一种医疗美容整形材料奥美定检测方法
【专利摘要】一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，先取待测的奥美定样品或从人体组织中取出的疑似奥美定样品于烧杯中，加入次氯酸钠溶液，降解反应，降解完成后的溶液过微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品，再制备丙烯酰胺标准溶液作为标准样品，然后采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，将降解样品的不同色谱峰保留时间与标准样品进行对比，如果这两个色谱图中没有保留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中没有丙烯酰胺单体；如果这两个色谱图中有保留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中可能有丙烯酰胺单体，收集与丙烯酰胺标准样品保留时间相同的色谱峰，将收集的色谱馏分进行质谱全谱扫描分析，本发明测定结果准确可靠。
【专利说明】
_种医疗美容整形材料奥美定检测方法
技术领域
[0001]本发明涉及医疗整形材料奥美定技术领域，具体涉及一种医疗美容整形材料奥美定检测方法。【背景技术】
[0002]奥美定，学名聚丙烯酰胺水凝胶，是一种无色透明类似果冻状的液态物质。酰胺水凝胶是一种化学合成物，构成它的单体有剧毒，而化合物无毒性，但注入到人体内后，会分解产生剧毒，世界卫生组织已将这种物质列为可疑致癌物之一。
[0003]目前我国批准进口的只有两种玻尿酸，价格一般在8000?12000元/毫升，国产的 “玻尿酸”价格则在2000元/毫升左右。而“奥美定”的价格一般每毫升几十元，贵的上百元， 因为价格差异巨大，因此，仍有一些不正规整形美容机构将“奥美定”冒充“玻尿酸”，用相对便宜的价格给人注射，由此引发的医疗美容整形案件也层出不穷，但由于目前医疗机构及仲裁部门缺乏奥美定检测的相关方法和技术，这就导致了很多患者在不知情的情况下被非法注射奥美定后出现维权困难，同时也给一些不法分子留下了可乘之机。
[0004]鉴于以上问题，本发明提供一种医疗整形材料检测奥美定的分析方法，该方法对规范整形美容行业乱象及患者依法维权具有重要的意义。
【发明内容】
[0005]为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，通过对样品化学降解，然后通过高效液相色谱及质谱对法进行检测，最后通过分析样品中的丙烯酰胺单体来确定所分析样品是否为奥美定。
[0006]为了达到上述目的，本发明采取的技术方案是:
[0007] —种医疗美容整形材料奥美定检测方法，包括以下步骤:
[0008]1)取待测的奥美定样品或从人体组织中取出的疑似奥美定样品于烧杯中，加入质量浓度为〇.5 %?5 %的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为 0.1%?10%，然后用6mo 1 /L盐酸调节pH值4?5，在搅拌下于55?75 °C下降解反应20? 40min；
[0009] 2)降解完成后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；
[0010] 3)制备质量浓度为0.005%的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；
[0011]4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质量浓度90 %甲醇水溶液，检测波长210nm，流速0.5?lmL/min，[〇〇12]色谱分析过程:先用质量浓度90%的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行色谱分析；
[0013] 5)将降解样品的不同色谱峰保留时间与标准样品进行对比，如果这两个色谱图中没有保留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中没有丙烯酰胺单体;如果这两个色谱图中有保留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中可能有丙烯酰胺单体，收集与丙烯酰胺标准样品保留时间相同的色谱峰；
[0014]6)将收集的色谱馏分进行质谱全谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度270°C， 离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，[〇〇15]如果全谱扫描中有m/z为71.90?72.26的离子峰存在，则对该峰进行二级质谱扫描，如果二级质谱扫描中的有m/z为71.90?72.10、54.85?55.15及44.15?44.25的离子峰，则说明所分析的样品中有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。
[0016]本发明的有益效果是:
[0017]通过待测的奥美定样品的降解处理，再用液相色谱-质谱联用法对降解产物进行分析，通过检测降解样品中是否含有丙烯酰胺单体来对样品进行定性分析，以此确定样品中是否含有奥美定;结合高效液相色谱的优良的分离能力及质谱的高分辨率使得测定结果准确可靠，本发明为奥美定注射整形类医疗司法案件的判定提供重要依据。【附图说明】
[0018]图1为实施例1丙烯酰胺标准样品及降解样品的反相液相色谱图。
[0019]图2为实施例1收集的反相色谱目标峰一级质谱图。
[0020]图3为实施例1 一级质谱图中m/z为72.15峰的二级质谱图。【具体实施方式】[〇〇21]下面结合附图和实施例对本发明作详细描述。[〇〇22] 实施例1
[0023] —种医疗美容整形材料奥美定检测方法，包括以下步骤:[〇〇24]1)取lg从人体组织中取出的疑似奥美定样品于50mL烧杯中，加入20mL、质量浓度为1.0 %的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为0.5 %，然后用 6mol/L盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于55°C恒温水浴中降解反应30min;
[0025] 2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；
[0026] 3)制备质量浓度为0.005%的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；
[0027]4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速0.8mL/min，[〇〇28]色谱分析过程:先用质量浓度90%的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行色谱分析，用离心管收集与标准丙烯酰胺色谱峰保留时间相同的色谱峰，色谱分离图见图1，图1中的峰1为丙烯酰胺单体目标峰，峰*为样品中保留时间与1相同的色谱峰，用lmL 离心管收集峰*馏分；
[0029]6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度 270°C，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100,结果见图2和图3，
[0030]从图2中看出，质谱图中有m/z为72.15的峰存在，表明该组分可能是丙烯酰胺，对该峰继续进行二级质谱分析，结果见图3，发现二级质谱有m/z为72.08、55.11及44.19的峰存在，这三个峰分别为丙烯酰胺正离子峰，失去一个NH3分子及失去一个乙烯分子后的碎片离子，该结果确定所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。
[0031]实施例2
[0032] —种医疗美容整形材料奥美定检测方法，包括以下步骤:[〇〇33]1)取lg从人体组织中取出的疑似奥美定样品于50mL烧杯中，加入20mL、质量浓度为0.5 %的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为2.0 %，然后用 6mol/L盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于65°C恒温水浴中降解反应30min;
[0034] 2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；
[0035] 3)制备质量浓度为0.005%的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；
[0036]4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速0.6mL/min，[〇〇37]色谱分析过程:先用质量浓度90%的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行色谱分析，同时用lmL离心管收集保留时间与标准样品峰相同的馏分；
[0038]6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度 270°C，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，
[0039]质谱分析结果发现，在一级质谱图中有m/z为72.05的离子峰存在，表明该组分可能是丙烯酰胺，再对该峰继续进行二级质谱分析，如果发现二级质谱有m/z为72.10、55.05 及44.18的峰存在，说明所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。
[0040]实施例3
[0041] —种医疗美容整形材料奥美定检测方法，包括以下步骤:[〇〇42]1)取lg从人体组织中取出的疑似奥美定样品于50mL烧杯中，加入20mL、质量浓度为5.0 %的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为10 %，然后用 6mol/L盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于75°C恒温水浴中降解反应30min;[〇〇43] 2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；
[0044] 3)制备质量浓度为0.005%的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；
[0045]4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速1.0mL/min，
[0046]色谱分析过程:先用质量浓度90%的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行色谱分析，同时用lmL离心管收集保留时间与标准样品最高峰相同的馏分；
[0047]6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度 270°C，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，
[0048]质谱分析结果发现，在一级质谱图中有m/z为72.12的离子峰存在，表明该组分可能是丙烯酰胺，再对该峰继续进行二级质谱分析，如果发现二级质谱有m/z为72.08、55.15 及44.20的峰存在，说明所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。
【主权项】
1.一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，其特征在于，包括以下步骤:1)取待测的奥美定样品或从人体组织中取出的疑似奥美定样品于烧杯中，加入质量浓 度0.5%?5%的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为0.1 %? 10%，然后用6mol/L盐酸调节pH值4?5,在搅拌下于55?75°C下降解反应20?40min;2)降解完成后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；3)制备质量浓度为0.005 %的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质 量浓度90 %甲醇水溶液，检测波长210nm，流速0.5?lmL/min，色谱分析过程:先用质量浓度90 %的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件 下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行 色谱分析；5)将降解样品的不同色谱峰保留时间与标准样品进行对比，如果这两个色谱图中没有 保留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中没有丙烯酰胺单体;如果这两个色谱图中有保 留时间相同的色谱峰，则表明降解样品中可能有丙烯酰胺单体，收集与丙烯酰胺标准样品 保留时间相同的色谱峰；6)将收集的色谱馏分进行质谱全谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾电离 (ESI) ( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85 °C，脱溶剂气温度270°C，离 子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，如果全谱扫描中有m/z为71.90?72.26的离子峰存在，则对该峰进行二级质谱扫描，如 果二级质谱扫描中的有m/z为71.90?72.10、54.85?55.15及44.15?44.25的离子峰，则说 明所分析的样品中有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。2.根据权利要求1所述的一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，其特征在于，包括以 下步骤:1)取1 g从人体组织中取出的疑似奥美定样品于5OmL烧杯中，加入2OmL、质量浓度为 1.0%的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为0.5%，然后用6mol/ L盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于55°C恒温水浴中降解反应30min;2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；3)制备质量浓度为0.005 %的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质 量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速0 ? 8mL/min，色谱分析过程:先用质量浓度90 %的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件 下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行 色谱分析，用离心管收集与标准丙烯酰胺色谱峰保留时间相同的色谱峰；6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾 电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度270 。(:，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，质谱图中有m/z为72.15的峰存在，表明该组分可能是丙烯酰胺，对该峰继续进行二级 质谱分析，发现二级质谱有m/z为72.08、55.11及44.19的峰存在，这三个峰分别为丙烯酰胺 正离子峰，失去一个NH3分子及失去一个乙烯分子后的碎片离子，该结果确定所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥美定。3.根据权利要求1所述的一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，其特征在于，包括以 下步骤:1)取1 g从人体组织中取出的疑似奥美定样品于5OmL烧杯中，加入2OmL、质量浓度为 0.5%的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为2.0%，然后用6mol/ L盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于65°C恒温水浴中降解反应30min;2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；3)制备质量浓度为0.005 %的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质 量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速0 ? 6mL/min，色谱分析过程:先用质量浓度90 %的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件 下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行 分析，同时用lmL离心管收集保留时间与标准样品峰相同的馏分；6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾 电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度270 。(:，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，质谱分析结果发现，在一级质谱图中有m/z为72.05的离子峰存在，表明该组分可能是 丙烯酰胺，再对该峰继续进行二级质谱分析，如果发现二级质谱有m/z为72.10、55.05及 44.18的峰存在，说明所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥 美定。4.根据权利要求1所述的一种医疗美容整形材料奥美定检测方法，其特征在于，包括以 下步骤:1)取1 g从人体组织中取出的疑似奥美定样品于5OmL烧杯中，加入2OmL、质量浓度为 5.0%的次氯酸钠溶液，使奥美定样品在次氯酸钠溶液中的质量浓度为10%，然后用6mol/L 盐酸调节pH值4.5，在搅拌下于75°C恒温水浴中降解反应30min;2)降解完后的溶液过0.45微米滤膜，收集过滤后的澄清滤液作为降解样品；3)制备质量浓度为0.005 %的丙烯酰胺标准溶液作为标准样品；4)采用反相高效液相色谱对滤液进行分析，色谱条件为:色谱柱为C18柱，流动相为质 量浓度90 %甲醇，检测波长210nm，流速1 ? OmL/min，色谱分析过程:先用质量浓度90 %的甲醇平衡色谱系统，平衡15min后在上述色谱条件 下用微量进样器分别吸取步骤3)制备的5uL标准样品和步骤2)得到的5uL的降解样品进行 分析，同时用lmL离心管收集保留时间与标准样品最高峰相同的馏分；6)将收集的色谱馏分进行一级及二级质谱扫描分析，质谱分析条件:离子源为电喷雾 电离(ESI)( + )，毛细管电压为1.5kV，锥孔电压为40V，离子源温度85°C，脱溶剂气温度270 。(:，离子碰撞能量为20eV，m/z扫描范围20?100，质谱分析结果发现，在一级质谱图中有m/z为72.12的离子峰存在，表明该组分可能是 丙烯酰胺，再对该峰继续进行二级质谱分析，如果发现二级质谱有m/z为72.08、55.15及 44.20的峰存在，说明所分析的样品中含有丙烯酰胺单体，从而进一步肯定所分析样品为奥 美定。
【文档编号】G01N30/02GK106053644SQ201610388863
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月2日
【发明人】孙妩娟, 柯从玉, 张群正, 孙淑娟, 张点
【申请人】西安石油大学