利用薄层色谱法鉴别甜地丁真伪的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药领域，特别是一种利用薄层色谱法鉴别甜地丁真伪的方法。
【背景技术】
[0002]甜地丁为豆科植物米口袋(yi/Weasiaei/iiaverna(Georgi) A.Bor.的干燥全草。始载《本草纲目》，列入草部。全草入药，具清热解毒，凉血消肿的功效。用于痈肿疔疮及化胺性炎症。夏、秋二季米收，除去杂质，晒干。是河南省的习用品种，中国药典2010及2015年版均未收载其质量检验的标准。中国药典2015年版收载的成方制剂中清热解毒片、清热解毒口服液中均有甜地丁这一味药材，且药材处方用量比较大。
[0003]据现有的文献可查阅到甜地丁中主要成分有:胡萝卜苷、谷留醇、正十六烷酸、十二烷醇、正二十四烷酸、木犀草素、芦丁、槲皮素、芹菜素和3 β，22 β，24-三羟基-齐墩果-12-烯。其伪品二色棘豆中的主要成分有:芹菜素、白杨素、木犀草素，山奈酚、槲皮素、杨梅素、鼠李素、异鼠李素、Rhamnazin、Rhamnocitrin (flavonols)，糖取代基有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖齐墩果烷型和五环三萜环丙烷型三萜皂苷。
[0004]目前收载的质量标准现状:
(1)湖南省中药材标准2009年版收载鉴别项目为化学鉴别的方法；
(2)甘肃省中药材标准2008年版收载鉴别项目为显微鉴别的方法；
(3)山东省中药材标准2002年版收载项目仅有性状项；
(4)中国药典1977年一部收载项目仅有性状项；
(5)河南省中药材标准1991年版收载鉴别项目为显微鉴别和化学鉴别的方法；
(6)辽宁省中药材标准(第一册)2009年版收载鉴别项目为显微鉴别法和薄层鉴别法，其所收载的薄层鉴别方法中为槲皮素对照品项。
[0005](7)安徽省中药饮片炮制规范2005年版收载项目仅有性状鉴别；
(8)河北省中药饮片炮制规范2003年版收载项目仅有性状鉴别；
(9)河南省中药饮片炮制规范2005年版收载项目仅有性状鉴别
综上所述，现有的标准中对甜地丁的检验大部分为性状检验，部分有显微鉴别法和化学鉴别法，仅有的薄层鉴别中鉴别的成分为槲皮素，但是甜地丁及其伪品二色棘豆中均含有槲皮素，故仅用槲皮素鉴别的方法并不能够充分说明所鉴别的药材为甜地丁真品而非伪品二色棘豆，因此，现有方法的专属性不强，结果不准确。
【发明内容】
[0006]针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明之目的就是提供一种利用薄层色谱法鉴别甜地丁真伪的方法，可有效解决甜地丁药材真伪的鉴别问题。
[0007]本发明解决的技术方案是，具体步骤如下:
供试品溶液的制备:待测药材粉碎成粉末，取待测药材粉末5?6g，加入三氯甲烷和甲醇混合溶液75?80ml，加热回流2小时，回收溶剂至干，残渣加丙酮2?3ml混合，静置10分钟，取上清液作为供试品溶液，所述的待测药材为甜地丁药材和二色棘豆药材中的任意一种；
对照药材溶液的制备:取甜地丁对照药材(由国家食品药品监督管理局提供的对照品物质)5?6g，加入三氯甲烷和甲醇混合溶液75?80ml，加热回流2小时，回收溶剂至干，残渣加丙酮2?3ml混合，静置10分钟，取上清液作为对照药材溶液；
对照品溶液的制备:取谷留醇对照品(由国家食品药品监督管理局提供的对照品物质)，加丙酮制成对照品溶液，每1ml对照品溶液中含0.9?1.lmg的β -谷甾醇；
照薄层色谱法检测:吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各3 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，将硅胶GF 254薄层板取出，晾干，向硅胶GF254薄层板上均匀的喷洒一层10%硫酸乙醇溶液，将硅胶GF 254薄层板放入105°C恒温的烘箱内加热至斑点显色清晰，置日光灯下检视，观察对照药材溶液的色谱中出现斑点的位置处的斑点颜色和数量，在供试品溶液的色谱中相对应的位置处也出现相同颜色和数量的斑点，且对照品溶液的色谱中出现斑点的位置处的斑点颜色和数量，在供试品溶液的色谱中相对应的位置处也出现相同颜色和数量的斑点时，即可确定该待测药材为甜地丁药材；反之，则为二色棘豆药材；
所述的三氯甲烷-丙酮是三氯甲烷和丙酮以体积比25:1配制成；所述的三氯甲烷和甲醇混合溶液为三氯甲烷和甲醇以体积比3:1混合制成；所述的10%硫酸乙醇溶液的配制方法是称取5g硫酸，用乙醇稀释至50ml。
[0008]本发明专属性强，重现性良好，且检测时间短、速度快，直观，步骤简便，仪器简单，检测成本低，通过比较待测药材(即样品)与对照药材、对照品的色谱，可以方便的看出待测药材与对照药材、对照品的差异，从而提高准确度，避免误判。
【具体实施方式】
[0009]以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0010]实施例1
供试品溶液的制备:待测药材粉碎成粉末，取待测药材粉末5g，加入三氯甲烷和甲醇混合溶液75ml，加热回流2小时，回收溶剂至干，残渣加丙酮2ml混合，静置10分钟，取上清液作为供试品溶液；
对照药材溶液的制备:取甜地丁对照药材5g，加入三氯甲烷和甲醇混合溶液75ml，加热回流2小时，回收溶剂至干，残渣加丙酮2ml混合，静置10分钟，取上清液作为对照药材溶液；
对照品溶液的制备:取β -谷甾醇对照品，加丙酮制成对照品溶液，每1ml对照品溶液中含0.9mg的β -谷甾醇；
照薄层色谱法检测:吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各3 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，将硅胶GF 254薄层板取出，晾干，向硅胶GF254薄层板上均匀的喷洒一层10%硫酸乙醇溶液，将硅胶GF 254薄层板放入105°C恒温的烘箱内加热至斑点显色清晰，置日光灯下检视，观察对照药材溶液的色谱中出现斑点的位置处的斑点颜色和数量，在供试品溶液的色谱中相对应的位置处也出现了相同颜色和相同数量的斑点，且同时观察对照品溶液的色谱中出现斑点的位置处的斑点颜色和数量，在供试品溶液的色谱中相对应的位置处也出现了相同颜色和相同数量的斑