一种利巴韦林分子印迹电位型传感器的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于材料技术领域，设及一种电位型传感器的制备方法，具体设及利己韦 林分子印迹电位型传感器的制备方法，可应用于食品、药品、环境样品中利己韦林的分析。
【背景技术】 阳00引利己韦林化ibavirin)是一种广谱抗病毒的药物，可W抑制多种DNA或RNA病毒的生长，临床上被广泛应用于治疗慢性丙型肝炎、甲型或乙型流感病毒、 带状瘤疹、病毒引起的鼻炎、咽炎、急性上呼吸道感染等巧eddyKRJournalof Hepatology, 2009, 50:402 - 411 ;余文英，亚太传统医药，2010,6(11) : 175-177 ;梁益辉等， 中医临床研究，2012, 4(20) : 46-47)。由于利己韦林是人用药，用于动物病毒性疾病缺乏科 学、有效的实验数据，因此中国在2005年禁止将利己韦林应用于动物上（余文英，亚太传 统医药，2010, 6 (11) : 175-177)。在2012年，我国发生了 "速生鸡"事件，有些养殖户为了提 高自身利益，违规将利己韦林作为兽药使用或者添加到饲料中给白羽鸡喂食，使它能快速 生长。不幸的是利己韦林会在动物体内残留，人类食用运些鸡肉会间接摄入利己韦林，易在 人体内产生耐药性，还可能会产生溶血性贫血、致崎、生殖毒性等不良反应，对人体健康造 成损害。因此，开发一种简便快速、经济、可靠的方法用于日常监控利己韦林药物制剂和饲 料质量、药物检测对实验室有重要的意义。 W03]目前，有关利己韦林的检测方法主要有紫外分光光度计（林红等，儿 科药学杂志，2003,9 (5): 21-22)、毛细管电泳法（MichaelC，Electrophores is, 2004, 25:1615-1622)、高效液相色谱法-串联质谱法（MargaritaM，Journal of曲armaceuticalandBiomedicalAnalysis, 2009, 49:1233 - 1240)、液相色 谱-串联质谱法值arlingtonD,ClinicaQiimicaActa, 2011, 12:2332-233f5)、 高效液相色谱法（AntonioDA,Journalof化armaceuticalandBiomedical Analysis, 2012,66:376-380)、胶束液相色谱法（MohieSED,JournalofLiquid Qiromatography&RelatedTechnologies, 2014, 37:1785-1804)等。但运些方法的分析时间 长，需要复杂的前处理，且所用仪器昂贵，选择性不高。
[0004] 电位传感器由一台电位计和一对电极（指示电极和参比电极）组成，是一种 仪器设备最简单的检测技术之一。电位传感器具有操作简单，易于微型化，所使用仪器 价格低廉，具有选择性高、线性范围宽、分析时间短、可用于实时监测的优点，且样品不 需要复杂的前处理。目前用于电位传感器测试的选择性指示电极主要有氣离子选择性 电极、氯离子电位传感器、铅离子电位传感器等。由于商品可用的指示电极多为无机阴 阳离子，种类少，严重限制了其在生产实际中的应用。为解决运一问题，人们开发了分 子印迹电化学传感器，如诺氣沙星分子印迹电位传感器（Felis分钟aTC,Mic;rochim Acta, 2011, 172:15-23)、没食子酸分子印迹电化学传感器（YanM,Biosensorsand Bioelectronics, 2011，28:291-297)、克伦特罗分子印迹电位传感器化iangRN,ChinJ Anal化em，2012, 40 (3) ,354-358)、茶碱分子印迹膜电化学传感器（谭学才等，化学学报， 2012, 70巧）：1088-1094)等，但文献报道多为分子印迹伏安传感器，分子印迹电位传感器 很少，主要原因是分子印迹电位传感器存在响应不够快，检出限相对高。为加快响应时间， Basoz油al提出在制备分子印迹聚合物敏感膜时，加入阳离子或阴离子交换剂等措施降低 阴离子的干扰，提高膜的导电性和灵敏度，其线性范围为1. 0X10 6~1. 0X10 2mol/l，斜 率29.OmV/decade，检出限1. 12X10 6mol/L，响应时间小于20秒，抑使用范围为3~5， 使用寿命为10天，应用于酒和鱼样品中组胺的检测，加标回收率在99. 3%~101. 7%之间 (BasozabalI,BiosensorsandBioelectronics, 2014, 58:138-144)。
【发明内容】
[0005] 为了解决电位传感器存在响应不够快，检出限相对高的问题，本发明的目的在于 提供一种利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法，所制备的利己韦林分子印迹电位型 传感器能应用于饲料、利己韦林注射液、利己韦林片剂的检测，建立一种简便快速、经济、可 靠的检测饲料、利己韦林注射液、利己韦林片剂样品中利己韦林的方法。
[0006] 本发明所述的一种利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法，其包括W下步 骤：A.将利己韦林、甲基丙締酸溶于N，N-二甲基甲酯胺中，调抑值，超声10分钟，通氮气 10分钟，密封，于20-25°C进行自组装8小时；B.将乙二醇二甲基丙締酸醋、偶氮二异下腊 加入上述混合物中，超声10分钟，通氮气10分钟，密封，水浴下揽拌反应，得到利己韦林分 子印迹聚合物；C.将聚合物用体积比为6:2:2的甲醇：乙酸：水混合液洗脱，然后用乙醇、 水洗至中性，干燥；D.取聚氯乙締、癸二酸二辛醋和氧化石墨締，溶于四氨巧喃，超声分散 石墨締，再加入利己韦林分子印迹聚合物，揽拌混合均匀，倒入烧杯中挥发，得到利己韦林 分子印迹聚合物敏感膜化将敏感膜切成直径为8mm的圆形切片，用导电胶将敏感膜粘在 聚氯乙締管顶端，得到利己韦林分子印迹电位型传感器；电极的内充液为含化C1的缓冲溶 液和利己韦林标准溶液。
[0007] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤A中，利己韦林的量为0. 1~0.2mmol，甲基丙締酸的量为利己韦林摩尔用量的 5倍，N，N-二甲基甲酯胺的量为18~22血，调抑值是用冰醋酸调至抑4~5。
[0008] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤B中，乙二醇二甲基丙締酸醋加入量为利己韦林摩尔用量的18倍，偶氮二异下 腊加入量为20~25mg。
[0009] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤B中，水浴溫度为50~55°C，揽拌反应时间为20~30小时。
[0010] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤C中，干燥是在40~45°C真空干燥箱中进行，干燥时间为36小时。
[0011] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤D中，聚氯乙締的量为380~450mg，癸二酸二辛醋的用量为聚氯乙締用量的2 倍，氧化石墨締的量为10~15mg。
[0012] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤D中，四氨巧喃的用量为17~25mU超声时间为40~60分钟。
[0013] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤B中，加入利己韦林分子印迹聚合物的量为80~lOOmg。
[0014] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤D中，揽拌采用磁力揽拌方式，揽拌速度为3(K)r/min，揽拌时间为30~40分 钟；倒入烧杯为平均倒在4个lOmL烧杯中；敏感膜的厚度为0. 3~0. 4mm。
[0015] 根据本发明所述的利己韦林分子印迹电位型传感器的制备方法的进一步特征在 于，所述步骤E中，电极内充化C1溶液