一种评估鸡蛋营养价值的组合物及应用和评估方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种应用异亮氨酸评估鸡蛋营养价值以及评估方法，属于农产品中的 畜禽产品评估领域。
【背景技术】
[0002] 鸡蛋作为人类的日常营养来源，与人们的生活息息相关。鸡蛋中含有大量的营养 物质，其中微量元素，粗蛋白质，粗脂肪，胆固醇，卵磷脂，维生素 B2和维生素 A是其主要的营 养成分。鸡蛋中的这些营养素有助于增进神经系统的功能，可增强记忆，防止老年人记忆力 衰退;所含的微量元素硒、锌，维生素均有抗癌作用。所以，经常食用鸡蛋能丰富营养，健身 益寿。
[0003] 现在市场上可以买到的鸡蛋种类繁多，有规模化养鸡场的鸡蛋，也有粗放放养蛋 鸡产生的柴鸡蛋，还有人工鸡蛋等等，各类鸡蛋的营养价值参差不齐，而鸡蛋的营养价值也 越来越得到人们的重视。评估鸡蛋营养价值主要是通过表征鸡蛋中营养物质成分的含量高 低，进而评估营养价值。然而，鸡蛋中营养化学成分参数较多，同时评估不仅工作量大，且会 导致界定标准不一，因此，亟需一种通过单一物质或组合物迅速表征上述参数的高低进而 表征鸡蛋营养价值。
[0004] 而鸡蛋的营养价值与多种因素相关，其中最重要的因素包括饲养方式和蛋鸡品 种。当蛋鸡品种相同时，其营养价值则主要取决于饲养方式的选择。目前，市场上主要以以 下两种饲养条件鸡蛋为主：1)粗放养殖型鸡蛋:指以无污染的农作物作为主要饲料，以地表 昆虫等作为辅助饲料，散养鸡产的鸡蛋，该类鸡蛋是鸡在正常生理环境下产蛋而得到的鸡 蛋。其还被称为山鸡蛋，草鸡蛋，土鸡蛋、柴鸡蛋;2)规模化养殖型鸡蛋:是以人工合成饲料 喂养的鸡下的蛋，一般是机械化规模化养鸡场或养鸡专业户喂养的鸡下的蛋。然而一些厂 商为了提高经济利润，将本是规模化养殖条件下的鸡蛋标注为柴鸡蛋，因此如何能够更有 效的区分不同饲养方式的鸡蛋显得尤为重要。
[0005] 进一步地，如果能够找到专属性物质用于评估鸡蛋的营养价值，则为市场上鸡蛋 营养价值的评估提供了捷径。
[0006] 异亮氨酸18〇1611(^116，116，又称"异白氨酸"，系统命名为"€[-氨基-0-甲基戊酸"。 是人体必需氨基酸之一，属脂肪族中性氨基酸的一种。菱形叶片状或片状晶体，味苦。熔点： 284°C。溶于水，微溶于乙醇。亮氨酸，异亮氨酸和缬氨酸都是支链氨基酸，它们有助于促进 训练后的肌肉恢复。其中亮氨酸是最有效的一种支链氨基酸，可以有效防止肌肉损失，因为 它能够更快的分解转化为葡萄糖。增加葡萄糖可以防止肌肉组织受损，因此它特别适合健 美运动员。白氨酸还促进骨骼，皮肤，以及受损肌肉组织的愈合，医生通常建议手术后患者 采取亮氨酸补充剂。亮氨酸最好的食物来源包括糙米，豆类，肉类，坚果，大豆粉，和全麦。由 于它是一种必不可少的氨基酸，这意味着身体不能自己生产，只能通过饮食获得。从事高强 度体力活动和低蛋白质饮食的人，应该考虑采取白氨酸补充。尽管有独立补充形式，但是最 好还是与异亮氨酸和缬氨酸一起摄入。因此，选择混合型补充剂更为方便。
[0007] 维生素 B1又称硫胺素或抗神经炎维生素或抗脚气病维生素，为白色晶体.它的生 理功能是能增进食欲，帮助消化，特别是碳水化合物的消化，改善精神状况;维持神经组织、 肌肉、心脏活动的正常，减轻晕机、晕船，维持神经正常活动等。成人每天需摄入2mg。它广泛 存在于米糠、蛋黄、牛奶、番茄等食物中。
[0008] 酪氨酸是一种芳香族氨基酸，亦是20种用来合成蛋白质的蛋白氨基酸之一，它属 于非必需氨基酸。酪氨酸比苯丙氨酸多一个羟基。苯丙氨酸的主要代谢途径产生酪氨酸，苯 丙氨酸羟化酶。代谢障碍会出现苯酮酸尿症(PKU)。酪氨酸转变成儿茶酚胺和黑色素或彻底 氧化分解。人体缺乏酪氨酸酶，黑色素合成出现障碍，称白化病(albinism)。酪氨酸与多巴， 多巴胺(与帕金森病相关），去甲肾上腺素，肾上腺素合成有关酪氨酸分解代谢过程中尿黑 酸分解受阻可出现尿黑酸尿症。信号转导中的SH2结构域特异性结合磷酸酪氨酸残基。、
[0009] 质谱与色谱分离联用技术具有快速、高灵敏度、高选择性等特点，尤其针对多种类 型及微量化合物的定性定量分析等特性，该技术日渐成为分析化学领域的重要手段。从现 有技术看，尚没有相关的方法将质谱和色谱联用技术应用于鸡蛋的营养价值评估中。本发 明基于上述问题提供一种简便的解决方案。
[0010] 但从现有技术看，尚没有相关的技术将质谱和色谱联用技术应用于鸡蛋营养价值 的相关评估中。本发明基于上述问题提供一种简便的解决方案。
【发明内容】
[0011] 本发明解决的技术问题是提供一种评估鸡蛋营养价值的方法、物质及其应用。
[0012] 为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：
[0013] -种鉴定鸡蛋品质的组合物，所述组合物包含异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素 B1。
[0014] 其中所述方法是通过检测鸡蛋中是否含有异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素 B1，或者 测定鸡蛋中异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素 B1含量高低。
[0015] -种利用所述组合物系统地确定鸡蛋品质优劣顺序的方法，其特征在于，该方法 包括如下步骤：
[0016] (1)分别测定鸡蛋中异亮氨酸、酪氨酸和维生素 B1的含量，其中异亮氨酸含量的权 重系数为〇. 1，根据三种物质的测定结果从高到低进行排序；
[0017] (2)将步骤（1)测定的三种物质的含量进行求和，根据求和结果从高到低排序；以 及
[0018] (3)对步骤(1)和步骤(2)的排序进行比较，最终确定鸡蛋品质优劣的顺序。
[0019] 其中所述方法是通过超高效液相色谱分离系统（UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-T0F MS/MS)的联用技术对鸡蛋进行检测。
[0020] 一种鉴定鸡蛋品质的方法，通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱 仪(Q-TOF MS/MS)的联用技术在如下条件下对鸡蛋进行检测：
[0021 ] 所述高分辨液相色谱测定条件为:色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18柱;流 动相:A相为甲醇，B相为0.05%甲酸水-5mM醋酸铵溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的方案如下:0_ 0. lmin：0%B-0.0%B；0. l-3.0min：0.0%B-0.0%B；3.0-15.0min：0.0%B-100.0%B； 15.0-23.0min：100.0%B-100.0%B；23.0-23. lmin： 100.0%Β-0.0%Β；23.1-26.Omin： 0.0%B-0.0%B；
[0022] 所述Q-T0F型MS/MS测定采用正离子检测模式，ESI离子源；
[0023] 检测到质谱离子特征峰m/z 265.1118,保留时间tR=l .6min，质谱离子特征峰m/z 132.1016，保留时间七[? = 2.35111；[11，以及质谱离子特征峰111/2 182.0810保留时间七[?= 3·33min0
[0024] 本发明还提供所述组合物在鉴定鸡蛋品质中的应用。
[0025] 其中，所述应用是通过检测鸡蛋中是否含有异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素 B1，或 者异亮氨酸、酪氨酸和/或维生素 B1含量高低。
[0026]其中，通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联 用技术对鸡蛋进行检测鸡蛋中是否含有异亮氨酸或者异亮氨酸含量高低。
[0027]本发明的有益技术效果如下：
[0028]本发明采用超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的 联用技术，通过对鸡蛋样品的采集、鸡蛋样本前处理方法考察、优化液相色谱条件和质谱检 测参数、以及数据的采集、数据预处理、多变量数据分析等步骤，旨在获得可靠的区分普通 鸡蛋和柴鸡蛋的标志物。
[0029] 本发明的物质和方法可以用于评估鸡蛋的营养价值，该方法简单，迅速，准确，而 且可以进行定量。
【具体实施方式】
[0030] 为充分说明本发明所解决的技术问题和达到的技术效果，通过下述【具体实施方式】 和实施例对本发明进行详细说明。
[0031] 关于营养价值的评估，本发明通过对鸡蛋中化学成分如粗脂肪、粗蛋白质、灰分、 卵磷脂，VB2和VA等参数进行表征。作为本领域常识，由于粗放散养条件下鸡蛋中上述化学 成分含量较高，因此，其营养价值高于规模养殖条件下的鸡蛋。本发明创造性地发现评估鸡 蛋营养价值高低可以通过测定其中异亮氨酸的含量进行，以异亮氨酸的含量作为营养价值 高低的直接标准，即，异亮氨酸含量高的鸡蛋的营养价值高于异亮氨酸含量低的鸡蛋，不含 异亮氨酸的鸡蛋的营养价值最低。
[0032] 医学实验表明，放养型鸡蛋的品质显著高于人工喂养型鸡蛋，即放养型鸡蛋营养 价值高于人工喂养型鸡蛋，究其原因，因饲养场采用人工饲养，饲料单一，且饲料中含化学 添加剂，加速了鸡的产蛋频率，使鸡蛋本身营养价值大打折扣。而柴鸡蛋是散养鸡产下的 蛋，鸡饲料几乎不含有化学添加剂，主要以天然农作物为主要饲料，譬如:粮食、蔬菜、地表 昆虫等，鸡在正常生理环境下产蛋，营养价值颇高。
[0033] 然而，到目前为止，虽然不同来源鸡蛋的营养价值差异确认无异，并且很多学者也 发现微量元素、蛋白、或其他物质在不同鸡蛋中的含量差异，但鸡蛋营养评估仍是以多参 数、多指标做出综合评估，尚无一种能够区分不同来源鸡蛋的营养价值差异的特异性标志 物。