一种检测日落黄的分子印迹电化学传感器的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种检测日落黄的分子印迹电化学传感器的制备方法，属于电化学、分析化学技术领域。
【背景技术】
[0002]日落黄是中国批准使用的食品添加剂，主要用于食品和药物的着色，其使用范围限于果汁饮料、碳酸饮料、配制酒、糖果、糕点、果冻、果子酱、西瓜酱罐头、青梅、虾片、植物蛋白饮料及乳酸菌饮料、腌制小菜、膨化食品等食品。人如果长期或一次性大量食用日落黄色素含量超标的食品，会出现过敏、腹泻等症状，当摄入量过大，超过肝脏负荷时，会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定伤害。食品添加剂安全性评价的权威机构世界粮农组织和世界卫生组织的食品添加剂联合专家委员会对日落黄的安全性进行过评价，认为该添加剂的每日允许摄入量为0-2.5 mg/kg体重。目前检测日落黄的手段有高效液相色谱法、薄层色谱法、极谱法、分光光度法，但这些方法操作繁琐，前处理过程复杂，分析成本高，无法实现快速、实时检测。申请号为CN201310478241的专利，公开了一种采用紫外可见分光光度法检测日落黄，该方法对样品进行萃取，测定有机相吸光度，检出限较高，样品中的其他有机物存在干扰，对实验结果有一定影响。电化学方法能够实现简单、快速、实时的检测，申请号为CN201210255326的专利，公开了一种采用膨胀石墨为工作电极检测日落黄的方法，将质量比为99:1的膨胀石墨和石蜡的混合物填入电极中作为工作电极，甘汞电极为参比电极铂丝电极为对电极采用差分脉冲伏安法测定日落黄，该方法对样品前处理要求严格。因此寻找一种高选择性、重现性好、简单快速的检测方法有非常重要的实用价值。
[0003]分子印迹技术是近年发展起来的一门结合高分子化学、材料科学及生物化学的交叉性学科技术。依据此技术制备的分子印迹聚合物，因具有稳定性高，耐酸碱，可重复使用，寿命长，对印迹分子的立体结构具有“记忆”功能而表现预定、专一的识别性能，在许多领域都有广泛的应用。将分子印迹技术与电化学传感结合，不仅能够充分利用电化学的高灵敏度还能克服干扰严重这一问题，实现1+1>2的效果。
【发明内容】
[0004]本发明的目的之一在于提供一种日落黄分子印迹聚合物的制备方法，使其具有高选择性、有特异识别能力；
本发明的目的之二在于提供一种检测日落黄的分子印迹电化学传感器的制备方法，构建的分子印迹电化学传感器对日落黄的检测具有高灵敏、抗干扰、简单方便。
[0005]本发明的日落黄分子印迹聚合物的制备的技术方案，具体包括以下步骤:
称取50~70 mg氧化石墨稀溶于超纯水中超声分散0.5h，分别称取50 mg无水三氯化铁和35 mg的氯化亚铁加入已分散的氧化石墨烯溶液中，N2保护；滴加氨水至pH为9.0，80 °C条件下搅拌0.5 h，然后加入20~30 μ L水合肼，震荡几分钟后，50 °C加热3 h，冷却，洗涤，30 °C干燥得到磁性石墨烯MG固体。取10~15 mg MG加入无水乙醇中，超声分散均匀后，加Λ 10-20 mg 1-丁基-3-甲基咪唑氢溴酸盐，超声0.5 h，分离，将产物加入到15~30 mL纳米金溶胶AuNPs中，搅拌，至上清液变为无色，弃上清液，30 °C干燥得产物MG-1L-AuNPs ;
取0.2-0.3 mmol日落黄SY溶解于甲醇-水(体积比4:1)溶液中，再加入100~200mg MG-1L-AuNPs纳米复合材料和0.8~1 mmol甲基丙稀酸，超声分散，50 °C下震荡，预聚合2 h，使模板分子、功能单体和纳米复合材料充分混合。加4~5 mmol 二甲基丙稀酸乙二醇酯、50-60 mL乙腈和10~20 mg偶氮二异丁腈，通氮除氧，密封，50°C震荡24 h。分离，产物用甲醇-乙酸(体积比9:1)溶液洗至无色。乙醇洗至中性30°C条件下真空干燥得日落黄分子印迹聚合物。
[0006]本发明的日落黄分子印迹电化学传感器的制备方法，具体包括以下步骤:
(1)依次用1.0μπι、0.3 μ??,Ο.05 μπι的Α1203抛光粉打磨直径为3 mm的玻碳电极(GCE)，分别在乙醇和超纯水中超声清洗2~3 min，氮气吹干；
(2)将分子印迹聚合物20~30mg分散在1~2 mL 0.4-0.6 %的壳聚糖溶液中，超声40min后。将分子印迹聚合物的分散液滴涂到电极表面，即构成日落黄分子印迹电化学传感器(MIPs/GCE)；
(3)以MIPs/GCE为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为对电极。在含有20mL pH 7.0的PBS溶液的电解池中利用差分脉冲伏安法检测日落黄，根据所得的峰电流值和日落黄浓度呈线性关系，绘制工作曲线。
[0007]本发明的有益成果:
(1)本发明制备的印迹聚合物充分利用了磁性石墨烯巨大比表面积、优异的导电性能以及利用磁性简单快速分离的特点和离子液体纳米金的良好导电性能和电催化性能，增强了材料的导电性能和灵敏度；
(2)以甲基丙烯酸为功能单体，日落黄为印迹分子，MG-1L-AuNPs为支持体，采用本体聚合的方法制备的日落黄分子印迹聚合物具有特定的空穴，对日落黄具有特异的识别能力，选择性较高，对其他共存物质不响应；
(3)利用此印迹聚合物构建的分子印迹电化学传感器，同时具备了纳米材料的优异导电性能、尚灵敏度和分子印迹的尚选择性可以实现对日洛黄的简单、快速、尚选择、尚灵敏的检测。线性范围为1.00X 10 9 ~ 2.00父10611101/1，检出限为3.0\101%01/1。
[0008]【附图说明】:
图1所示为不同浓度日落黄的相对峰电流与其浓度的线性关系图；其中插图为日落黄的电化学响应DPV图。
[0009]【具体实施方式】:
下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明的保护范围不仅局限于实施例，该领域专业人员对本发明技术方案所作的改变，均应属于本发明的保护范围内。
[0010]实施例1
日落黄分子印迹聚合物的制备:50 mg氧化石墨稀、50 mg无水三氯化铁、35 mg的氯化亚铁，N2保护，滴加氨水至pH为9.0，然后加入20.0 μ L水合肼，震荡几分钟，60 °C加热3.5 h，分离获得磁性石墨烯，10 mg磁性石墨烯、10 mg 1_ 丁基-3-甲基咪唑氢溴酸盐、15mL纳米金溶胶，乙醇溶液中超声30 min，30°C干燥得产物MG-1L-AuNPs。0.2 mmol日落黄、0.1 g MG-1L_AuNPs、0.8 mmol甲基丙稀酸，甲醇-水(体积比4:1)溶液中预聚合2 h，加4mmol 二甲基丙稀酸乙二醇酯、50 mL乙腈和