4t)]
[0128]Nt= 1095.4+4893.6*S t
[0129]其中，小鼠行为醉度指数St= 1-(0.3807*Rlt+0.2024*R2t+0.2154*R3t+0.2015*R4t)
[0130]物理意义:小鼠醉倒没有活动能力时，St= 1，血液乙醇浓度为5989mg/L。由此可知，四个行为参数比率的权重:
[0131]站立a = 38.07%、跑滚筒 b = 20.24%、游泳 c = 21.54%、翻正 d = 20.15%。
[0132]②综合致醉率
[0133]同样方式测量不同蒸馏酒样品，计算出每个灌胃剂量血液致醉率Y和行为致醉率X，计算综合致醉率Z，求出综合致醉率Z关于灌胃剂量W之间的线性回归方程，得到回归直线的斜率K自酒和K乙醇鎌，如图3所示。
[0134]③白酒醉度
[0135]三种酒液的综合致醉率Z与灌胃剂量之间线性回归R2均大于0.9，说明综合醉酒系数值与灌胃剂量之间相关性强，且呈正相关关系，斜率Kisgm= 1.7121，KAtt+-ft40.=
1.3815，K某牌自酒=2.4036。根据醉度计算公式，Qgg= K自酒/K&醇溶液，计算得出两种酒的醉度分别为:
[0136]Q九江十二坊 4(|。= 0.8069，
[0137]Q某品牌白酒=1.4039。
[0138]由此测定，“九江十二坊40° ”为低醉度酒，与同浓度乙醇标准溶液比，可以喝得更多，对酒后醉酒危害和酒精进入血液有缓解保护作用，不容易醉，更健康；另一个样酒(某品牌白酒)则刚相反。
[0139]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于包括如下步骤: (1)用色谱纯级无水乙醇和超纯水配制成一种体积浓度或不同体积浓度的乙醇标准溶液； (2)用乙醇标准溶液和待测蒸馏酒分别给小鼠灌胃；其中，按纯酒精剂量计算，使用η个灌胃剂量的乙醇标准溶液对小鼠灌胃后得到的小鼠形成对照组，使用η个灌胃剂量的待测蒸馏酒对小鼠灌胃后得到的小鼠形成试验组；每个灌胃剂量设置至少2个重复； (3)对对照组和试验组进行如下参数测定: ①测定灌酒前及灌酒后t时间点的行为参数值；t时间点为两个，定义为tl和t2; 站立参数At，一分钟内旷场站立次数，次/分钟； 跑滚筒参数Bt，一分钟内跑滚筒圈数，圈/分钟； 游泳参数Ct，一分钟内游泳距离，米/分钟； 翻正参数Dt，仰卧翻正需要的时间，秒； ②测定灌酒后t时间点的小鼠血液乙醇浓度，为Nt，单位为mg/L; (4)对步骤(3)得到的测定数据进行如下处理: 1、站次比Rlt=酒后t时间一分钟站立次数A J酒前一分钟站立次数Aci; I1、滚圈比R2t=酒后t时间一分钟跑滚筒次数B J酒前一分钟跑滚筒次数Btl; II1、游距比R3t=酒后t时间一分钟游泳的距离C J酒前一分钟游泳距离C。； IV、翻正比R4t=(T-翻正时间D t)/T ; 其中T为小鼠酒后t时间后可翻正的最长时间，即在T时间内不能翻正的小鼠，在该时间段后5?10分钟内将不能翻正；大于T秒翻正按Dt= T计算；T的单位为秒； V、小鼠行为醉酒指数St= l-(a*R lt+b*R2t+c*R3t+d*R4t) 其中，a =站立权重，b =跑滚筒权重，c =游泳权重，d =翻正权重，a+b+c+d = 1，O ^ St^ I ； St= O时，表示喝酒前，小鼠的行为参数正常，正常的站、跑、游、翻正，即Rlt= R2t= R3t=R4t= I ； St= I时，表示完全醉，小鼠行为参数异常，失去行为能力，不能站、不能跑、不能游、不能翻正，即 Rlt= R2t= R3t= R4t= O ； 以小鼠血液乙醇浓度Nt为横坐标，站次比Rlt、滚圈比R2t、游距比R3t、翻正比R4t分别为纵坐标，作图，进行线性回归分析，得到回归直线和回归方程以及R2;进行计算，得到a、b、c和d的值，从而计算出St值； V1、酒的行为致醉率Xt Xt=—定剂量酒后小鼠行为醉酒指数Stw/乙醇溶液标准剂量后小鼠行为醉酒指数Sts; 其中，乙醇溶液标准剂量是步骤(2)的乙醇标准溶液灌胃剂量中选定的一个灌胃剂量; VI1、酒的平均行为致醉率X X = (Xtl+Xt2)/2 ; 其中，Xtl、Xt2表示tl时间和t2时间分别得到的X值； VII1、酒的血液致醉率Yt Yt =—定剂量酒后小鼠血液乙醇浓度Ntw/乙醇溶液标准剂量后小鼠血液乙醇浓度Nts; 此处的乙醇溶液标准剂量与Xt相同； IX、酒的平均血液致醉率Y Y = (Yti+Yt2)/2 ； X、酒的综合致醉率ZZ = (X+Y)/2 ； X1、酒的综合醉度Q 蒸馏酒醉度Q的定义:用蒸馏酒和乙醇标准溶液给小鼠灌胃，达到相同综合致醉率Z时，灌乙醇标准溶液纯酒精剂量/灌蒸馏酒纯酒精剂量的比值，即为蒸馏酒醉度； 乙醇标准溶液在η个灌胃剂量下就会得到η个综合致醉率Z乙醇鎌，同样蒸馏酒试样在η个灌胃剂量下也会得到η个综合致醉率Zsws;以乙醇溶液的η个综合致醉率Z 为纵坐标，对应η个灌胃剂量为横坐标作图，进行线性回归分析，得到回归直线，求出斜率为Ki醇溶液，问样求出K蒸馆酒； 酒的综合醉度Q = K.酒/K乙醇溶液。
2.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的小鼠为CL级小鼠或SPF级小鼠。
3.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的η为自然数，η的数值的设置以得到综合致醉率与灌胃剂量之间线性回归R2大于0.9为准。
4.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的灌胃剂量的设置如下:最低的灌胃剂量为对小鼠行为反应略有影响的剂量，最高的灌胃剂量为使得小鼠完全失去行为能力的剂量。
5.根据权利要求4所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:对于SPF级小鼠，所述的灌胃剂量的设置如下:按纯酒精剂量计算，0.356g纯酒精/10g小鼠体重、0.435g纯酒精/10g小鼠体重、0.514g纯酒精/10g小鼠体重、0.593g纯酒精/10g小鼠体重、0.672g纯酒精/10g小鼠体重、0.751g纯酒精/10g小鼠体重。
6.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(2)中所述的重复的数量为3个。
7.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(3)中所述的小鼠血液乙醇浓度通过气相色谱法测定。
8.根据权利要求7所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:所述的气相色谱法测定的测定步骤如下: (A)血液预处理:在1.5mL离心管中预先加入10 μ L 2mg/ml的肝素钠溶液，采用尾部取血100 μ L，加入500 μ L色谱纯乙腈、340 μ L超纯水和50 μ L 10mg/ml的内标物，1200r/min离心5min，0.23 μ m有机膜过滤； (B)气相色谱条件:使用岛津气相色谱GC2014C进行检测，色谱柱为WONDACAPWAX，其规格为30m*0.25mm*0.25 μπι;进样I μ I ;升温程序如下:初试柱温48°C，3°C /min升温至55°C，接着30°C /min升温至200°C保留2min ;载气类型为氮气；进样模式为分流；压力为100.0KPa ;总流量为18.7mL/min ;柱流量为1.43mL/min ;分流比为10.0 ； (C)制备标准曲线:使用乙醇和内标物配制5个不同乙醇浓度的标准溶液，其中，乙醇的浓度分别为200mg/L、400mg/L、800mg/L、1200mg/L、1600mg/L,内标物的浓度固定为500mg/L;按步骤(B)气相色谱条件制作测定血液乙醇的标准曲线，得到乙醇和内标物出现的时间； (D)血液乙醇浓度测定:将按步骤㈧预处理好的血液样品，按步骤⑶气相色谱条件分析，将得到的数据和步骤(C)比对，得到血液乙醇浓度。
9.根据权利要求1所述的检测蒸馏酒醉度的方法，其特征在于:步骤(3)中所述的乙醇溶液标准剂量为步骤(2)中对照组的灌胃剂量的中间值。
10.权利要求1?9任一项所述的检测蒸馏酒醉度的方法的应用，其特征在于:所述的检测蒸馏酒醉度在蒸馏酒生产过程的工艺优化中进行应用，或用于评价蒸馏酒的品质。
【专利摘要】本发明公开一种检测蒸馏酒醉度的方法及应用。该方法通过用乙醇标准溶液和待测蒸馏酒分别给小鼠灌胃，测定灌胃前后的小鼠行为参数和灌胃后小鼠血液乙醇浓度，再依次计算出小鼠行为醉酒指数、酒的平均行为致醉率、酒的平均血液致醉率、酒的综合致醉率；然后以综合致醉率为纵坐标、灌胃剂量为横坐标作图，进行线性回归分析，得到回归直线，分别求出斜率为K乙醇溶液和K蒸馏酒；得到酒的综合醉度Q＝K蒸馏酒/K乙醇溶液。该方法是四个行为参数与血液乙醇浓度参数相结合的综合醉度检测方法，能科学准确的评价不同类型蒸馏酒的醉度，因此将其用于评价蒸馏酒的品质，利于优化制酒工艺，酿造出低醉度蒸馏酒，提高蒸馏酒的健康品质。
【IPC分类】G01N33-00
【公开号】CN104713988
【申请号】CN201510058545
【发明人】吴振强, 吴志强, 卫云路, 何松贵, 刘幼强, 黎伟刚, 方毅斐
【申请人】华南理工大学, 广东省九江酒厂有限公司
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年2月4日