2大于0.9为准；优选为4个；更优选为6?7个；
[0051]步骤(2)中所述的灌胃剂量的设置优选如下:最低的灌胃剂量为对小鼠行为反应略有影响的剂量，最高的灌胃剂量为使得小鼠完全失去行为能力的剂量；优选为按纯酒精剂量计算，0.356g纯酒精/10g小鼠体重、0.435g纯酒精/10g小鼠体重、0.514g纯酒精/10g小鼠体重、0.593g纯酒精/10g小鼠体重、0.672g纯酒精/10g小鼠体重、0.751g纯酒精/10g小鼠体重；
[0052]步骤⑵中所述的重复的数量优选为3个；
[0053]步骤(3)中所述的小鼠血液乙醇浓度优选通过气相色谱法测定，其具体测定步骤优选如下:
[0054]⑷血液预处理:在1.5mL离心管中预先加入1yL 2mg/ml的肝素钠溶液，采用尾部取血100 μ L，加入500 μ L色谱纯乙腈、340 μ L超纯水和50yL10mg/ml的内标物，1200r/min离心5min，0.23 μ m有机膜过滤；
[0055](B)气相色谱条件:使用岛津气相色谱GC 2014C进行检测，色谱柱为WONDACAPffAX,其规格为30m*0.25mm*0.25 μπι;进样I μ I ;升温程序如下:初试柱温48°C，3°C /min升温至55°C，接着30°C /min升温至200°C保留2min ;载气类型为氮气；进样模式为分流；压力为100.0KPa ;总流量为18.7mL/min ;柱流量为1.43mL/min ;分流比为10.0 ；
[0056](C)制备标准曲线:使用乙醇和内标物配制5个不同乙醇浓度的标准溶液，其中，乙醇的浓度分别为200mg/L、400mg/L、800mg/L、1200mg/L、1600mg/L，内标物的浓度固定为500mg/L;按步骤(B)气相色谱条件制作测定血液乙醇的标准曲线，得到乙醇和内标物出现的时间；
[0057](D)血液乙醇浓度测定:将按步骤(A)预处理好的血液样品，按步骤(B)气相色谱条件分析，将得到的数据和步骤(C)比对，得到血液乙醇浓度。
[0058]所述的内标物优选为叔丁醇；
[0059]步骤(3)中所述的乙醇溶液标准剂量优选为步骤(2)中对照组的非两端值的灌胃剂量，更优选为中间值的灌胃剂量，最优选为0.593g/100g ；
[0060]所述的检测蒸馏酒醉度的方法用于评价蒸馏酒的品质，特别适合用于在制备蒸馏酒过程的工艺优化中进行应用，得到满足消费者需求的低醉度的蒸馏酒。
[0061]本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:本发明所提供的方法是四个行为参数与血液乙醇浓度参数相结合的综