色谱峰面 积，代入标准工作曲线，得到样品液中苯唑嘧菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量 计算得到样品中苯唑嘧菌胺残留量。
[0032]其中色谱条件为：
[0033] 色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μπι。
[0034] 进样口温度:250.0°C，进样模式:不分流进样，进样量:lyL。
[0035] 载气:He，恒流模式，流速1.2mL/min。
[0036] 炉箱升温程序:初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后以每分 钟2°C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;
[0037] 传输线温度:290°C。
[0038] 其中，质谱参数为：
[0039]电离模式：电子轰击电离，即EI模式，能量70eV。
[0040] 离子源温度:280°C。
[0041] 碰撞气:氩气。
[0042]扫描方式:多反应监测(SRM)扫描模式。
[0043] MRM检测参数见表1。 表1:实施例1的MRM检测参数
$为定量离子对。
[0044] 定性鉴定:在相同的条件下，如果样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应 农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子 丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药;若上述两个条件 不能同时满足，则判断不含该种农药。
[0045] 以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线如表 2〇 表2苹果空白基质中苯唑嘧菌胺的标准工作曲线
[0046] 加标回收率和重复性：
[0047] 在不含苯唑嘧菌胺的苹果中加入10、20和200yg/kg3个浓度水平的苯唑嘧菌胺标 准溶液，待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，200yg/kg添加浓度的样品待 测液用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂稀释5倍后再用GC-MS/MS测定。将测定浓度与 农药理论添加浓度进行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对 标准偏差，测定结果见表3。由表3可以看出，在3个加标水平上，苯唑嘧菌胺的平均回收率为 84.9 %~90.2 %，平均相对标准偏差(RSD)为5.0 %~6.6 %，说明本发明方法的回收率较 高，重复性好。
[0048] 衷3苯晔嘧菌胺的回收率和重复件（n = 6)
[0049] 检出限：
[0050] 将不同浓度的苯唑嘧菌胺基质标准工作溶液注入GC-MS/MS，以最低浓度基质标准 溶液色谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(苹果的浓缩倍数为2.0倍)计算检出 限，苯唑嘧菌胺的检出限为2.40yg/kg。
[0051] 实施例2:黄瓜中苯唑嘧菌胺残留量的检测
[0052] (1)样品前处理 称取经充分混匀的黄瓜10. 〇g于50mL离心管中，准确加入20mL含1 %乙酸的乙腈溶液， 均质提取lmin，加入3g无水硫酸镁、2g乙酸钠和2mL水，祸旋lmin后，7000r/min离心5min。离 心后，取6mL乙腈提取液转移至装有900mg无水硫酸镁、300mg Cis和150mg PSA的离心管中， 祸旋lmin，5000r/min离心5min。取4mL上清液于氮吹管中，于40°C氮气吹干，加入体积比为 1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解残渣，祸旋后混匀后，移入进样瓶中待GC-MS/MS测定。 [0053] (2)标准工作溶液的配制 将lOOOyg/mL标准中间液溶液用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂稀释成lOyg/mL 标准中间液，将l〇yg/mL标准溶液稀释配成5、2、1、0.5、0.2、0. lyg/mL标准溶液。将不含苯唑 嘧菌胺的黄瓜空白样品按上述前处理步骤处理，得样品提取净化残渣，在此残渣中加入900 yL体积比为1 /1的丙酮/正己烷混合溶剂和1 OOyL上述标准溶液，涡旋混匀，配成10、20、50、 100、200、500yg/L基质标准工作溶液。
[0054] (3)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定 操作步骤、色谱和质谱条件与上述苹果样品中苯唑嘧菌胺的测定一致。
[0055] 定性鉴定：
[0056]同上述苹果样品中苯唑嘧菌胺的测定一致。
[0057] 线性关系：
[0058]以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线为Y =116596X+508 · 39，相关系数为 Ο · 9992。
[0059] 加标回收率和重复性：
[0060] 在不含苯唑嘧菌胺的黄瓜中加入10、20和200yg/kg 3个浓度水平的苯唑嘧菌胺标 准溶液，待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，200yg/kg添加浓度的样品待 测液用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂稀释5倍后再用GC-MS/MS测定。将测定浓度与 农药理论添加浓度进行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对 标准偏差，测定结果见表4。由表4可以看出，在3个加标水平上，苯唑嘧菌胺的平均回收率为 84.3%~90.6%，平均相对标准偏差(RSD)为6.4%~8.0%，说明本发明方法的回收率高， 重复性好。
[00611 妄4架π生膝菌除：的面iKr隶知甫有杜
=
[0062] 检出限：
[0063] 将不同浓度的苯唑嘧菌胺基质标准工作溶液注入GC-MS/MS，以最低浓度基质标准 溶液色谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(黄瓜的浓缩倍数为2.0倍)计算检出 限，苯唑嘧菌胺的检出限为3.40yg/kg。
[0064] 以上的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行 限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术对本发明的技术方案作出 的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种GC-MS/MS测定果蔬中苯挫喀菌胺残留的方法，其特征在于，所述方法包括w下 步骤： (1) 提取 称取蔬菜和水果样品于具塞离屯、管中，加入乙腊或含1 %乙酸的乙腊溶液均质提取 Imin，加入氯化钢或乙酸钢中的一种和无水硫酸儀振荡后离屯、； (2) 净化 移取样品提取液于离屯、管中，加入基质分散固相萃取剂，满旋振荡，离屯、，取一定量净 化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酬/正己烧混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串 联质谱(GC-MS/MS)检测； (3) 标准工作溶液的配制 将不含苯挫喀菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化 残渣，加入适量溶剂和标准溶液，满旋混匀，配制成至少3个浓度的苯挫喀菌胺系列混合标 准工作液； (4) 测定和结果计算 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，W标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线;在相同条件下将步骤(2)中净化 后的样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中苯挫喀菌胺的色谱峰面积，代入基质标 准工作曲线，得到样品液中苯挫喀菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到 样品中苯挫喀菌胺残留量;若上机溶液中苯挫喀菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容 溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。2. 根据权利要求1所述的一种GC-MS/MS测定果蔬中苯挫喀菌胺残留的方法，其特征在 于，步骤(1)中蔬菜和水果样品若为脱水样品，需降低称样量，并加适量水充分浸润。3. 根据权利要求1所述的一种GC-MS/MS测定果蔬中苯挫喀菌胺残留的方法，其特征在 于，步骤（1)中采用乙腊提取时需加入氯化钢盐析，采用含1%乙酸的乙腊溶液提取时需加 入乙酸钢盐析。4. 根据权利要求1所述的一种GC-MS/MS测定果蔬中苯挫喀菌胺残留的方法，其特征在 于，步骤(2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸儀、Cl沸PSA组成，每毫升提取液中无水硫酸 儀、Cl沸PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。5. 根据权利要求1所述的一种GC-MS/MS测定果蔬中苯挫喀菌胺残留的方法，其特征在 于，步骤(4)中GC-MS/MS分析条件为:色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm， 膜厚0.25μπι;进样口溫度250.0°C;载气:He，不分流模式进样，进样量：1化;恒流模式，流速 1.2mL/min;升溫程序:初溫60°C保持2min，W每分钟20°C的速度升至200°C，然后W每分钟2 °C的速度升至220°C，再W每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线溫度:290°C;电 离模式：电子轰击电离化I，70eV);离子源溫度280°C;碰撞气:氣气；多反应监测扫描方式， 监测参数为：
【专利摘要】本发明公开了一种GC-MS/MS测定果蔬中苯唑嘧菌胺残留的方法，用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的苯唑嘧菌胺，提取液经乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化后，气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为84.3%～90.6%，平均相对标准偏差（RSD）为5.0%～8.0%，检出限低于3.40？μg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【IPC分类】G01N30/06, G01N30/88
【公开号】CN105548441
【申请号】CN201610067253
【发明人】郭庆龙
【申请人】郭庆龙
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月30日