一种复杂基质中二溴氯丙烷残留量的gc-nci-ms检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种二溴氯丙烷残留量的检测方法，更具体地说，涉及一种采用气相 色谱-负化学源-质谱法（GC-NCI-MS)定性定量测定动物源性食品等复杂基质中二溴氯丙 烷残留量的方法，属于农药残留的检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 二溴氯丙烷，俗称黑药，学名1，2_二溴-3-氯丙烷，英文名称1， 2-Dibrom〇-3-chloropropane(简称：DBCP)，CAS号为 96-12-8,分子量 236. 3328,结构式为：
二溴氯丙烷是液态熏蒸性杀线虫剂的活性成份。它是一种农业上使用的土壤熏蒸剂， 适用于蔬菜、花卉、烟草、草莓等作物的苗床和温室大棚的熏蒸，防治根结线虫、孢囊线虫、 短体线虫、螺旋线虫、纽带线虫、矮化线虫等。众多研究表明二溴氯丙烷对人体有剧毒，具有 高残留、致畸、致不育的特点。在发现它对人类健康造成不良影响之后，此化合物于1979年 被禁止及限制使用。但仍有不法分子为取得高效的种植效果，暗地使用该农药，为社会留下 不少隐患。
[0003] 国内外对动物源性食品中二溴氯丙烷的检测研究尚未见开展。已有的关于二溴氯 丙烷的检测主要集中在上世纪80年代，且仅仅是针对花生和粮食上的二溴氯丙烷，采用气 相色谱技术进行其残留量检测，但前处理手段落后、过程繁琐、检测效率低，且溶剂多为毒 性较大的苯、乙烷、浓硫酸等，对人体有较大危害。另外，气相色谱技术无法克服基质干扰、 假阳性等问题，不能进行复杂基质中二溴氯丙烷的检测，限制了其使用范围。因此，迫切需 要建立一种操作简单、回收率高、重复性好、检出限低、选择性好的方法，适用于动物源性食 品等复杂基质中^漠氣丙烷的检测。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的问题是针对以上不足，首次提供一种复杂基质中二溴氯丙烷残留 量的GC-NCI-MS检测方法，克服传统技术检测步骤繁琐、溶剂用量大且毒性较大、灵敏度 低、回收率低、重现性差、方法不适用于动物源性食品等复杂基质的缺陷，采用本发明方法， 具有快速简便、溶剂用量小且毒性小、灵敏度高、选择性强、重现性好，适用于各种动物源性 食品中二溴氯丙烷检测的优点。
[0005] 为解决以上问题，本发明采取以下技术方案：一种复杂基质中二溴氯丙烷残留量 的GC-NCI-MS检测方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 提取：称取粉碎好的样品置于具塞离心管中，加入纯乙腈，均质，再加入氯化钠，再 次均质，离心； (2) 净化：移取样品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，加入体积比为3 :1的乙 腈-乙酸乙酯混合溶剂于旋蒸瓶中溶解残渣，经Pr〇ElutCARB/NH2固相萃取小柱净化，体积 比为3 :1的乙腈-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩至近干后，用体积比为1 :1的 正己烷-丙酮定容，离心，过膜得样品液； (3) 标准工作溶液的配制：采用样品空白基质提取液配制不同浓度标准工作液，然后用 标准溶液浓度-色谱峰面积作标准工作曲线； (4) 气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS)测定 将步骤（3)中的各浓度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰 面积作出标准工作曲线； 在相同条件下将步骤（2)中得到的样品液进行GC-NCI-MS测定，测得样品中二溴氯丙 烷的色谱峰面积，带入标准曲线，得到样品液中二溴氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表 的质量计算得到样品中二溴氯丙烷的残留量。
[0006] 以下是对上述技术方案的进一步说明： 步骤（1)中样品若为动物肝脏等含水量较少的样品，需加入称样量五分之一的水，浸泡 半小时后进行提取。
[0007] 步骤（4)中气相色谱条件为：色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0. 25*0. 25;进样口 温度270°C;载气：He气，不分流模式进样，进样量IuL;恒流模式，柱流量I.OmL/min;程序 升温：初温50°C保持2min，以每分钟5°C的速度升至180°C，保持5min，然后以每分钟20°C 的速度升至210°C，保持5min;传输线温度250°C。
[0008] 步骤（4)中质谱条件为：离子源温度：200°C;电离模式：NCI;扫描模式：选择离子 监测（SHO模式；甲烷气流量：2ml/min;监测的离子：79、81、160、162，其中162为定量离 子。
[0009] 步骤（4)中测定样品和标准工作溶液时，若两者相应农药的保留时间一致，并且在 扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现，且离子丰度比与标准溶液一致，则可判 断样品中残留此种农药，若不能同时满足上述两个条件，则判断不含该种农药。
[0010]回收率为 88. 82-94. 17%，检出限为 0? 98ug/kg，RSD为 2. 48-3. 77%。
[0011] 本发明采用以上技术方案，与传统技术相比，具有以下优点：采用固相萃取前处 理技术与气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS)结合的方法，实现了动物源性食品中二 溴氯丙烷的定性确证和定量检测。快速简便、采用乙酸乙酯、乙腈作为溶剂，毒性小。检出 限低至〇.98ug/kg，所以灵敏度高。回收率88.82-94. 17%，所以选择性强。相对标准偏差 2. 48-3. 77%，所以重现性好。有效的去除了基质的干扰，适用于各种动物源性食品中二溴氯 丙烷的检测。
[0012] 下面结合实施例对本发明作详细说明。
【附图说明】
[0013] 附图1为添加在空白猪肉基质中的二溴氯丙烷标液的选择离子色谱图； 附图2为空白猪肉样品的选择离子色谱图； 附图3为添加在空白猪肉基质中的二溴氯丙烷标液的质谱图。
【具体实施方式】
[0014] 现以以下实施实例来说明本发明，但并不是限制本发明的范围。
[0015] 实施例1 :下面以猪肉为例，说明二溴氯丙烷残留量的GC-NCI-M检测方法， (1)样品前处理 称取样品10. 〇〇g，置于IOOmL塑料离心管中，加入40mL乙腈溶液，高速均质lmin，再加 入5g氯化钠，再高速均质lmin，以4000r/min的转速离心5min; 取出20mL乙腈层于250mL尖底旋蒸瓶中，在旋蒸仪上蒸至近干，加入体积比为3 :1的 3mL乙腈-乙酸乙酯混合溶剂于旋蒸瓶中溶解残渣，待净化； 将Pr〇ElutCARB/NH2小柱装在固相萃取装置上，在小柱中先加入2g无水硫酸钠，再用 体积比为3 :1的8mL乙腈-乙酸乙酯混合溶剂预淋洗小柱，保持流速约为lmL/min; 将溶解液过柱，再用体积比为3 :1的3mL乙腈-乙酸乙酯混合溶剂洗旋蒸瓶过柱。然 后用体积比为3 :1的25mL乙腈-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，收集全部洗脱液于250mL尖底旋 蒸瓶中，置于旋蒸仪上旋蒸至近干，用体积比为1 :1的正己烧-丙酮定容至2mL，离心IOmin 后用0. 45um滤膜过滤，供GC-NCI-MS分析。
[0016] (2)气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS)测定 将不同浓度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标 准工作曲线；在相同条件下将样品液进行GC-NCI-MS测定，测得