离体脑片神经网络振荡记录系统的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于人体或动物组织局部保存领域，具体涉及一种离体脑片的测试装置及其应用的方法。
【背景技术】
[0002]Gamma神经振荡是一种高频震荡，存在于动物脑体的很多区域。研宄神经震荡可以了解动物和人类感知、记忆、兴奋、运动、唤醒的神经特征，是医学和心理学研宄的热点。
[0003]目前，公知的离体的神经网络振荡技术包括脑片记录装置、记录槽、气体供给装置、灌流给药装置、照明及温度控制装置、电极固定及操纵装置、神经网络信号记录装置、屏蔽及接地装置及系统防震装置。脑片制备后，直接放入记录槽进行孵育记录及其相关的操作。但是由于相关的神经网络记录系统及其装置设计单一或陈旧，往往很难长时间的保证离体脑片的生物活性，传统的神经网络记录系统、只能诱导出2-3小时的神经网络振荡活动、且神经振荡的能谱比较低，很难满足具体的实验要求，并且一定程度上影响了实验结果的准确性及客观性。
【实用新型内容】
[0004]为了克服传统的神经网路振荡记录系统中脑片活性低、诱导出的神经网络振荡时程短、能谱低的不足，本实用新型提供了一种改进型的离体脑片神经网路振荡记录系统，该记录系统对传统的记录系统进行了诸多改进，可使脑片长时间储存且保持其生物活性，可诱导出稳定的长时程的神经网络振荡活动，能较好的满足实验的要求。
[0005]实现本实用新型目的的技术方案为:
[0006]一种离体脑片神经网络振荡记录系统，包括脑片记录槽、脑片储存槽、气体供给装置、灌流给药装置、温度控制装置、电极固定及操纵装置、神经网络信号记录装置、解剖显微镜;
[0007]所述脑片记录槽为长方体形状的容器，容器壁上开有混合氧气输入口 ；容器内设置有凹槽，所述凹槽的投影形状为两条相对短边为弧形、两条相对长边为直线的轴对称图形，凹槽前侧的弧形部分突出到长方体的外部；所述凹槽两侧开有孔；所述凹槽后侧的弧形部分开有人工脑脊液循环输入口，所述混合氧气输入口通过管路连接所述气体供给装置，所述人工脑脊液循环输入口通过管路连接所述灌流给药装置，所述人工脑脊液循环输入口连接的管路上设置有蠕动泵；
[0008]所述脑片储存槽和脑片记录槽结构一样，脑片储存槽的人工脑脊液循环输入口通过管路连接所述灌流给药装置，人工脑脊液循环的管路通过所述的蠕动泵；
[0009]所述温度控制装置包括用于加热的热电阻，所述热电阻设置在脑片记录槽的长方体腔体内和/或围绕在至少一部分的人工脑脊液循环的管路外。
[0010]所述电极固定及操纵装置上固定二个玻璃微电极，玻璃微电极从所述脑片记录槽的顶盖上插入到凹槽内；所述玻璃微电极通过导线连接所述神经网络信号记录装置；所述解剖显微镜位于所述脑片记录槽的正上方。
[0011]其中，所述温度控制装置的热电阻设置在脑片记录槽的长方体腔体内，脑片记录槽的长方体腔体内装有去离子三蒸水，通过加热记录槽内的水控制温度，人工脑脊液循环输入口所连接的管路通过腔体并在腔体内盘绕1-5圈。
[0012]所述的离体脑片神经网络振荡记录系统还包括屏蔽及接地装置及系统防震装置，所述屏蔽及接地装置为长方体，将所述脑片记录槽、气体供给装置、灌流给药装置、温度控制装置、电极固定及操纵装置、神经网络信号记录装置放置在该长方体内，该长方体通过导线接地；所述系统防震装置为气压防震台，玻璃微电极、操纵装置和解剖显微镜放置在气压防震台上。
[0013]其中，所述脑片记录槽侧壁设置两个镀氯化银的银丝，银丝的尖端插入到凹槽内；银丝的另外一端接地。
[0014]其中，所述人工脑脊液循环的管路上设置有四通，所述管路通过四通分别连接脑片储存槽和灌流给药装置，所述蠕动泵为四通道恒流蠕动泵。
[0015]所述的离体脑片神经网络振荡记录系统，还包括一个形状和脑片记录槽一样的脑片储存槽。储存槽设置是独立于记录槽之外的ACSF循环设置，其只用于脑片的储存，而不作神经网络振荡的记录。
[0016]其中，所述凹槽的通气孔上覆盖有载玻片。
[0017]一种离体脑片神经网络振荡记录的方法，采用本实用新型提出的离体脑片神经网络振荡记录系统，包括步骤:
[0018]将离体脑片置于脑片记录槽的凹槽中，所述凹槽底部铺设Lens CleaningTissue (镜头清洁纸)；控制所述人工脑脊液的温度为30-32°C，将人工脑脊液混合氧气循环通入所述凹槽，通过玻璃微电极传输离体脑片的神经网络信号，记录在神经网络信号记录装置中。
[0019]其中，所述混合氧气为体积比例的95 % 02+5 % CO2。
[0020]其中，所述脑片记录槽的长方体腔体内装有去离子三蒸水。所述去离子三蒸水可采用Mill1-Q水。去离子三蒸水中持续通入混合氧气。
[0021]其中，记录神经网络信号时，所述凹槽的通气孔上覆盖有载玻片。
[0022]在界面式浸浴的脑片记录槽内部装载的是去离子三蒸水，其下接入由浸浴浴槽后壁混合氧气入输入口输入的混合氧气，混合氧气通过界面浴槽上方的通气孔直接扩散至盛有脑片的界面式浸浴浴槽(凹槽)内；凹槽底部铺满Lens Cleaning Tissue用于引流循环中的ACSF，在界面式浴槽上方使用载玻片将其界面处封盖，以便于氧气的弥漫。
[0023]本实用新型的有益效果:
[0024]1、本实用新型采用多通道混合气体供给设置，使脑片的制备、转移、储存、及记录都可得到充足的、一体化的氧气供应，最大限度的减轻由于缺氧而对脑片造成的不必要的损伤。
[0025]2、本实用新型在脑片储存槽、脑片记录槽均使用双循环的混合氧气供给装置，并使用Lens Cleaning Tissue对ACSF进行引流，不但可以有效防止脑片由于引流不畅而导致的浸水死亡、而且还可以是脑片保证相当的湿度，最大限度的模拟脑组织在体的内环境。
[0026]3、本实用新型应用MINIPULS-3三通道蠕动泵，实现了脑片储存槽、记录槽中的ACSF的恒流动态循环，使脑片在储存系统和记录系统既相对独立，又有机的结合起来，体现了整体与局部的统一。
[0027]本实用新型提出的改进型的离体脑片神经网路振荡记录系统，对传统的记录系统进行了诸多改进，通过混合氧气和人工脑脊液循环通入，使脑片长时间储存且保持其生物活性，可诱导出稳定的长时程的神经网络振荡活动；通过连接与解剖显微镜的银丝，起到消除噪音干扰的作用；
[0028]在玻璃电极的操纵和固定平台下方，设置有气压防震台，以防在记录电极插入目的脑区后，由于外界的轻微振动而是其电极的位置发生偏移；此外，整个系统都进行了屏蔽和地线接入，使神经网路电生理信号得以不断地纯化，能更好的满足实验的要求。
【附图说明】
[0029]图1:本实用新型实施例1的离体脑片神经网络振荡记录系统结构简图；
[0030]图2:本实用新型实施例1的脑片记录槽顶盖的结构图。
[0031]图3:图2的分解图。
[0032]图4:脑片记录槽顶盖的侧视图。
[0033]图5为没有装入凹槽的脑片记录槽6立体图。
[0034]图6为没有装入凹槽的脑片记录槽的俯视图。
[0035]图7为离体脑片神经网络振荡记录系统结构图。
[0036]图中，I为凹槽，2为通气孔，3为脑片记录槽顶盖，4为凹槽前侧的弧形部分，5为人工脑脊液循环输入口，6为ACSF出口管路，7为热电阻，8为四通道蠕动泵，9为脑片储存槽。10为脑片记录槽，11为供脑片储存槽的人工脑脊液管路，12为供脑片记录槽的人工脑脊液管路，13为混合氧气储存瓶，14为混合氧气管路
【具体实施方式】
[0037]下面以优选的实施例对本实用新型技术方案进一步说明。
[0038]本领域技术人员应当知晓，以下实施例只用来说明本实用新型，而不用来限制本实用新型的范围。
[0039]实施例1
[0040]参见图1、图7，一种离体脑片神经网络振荡记录系统，包括脑片记录槽10、气体供给装置、灌流给药装置、电极固定及操纵装置、神经网络信号记录装置；
[0041]参见图2。图2为脑片记录槽顶盖的结构，所述脑片记录槽10为长方体形状的容器，容器壁上开有混合氧气进口 ；容器内设置有凹槽1，凹槽I的投影形状为两条相对短边为弧形、两条相对长边为直线的轴对称图形，凹槽前侧的弧形部分4突出到长方体的外部，连接ACSF出口管路6 ;凹槽两侧开有通气孔2，凹槽上有人工脑脊液循环输入口 5 ;凹槽后侧的弧形部分底部开有混合氧气输入口和人工脑脊液循环输