一种唾液酸质控品及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及医学检验技术领域，具体设及一种唾液酸质控品及其制备方法。
【背景技术】
[0002] N-己酷神经氨酸（N-Acet}dneuraminicAcid,NANA)，俗称唾液酸（Sialicacid, SA)，是多种天然神经氨酸衍生物之一，其母体结构是九个碳原子组成的内环氨基酸，是一 族化合物的总称，它由于最初从颂下腺粘蛋白中分离出而得名。唾液酸是糖缀合物和多聚 唾液酸的重要组分，广泛分布于生物体系内寡糖链的终端。天然的唾液酸都是Wa-糖巧 键的方式存在，主要通过a(2-3)或a(2-6)糖巧键与半乳糖巧连接构成糖缀合物（包括 糖蛋白、低聚糖和糖脂体），或通过a(2-8)、a(2-9)或a(2-8)/a(2-9)交替连接的方式 构成线性的多聚唾液酸。唾液酸糖缀合物和多聚唾液酸具有多样的生物学功能，主要包括 唾液酸本身能被所识别的受体作用、细胞之间的信息传递和通过阻止或减弱细胞或分子对 其特异性识别部位的接触所起到的掩蔽作用。已经证实，唾液酸能够促进细胞间的黏附、调 节细胞之间W及细胞与环境之间的信息交换、控制机体糖蛋白的生命周期W及诱导病毒的 感染等。许多研究发现带瘤动物及肿瘤患者的瘤体及血液中唾液酸含量增加并随病情的加 重而升高、随病情的缓解而降低，因此在临床检验中唾液酸常被作为恶性肿瘤存在和发展 监控的一个指标，被广泛地应用于很多肿瘤的诊断和监控中。
[0003] 目前，检测唾液酸含量的方法有很多，例如HPLC法、酶法、化学比色法（常见的有 硫代己比妥酸法、间苯二酪法）。HPLC方法具有灵敏度高、特异性好的优点，但是仪器昂贵 且不适合临床批量检测。化学比色法虽然价格比较低，但是特异性低，操作复杂繁琐，需要 高温萃取，不适合自动化分析，其试剂成分具有一定的腐蚀性和人体危害性。酶法通过神 经氨酸巧酶（Neuraminidase,NA)来检测血液样本中的唾液酸含量。其反应原理为；通过 神经氨酸巧酶催化水解使唾液酸a-糖巧键断裂生成游离的N-己酷神经氨酸，N-己酷神 经氨酸在神经氨酸醒缩酶的作用下生产成丙酬酸和甘露糖胺，丙酬酸与还原性辅酶（NADH) 在乳酸脱氨酶（LDH)的作用下生成乳酸和NAD+，而NADH在340nm有特异性吸收，通过检测 NADH的减少量就可W检测出血液样本中的唾液酸含量。
[0004]目前，酶法唾液酸检测试剂盒在国内外均已出现，但因缺乏国际标准，造成了检测 结果随生产厂家、试剂不同而可能出现不一致的现象，给该项目的推广应用带来了极大困 难。此外，在唾液酸检测质量管理体系中，应用质控品进行室内质控和参加室间的质量评价 是保证实验室检测结果质量，减少误差，使不同实验室之间的结果具有较好可比性的重要 措施。
【发明内容】
[0005] 本发明针对现有技术的上述不足，提供一种能保证唾液酸测定稳定性的唾液酸质 控品。
[0006] 为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为；一种唾液酸质控品，由W下 浓度的各组分组成：
[0007]
[0008] 本发明所述的缓冲液为哲己基嗽嗦己硫横酸缓冲液、4-哲己基嗽嗦丙横酸缓冲 液、=哲甲基氨基甲烧盐酸盐缓冲液、3-=哲甲基甲胺-2-哲基丙横酸缓冲液中的一种，pH 为 7. 0-7. 5。
[0009] 本发明所述的防腐剂为山梨酸钟、苯甲酸钢、叠氮钢、Proclin300中的一种或几 种。
[0010] 本发明上述唾液酸质控品的制备方法，包括W下步骤：
[0011] (1)将配方比例的棚酸及甘露醇溶于二甲基亚讽中，混合均匀，再加入配方比例的 多聚唾液酸钢盐，混合均匀；
[0012] (2)在 40-200mmol/LpH7. 0-7. 5 的缓冲液中加入l-20mmol/L谷脱甘肤，l-20g/ L牛血清白蛋白，9g/L氯化钢，0.1-lg/L防腐剂（上述各组分浓度均为最终质控品中的浓 度），混合均匀；
[001引 做将上述（1)和（2)溶液按体积比5:1000-20:1000混合均匀。
[0014]本发明的优点和有益效果：
[00巧]1、选用多聚唾液酸钢盐为原料，比唾液酸（N-己酷基神经氨酸）更能代表唾液酸 在体内的存在形式，并且来源充足，易获得。
[0016]2、液体型质控品，无需复溶。
[0017] 3、氯化钢、牛血清白蛋白的加入，使得制备成的液体质控品基质类似人血清，尽量 模拟了唾液酸在血液中的存在状态，不仅质控品制剂的稳定性好，不易降解，保存时间长， 而且由于质控品是模拟人血清制备而成，同检测样品基质类似，因此检测准确度高，有效的 保证了临床检验需求。
[0018] 4、制备工艺简单，生产成本低，该质控品采用制备方法制成，加入的物质和含量可 控，所W质控品成分稳定，不存在人血清中存在的干扰检测结果的物质，抗干扰能力强，也 不存在人血清中存在的导致不安全情况的物质（如HIV)，非常安全，可放屯、使用。
【具体实施方式】
[0019] W下结合实施例对本发明作进一步具体描述，但不局限于此。
[0020] 实施例1;
[0021]
[0022] 该唾液酸质控品的制备方法，包括W下步骤：
[002引 （1)将Ig的棚酸及0.Imol甘露醇溶于20ml的二甲基亚讽中，混合均匀，再加入 50mg的多聚唾液酸钢盐，混合均匀；
[0024]似配制50mmol的哲己基嗽嗦己硫横酸缓冲液1L，调节抑至7. 0,加入5mmol谷 脱甘肤，lOg牛血清白蛋白，9. 2g氯化钢，0.Ig叠氮钢，混合均匀；
[00幼 做将上述（1)和似溶液按体积比20;1000混合。
[002引 实施例2;
[0027]
[0028]
[0029] 该唾液酸质控品的制备方法，包括W下步骤：
[0030] (1)将0. 5g的棚酸及0. 2mol甘露醇溶于10ml的二甲基亚讽中，混合均匀，再加入 lOOmg的多聚唾液酸钢盐，混合均匀；
[003。 似配制100臟01的^哲甲基氨基甲烧盐酸盐缓冲液山调节抑至7.5，加入 20mmol谷脱甘肤，20g牛血清白蛋白，9.Ig氯化钢，0.IgProclin300,混合均匀；
[003引做将上述（1)和似溶液按体积比10 ; 1000混合。
[0033] 本发明上述实施例制备的质控品在2-8°C环境中保存1年的结果如下表1所示：
[0034] 表 1
[00巧]
[003引从上表1的检测'数据可获知，说明本k明的质控品稳i可存放较长时间。
[0037] 实施例所用的原料，除另有说明外，均为市售工业品。
[0038] 本发明的上述实施例是对本发明的说明而不能用于限制本发明，与本发明的权利 要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。
【主权项】
L一种唾液酸质控品，其特征在于：该质控品由以下浓度的各组分组成：
2. 根据权利要求1所述的唾液酸质控品，其特征在于：所述的缓冲液为羟乙基哌嗪乙 硫磺酸缓冲液、4-羟乙基哌嗪丙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液、3-三羟甲 基甲胺-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种。
3. 根据权利要求1所述的唾液酸质控品，其特征在于：所述的防腐剂为山梨酸钾、苯甲 酸钠、叠氮钠、Proclin300中的一种或几种。
4. 一种唾液酸质控品的制备方法，其特征在于：制备步骤包括： (1) 将配方比例的硼酸及甘露醇溶于二甲基亚砜中，混合均匀，再加入配方比例的多聚 唾液酸钠盐，混合均匀； (2) 在40-200mmol/LpH7.0-7.5的缓冲液中加入1-20臟〇1/1谷胱甘肽，1-2(^/1牛 血清白蛋白，9g/L氯化钠，0. 1-lg/L防腐剂，混合均勾； (3) 将上述（1)和（2)溶液按体积比5:1000-20:1000混合均匀。
【专利摘要】本发明公开一种唾液酸质控品及其制备方法，该质控品由以下浓度的各组分组成：缓冲液(pH7.0-7.5)40-200mmol/L，多聚唾液酸钠盐1-300mg/L，二甲基亚砜5-20ml/L，硼酸0.1-3g/L，甘露醇0.05-0.5mol/L，谷胱甘肽1-20mmol/L，牛血清白蛋白1-20g/L，氯化钠9g/L，防腐剂0.1-1g/L。本发明具有选用多聚唾液酸钠盐为原料，比唾液酸(N-乙酰基神经氨酸)更能代表唾液酸在体内的存在形式，并且来源充足，易获得，液体型质控品，无需复溶的优点。
【IPC分类】G01N33/96
【公开号】CN104965091
【申请号】CN201510267785
【发明人】沃燕波, 邹炳德, 邹继华
【申请人】宁波美康生物科技股份有限公司
【公开日】2015年10月7日
【申请日】2015年5月22日