发明的一个实施方案是通过使用在用于检测前带效应的波长获得的信号来计 算"反应速率比率R"。
[0061] 如本文所使用的术语"反应速率比率R"被定义为： R=[时间段2时的反应速率/时间段1时的反应速率]X100 其中，时间段2时的反应速率=[信号（时间点4)-信号（时间点3)] / [时间点 4 -时间点3]且时间段1时的反应速率=[信号（时间点2)-信号（时间点1)] / [时间点2 -时间点1]。
[0062] 通过计算比率值R与预定限值的比较，判断样品中是否存在前带效应。根据本发 明的hook效应可以在相应的仪器平台上使用可商购的分光光度实验室测试来检测，而无 需应用预分析样品稀释处理和/或通过分析物再添加改变测定程序。
[0063] 本发明的一个实施方案是，如果稀释样品之后存在前带效应，则自动重复样品的 测量。
[0064] 本发明的一个进一步实施方案是，在样品中不存在前带效应的情况下，样品中特 定分析物的预定量是可报告的结果。
[0065] 此外，本发明的一个实施方案是，额外信号任选地在用于测定分析物的波长和/ 或在用于计算R的波长和/或在另一个波长测量，在计算和基于反应速率比率R判断Hook 效应的存在之前通过与预定限值比较来评价。根据本发明的此预定限值可以对于特定时 间段内的信号变化来定义，用于决定具有极高反应速率的样品是否被立即分类为例如Hook 样品或用于从前带检查忽略具有极低反应速率的样品，且将此类样品直接分类为例如非 Hook样品。
[0066] 如本文所使用的术语"预定限值"或"阈值"，用于特定时间段内的定义的信号变 化，也表示为反应速率，或用于定义的反应速率比率，如上在式中对于R所述。预定限值也 可以是在特定时间点所取的吸光度值。预定限值应用于本发明的方法用于检测前带效应。 在测定开发过程中通过将非Hook样品与Hook样品进行比较而凭经验进行预定限值的选 择。本发明的一个进一步实施方案是将包含反应时间、校准点、校准模式和测定类型的特定 测量条件额外应用于根据本发明的测量方案。
[0067] 如本文所使用，术语"反应时间"是在终点测定的情况下用于计算其信号值的光信 号的第一（或初始）和第二（或最终）测量之间的时间段。第一（或初始）测量在将最终 试剂添加至反应混合物之前或之后不久进行。在动力学测量的情况下，反应时间可以是用 于计算表示每单位时间的吸光度变化的值的时间段。"反应时间"可以与"完整反应时间" 相同或比其更短。完整反应时间是允许由样品和分析物特异性测定试剂构成的反应混合物 在它们混合之后反应的时间。
[0068] 如本文所使用，术语"完整反应时间"是在多个波长测量特定分析物的时间段。在 cobasc?仪器上可用的12个不同波长同时测量样品。本免疫测定时间的典型完整反应时 间在1到20分钟之间变化。优选地，多波长分光光度计光度计的完整反应时间优选为10 分钟左右。本发明的一个实施方案是在完整反应时间过程中测量特定分析物的光信号。
[0069] 如本文所用术语"校准点的数目"是用于生成校准曲线的也被称为样品标准品的 校准物的数目。
[0070] 如本文所使用，术语"校准模式"是指测量的信号[吸光度或（对于速率测定）吸 光度变化的速率]和目标分析物的浓度之间的有效关系的确定。此类信号/浓度关系的图 形表示是也称为工作曲线的校准曲线。分析仪使用不同类型的数学模型来描述这种关系。 这些数学模型被称为校准类型或校准模式。存在两种基本校准模式，线性和非线性校准模 式。当针对校准物浓度绘制的吸光度读数位于一条直线上时，线性校准用于测试。如果线 性校准基于两个校准物测量，则它被称为线性两点校准。如果校准基于多于两种校准物，则 其被称为线性多点校准。多点校准通常用于非线性校准。
[0071] 如本文所使用，术语"测定类型"是指分析仪上的两种基本类型的光度测定法：终 点测定法和速率测定法。测量由光度计在特定时间点进行。如果测量在反应完成后进行， 则吸光度（或浊度）是样品组分浓度的指标。这些被称为终点测定法。对于速率测定法， 反应速率的速率（或吸光度变化速率）与分析的样品组分的浓度成比例。测量在反应进行 时进行。在该仪器中可能还存在这两种技术的改良，以及两者的组合。
[0072] 本发明的一个进一步方面是用于通过光度测定法测定可以显示前带效应的样品 中白蛋白的量的方法，其中从特定分析物与分析物特异性测定试剂相互作用之后反应混合 物的光信号变化来定量所述特定分析物。
[0073] 对于待测定样品中的白蛋白生成在至少一个波长和反应时间的校准曲线，且将测 量结果储存在仪器平台的数据管理系统中。
[0074] 经完整反应时间，在用于测定分析物的波长和至少在用于检测前带效应的额外特 定波长，同时测量待测定样品中的白蛋白的光信号。
[0075] 通过使用在用于检测前带效应的波长获得的信号来计算反应速率比率R R=[时间段2时的反应速率/时间段1时的反应速率]X100 其中时间段2时的反应速率=[信号（时间点4)-信号（时间点3)] / [时间点 4 -时间点3]且 时间段1时的反应速率=[信号（时间点2)-信号（时间点1)] / [时间点2 -时间点1]。
[0076] 通过将计算比率值R与预定限值进行比较来判断样品中是否存在前带效应，通过 将在用于测定分析物的波长获得的光信号与校准曲线进行比较来定量白蛋白的量。
[0077] 本发明的一个实施方案是，在一些情况下，用于测定白蛋白的波长是用于检测前 带效应的相同波长。在该情况下，在用于测定分析物的波长和/或在用于检测前带效应的 波长测量额外限值，诸如额外信号和参考值。
[0078] 因此，本发明的一个实施方案是任选地可以定义其它限值且应用于与白蛋白的量 的测定相关的各测量，所述测量决定在计算R和基于反应速率比率R判断Hook效应的存在 之前如何进行。这些限值是信号的参考值，其在用于测定分析物的波长、和/或在用于检测 前带效应的波长和/或其它波长测量。此限值的一个实例可以对于特定时间段内的信号 变化来定义，用于从前带检查忽略具有极低反应速率的样品，且将此类样品直接分类为非 Hook样品。此限值的一个进一步实例可以对于特定时间段内的信号变化来定义，用于决定 具有极高反应速率的样品是否被立即分类为Hook样品或是否计算反应速率比率R之后进 行判断。
[0079] 本发明的一个进一步方面是额外应用于测量方案的特定测量条件用于通过光度 测定法测定可以显示前带效应的样品中特定分析物的量的基于分光光度的实验室测试的 用途，所述特定测量条件包含测量波长、反应时间、校准点、和校准模式。
[0080] 使用用于通过光度测定法测量可以显示前带效应的样品中特定分析物的量的可 商购的分光光度实验室测试的仪器平台，其中所述仪器平台的数据管理系统能够处理反应 时间、校准点、校准模式、波长的数据，用于选择最佳拟合校准曲线。进行根据本发明的包含 测量波长、反应时间、校准模式、校准点数量的测量结果的额外校正，且针对彼此进行抵消。
[0081] 附图简述 Ml显示铁蛋白均匀免疫测定的海德堡曲线和重要范围（来自文献Clin.Chem.Lab.Med1999，37，471-476 的图） 图2显示用反应速率方法的cobasc上的前带检查图3显示cobasc上的前带检查值计算 图4显示cobasc311上用反应速率方法的前带检查的设置 图5显示CRPL3测试的Hook样品和非Hook样品之间的差异。
[0082]a)用标准方法和新方法的均一化PC值（NPCV)的方案； b)用标准方法和新方法获得的结果以及改进因子IF的概述。
[0083]图6显ζκ铁蛋白测定白勺Hook样品和非Hook样品之间的差异。
[0084] a)用标准方法和新方法的均一化PC值（NPCV)的方案； b)用标准方法和新方法获得的结果以及改进因子IF的概述。
[0085]Ml显示Hook样品和非Hook样品之间的差异。a)方案：在测量波长340nm_700nm 取吸光度读数。计算测量点8和测量点20之间的信号差异。信号差异限值设定为0.25。 显示信号差异> 0.25的所有样品都是Hook样品。对于信号差异<0.25的所有样品，进行 前带检查。b)方案：通过应用反应速率方法计算前带检查值（参见3. 3. 2. 1中的设置）。 在测量波长505nm-700nm生成信号，且用于前带检查值计算。具有定义限值外侧的PC的样 品是Hook样品。 实施例
[0086] 实施例1:用于CRP测定法的前带检测 1. 1仪器： 具有多波长分光光度计作为检测单元的Rochas(RocheDiagnosticsGmbH)cobas c311分析仪用于本实验。该仪器自动移取样品和测定试剂至反应室（reactioncells)。可 以将多达3种不同试剂R1、R2和R3添加至样品。该仪器使用卤钨灯作为照射源（12V/ 50W)，并用由12个光电二极管组成的光电二极管阵列在12种不同波长（在340、376、415、 450、480、505、546、570、600、660、700 和 800 ±2 11111)同时测量吸光度。光路长度为5.6 mm，且检测器的光范围为0.0000 - 3.0000吸光度。对于每个反应室（reactioncell)，测 量水空白，然后在10分钟（在这里也称为完整反应时间）内57次采集吸光度读数，因此对 于每个波长的吸光度得到总共57个测量点，也称为光度点或测定点。浓度可以通过使用这 些测量点中的至少一个来计算。在该仪器上存在两种基本类型的光度测定法：端点测定法 和速率测定法。测量在37摄氏度进行。
[0087] 1. 2用于使用标准方法的CRP-测定法的程序： 选择Roche'sCRPL3测试（CRPL3，目录号04956842)，颗粒增强免疫浊度测定法，用 于该研究。具有用单克隆抗CRP抗体包被的胶乳颗粒的人CRP聚集物；测定该聚集物浊度。 cobasc包装中提供用于所有Roche测试的试剂。这些盒（cassettes)包含一至三个特别 设计的试剂瓶，且具有详细的相关试剂和其它测试相关信息的条形码标记。对于CRPL3测 试，盒中使用两种试剂：R1 (具有牛血清白蛋白和防腐剂的TRIS缓冲液）和R2 (用甘氨酸 缓冲液中的抗CRP(小鼠）抗体、免疫球蛋白（小鼠）和防腐剂包被的胶乳颗粒）。来自CRP L3测试的包装插页文件中描述的程序用作标准方法。
[0088] 1. 2. 1務取方案： 随后将2μL样品和150μL测定缓冲液（R1)添加至反应室，随后添加胶乳试剂（R2， 48μL)，用24μ1稀释液（水）稀释，并混合反应混合物。
[0089] 1. 2. 2用于牛成柃准曲线的条件: 对于测量，使用570nm作为主要波长，且使用800nm作为校正波长。测定类型是两点终 点测定法。两点终点测定法是执行样品空白的终点测定法。在这里考虑在两个不同测量点 的两个吸光度读数：通常在添加最后试剂之前或之后不久采集第一读数；在添加最后试剂 之后任何时间点采集第二读数。用于校准曲线和因此用于浓度计算的吸光度值通过从第一 读数减去第二读数而获得。对于CRPL3,第一读数是在测量点8,且意指添加最终试剂之后 不久，第二读数在测量点18,其对应于2. 0分钟的反应时间。为了生成校准曲线，一式两份 测量来自Roche(目录11355279)的6份标准品，使用样条（splin