用于测量皮肤健康代谢物的非侵入性方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于测量来自皮肤样品的一种或多种小分子和/或代谢物生物标记 的量的方法以及这些生物标记的量的关联与相关性，因为它直接与哺乳动物皮肤健康的改 善相关联。
【背景技术】
[0002] 头皮/皮肤是显著的器官系统，由起到对环境侵袭的第一道防线功能的多个特化 组织构成。虽然早期的研究主要集中于皮肤的阻隔功能，已经变得清楚的一点是这个器官 是动态的：对甚至是环境中微小的变化感测并响应从而帮助保持内稳态。环境影响诸如太 阳辐射、污染、或者甚至皮肤护理产品的施涂导致复杂的级联事件，它们最终导致数百或者 数千个基因表达的改变。基因表达的这些改变一般被翻译成催化化学反应的蛋白质生成的 改变（或积聚、释放、改性等等），最终导致细胞响应。随着这些化学反应的进行，常常留下 代谢副产物作为已经发生了何种化学过程的指示。与给定皮肤病症例如头皮肩相关联的那 些小分子生物标记的表达谱分析可提供有价值的信息，用于了解病症以及开发用于诊断和 /或改善皮肤病症目的的产品。
[0003] 头皮肩是一种常见的慢性复发性头皮病症，具有片状剥落、瘙痒和过敏的病征和 症状。头皮肩的发病机理是复杂的，并且好像是头皮、微生物区系和宿主免疫系统相互作用 的结果。针对这种病症的许多之前的工作已经集中于检查一些表面水平的现象。传统的基 于专家观察的评估及基于自我观察的评估与基于大型仪器的在生理水平上的表皮结构和 功能的评估相结合。新的生物分子学能力达到了病理生理的理解深度，而非之前用传统研 究方法达到的理解深度；然而，对导致这种病症的关键症状的分子事件的清晰了解仍未出 现。为了解释这些关键分子事件，可通过剥除皮肤表面的胶带、随后通过化学或生物分析方 法，来非侵入性地获得生物分子取样。组胺最近被鉴定为头皮瘙痒的敏感生物标记。需要 另外的生物标记以允许更详细的头皮肩病症的病理生理描述，以及用作指示头皮肩治疗方 案程度和完成度的相关量度。可非侵入性取样的生物标记将使得它们可最大程度上用于常 规的临床评估。
[0004] 为了鉴定用于头皮肩病症的生物标记，使用一种代谢物表达谱方法来辨别在来自 无头皮肩受试者、头皮肩受试者、和用去头皮肩洗发剂治疗过的头皮肩受试者的头皮胶带 剥除提取物之间的差别。这种代谢物表达谱方法（代谢物组学）提供每个受试组的细胞过 程的独有特征。虽然基因组学和蛋白质组学快速描绘出生物系统中可能发生的事件，可将 代谢物组学认为是生物系统响应于遗传和环境变化的扩大的输出，代谢物组学为我们提供 系统生理学的有价值信息。代谢物组学表达谱与基因组学和蛋白质组学认识的成功整合将 能够更彻底地理解生物系统，包括在皮肤病学方面的应用。
[0005] 非侵入性取样方法对皮肤/头皮护理中的生物标记应用是重要的。胶带剥除已经 被成功地用于收集来自皮肤/头皮的小分子，用于后续的代谢物表达谱分析。
【发明内容】
[0006] 本发明的实施例涉及用于诊断受试者皮肤健康状态的非侵入性方法，该方法包括 收集来自受试者的皮肤样品；检测在上皮细胞样品/皮肤细胞样品中的一种或多种小分子 生物标记的含量；基于检测到的小分子生物标记的含量诊断受试者是否具有皮肤病症，其 中检测到的小分子为选自以下的至少一种化合物：由氨基酸代谢生成的化合物、由二肽代 谢生成的化合物、由核酸生成的化合物、由脂质代谢生成的化合物、由碳水化合物代谢生成 的化合物、和它们的混合物、以及另外在表1中列出的小分子生物标记。
[0007] 附表说明
[0008] 表la、b、c、d、e :代谢物的倍数变化在头皮肩和非头皮肩、以及经去头皮肩治疗的 头皮肩之间具有显著的统计学差异。
[0009] 表2a和b :具有显著差异的氨基酸生物标记和它们的代谢物。
[0010] 表3a和b :具有显著差异的二肽代谢物/生物标记。
[0011] 表4 :具有显著差异的核酸代谢物/生物标记。
[0012] 表5a和b :具有显著差异的脂质生物标记和它们的代谢物/生物标记。
[0013] 表6:具有显著差异的杂项生物标记，包括碳水化合物和它们的代谢物、辅因子、 以及其它。
[0014] 表7a和b :具有显著差异的未知结构分子/生物标记。
[0015] 表8 :自我评估和专家分级结果
【具体实施方式】
[0016] 尽管说明书通过特别指明并清楚地要求保护本发明的权利要求作出结论，据信， 本发明通过下列【具体实施方式】将更好地理解。
[0017] 本发明可包含下列因素、由其组成、或基本上由其组成：本文所述的本发明的基本 要素和限定条件、以及本文所述的任何附加或任选成分、组分或限定条件。
[0018] 除非另外指明，所有百分比、份数和比率均基于本发明组合物的总重量。所有与所 列成分相关的此类重量均基于活性物质的含量计，并因此不包括可能包含在可商购获得的 材料中的载体或副产物。
[0019] 本发明的各个实施例中的组分和/或步骤，包括可任选加入的那些，详细描述于 下文。
[0020] 所有引用文献的相关部分均引入本文以供参考；任何文献的引用不可解释为是对 其作为本发明的现有技术的认可。
[0021] 除非另外特别说明，所有比率都是重量比率。
[0022] 除非另外特别说明，所有温度是摄氏度。
[0023] 除非另外指明，所有包括数量、百分比、分数和比例的量被理解为由词"约"所修 饰，并且量不旨在显示有效数字。
[0024] 除非另外说明，"一个"和"所述"是指"一个或多个"。
[0025] 本发明中"包括"指可加入其它不影响最终结果的步骤和成分。该术语包括术语 "由…组成"和"基本上由…组成"。本发明的组合物和方法/过程可包括本文所述的本发 明元素和限制，以及本文所述的任何附加或任选成分、组分、步骤或限制、由本文所述的本 发明元素和限制，以及本文所述的任何附加或任选成分、组分、步骤或限制组成，和基本上 由本文所述的本发明基本元素和限制，以及本文所述的任何附加或任选成分、组分、步骤或 限制组成。
[0026] 本文"有效的"是指一定量的受试品活性足够高以使待治疗病症发生显著积极的 改善。受试品活性的有效量将随着待治疗的具体病症、病症严重程度、治疗持续时间、并发 治疗的性质、以及类似因素而发生改变。
[0027] 如本文所用，术语"差异含量"的代谢物可包括任何提高的或降低的含量。在一 个实施例中，差异含量是指含量增加了 ：至少5 % ;至少10% ;至少20 % ;至少30 % ;至少 40% ;至少50% ;至少60% ;至少70% ;至少80% ;至少90% ;至少100% ;至少110% ;至 少120% ;至少130% ;至少140% ;至少150% ;或更多。在另一个实施例中，差异含量是指 含量减少了 ：至少5% ;至少10% ;至少20% ;至少30% ;至少40% ;至少50% ;至少60% ; 至少70% ;至少80% ;至少90% ;至少100%。代谢物以具有统计学上显著的差异含量表 达（即，P 值等于小于 0.2,其使用 Student T_test、Welch's 2 样品 T_test、Matched Pair T-test 或 Wilcoxon' s rank-sum Test 进行测定）。
[0028] 如本文所用，术语"代谢物"是指由代谢产生的、或特定代谢过程中必需的、或参 与特定代谢过程的任何物质。该术语不包括大分子，诸如大蛋白质（例如具有超过2, 000、 3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000、或 10,000 的分子量的蛋白质）；大核酸 (例如具有超过 2, 000、3, 000、4, 000、5, 000、6, 000、7, 000、8, 000、9, 000、或 10, 000 的分子 量的核酸）；或大多糖（例如具有超过 2, 000、3, 000、4, 000、5, 000、6, 000、7, 000、8, 000、 9, 000、或10, 000的分子量的多糖）。术语代谢物包括信号分子和化学反应中的中间体，该 化学反应将来源于食物的能量转变成可利用的形式，包括但不限于：糖、脂肪酸、氨基酸、核 苷酸、抗氧化剂、维生素、辅因子、脂质、在细胞过程中形成的中间体、以及其它小分子。
[0029] 在本发明的一个实施例中，检测到的代谢物可为选自以下的小分子生物标记：由 氨基酸代谢生成的化合物；由二肽代谢生成的化合物、由核酸代谢生成的化合物；在脂质 代谢中生成的化合物；在碳水化合物代谢中生成的化合物；在能量循环中的中间体、以及 酶辅因子。在另一个实施例中，代谢物可包括在表1、2、3、4、5、6和7中列出的一种或多种 化合物。
[0030] 术语"皮肤"是指脊椎动物的外蒙皮，其由两层细