一级色谱(LC)更大体积进样和一 级色谱馏分更大体积切入二级色谱(GC)，对于低含量的样品，可让样品连续进样并通过数 控十通阀进行选择性的连续切割，当待检测的组分含量积累到理想分析量后再转入气相色 谱分析，在实现样品高效净化的同时大大提高了分析灵敏度以及仪器适用范围。本实用新 型的装置和方法可满足吸烟者血液中超低含量NNK和NNAL分析的要求，解决了目前标准方 法不能满足吸烟者血液中烟草特有亚硝胺含量分析的瓶颈；而且经本实用新型方法净化 后，干扰杂质的色谱峰明显减少，待测组分的色谱法突出且具有更好的峰型，说明样品净化 效果显著提高。
[0026] 3、本实用新型的装置和方法避免了样品前处理过程中的浓缩、转移、定容等前处 理步骤，减少了实验误差，由于样品处理人工操作环节大大减少，方法的重现性也得到明显 提高。同时由于在线操作减少了样品处理过程中的转移和待测成分的损失，样品分析结果 的精密度也得到很大提高。
【附图说明】
[0027] 图1为本实用新型的液相色谱馏分可在线连续切割检测的液相-气相二维色谱的 结构示意图，其中箭头方向表示物料输送方向；
[0028] 图2为本实用新型的液相-气相二维色谱中的在线浓缩装置结构示意图；
[0029] 图3为本实用新型的液相-气相二维色谱中的数控十通阀在两种不同模式下的流 路示意图；其中图a表示第一在线浓缩装置接收馏分(虚线表示），第二在线浓缩装置处于被 第二流动相洗脱并向气相色谱进样的状态(实线表示），图3b表示第二在线浓缩装置接收馏 分，第一在线浓缩装置处于被第二流动相洗脱并向气相色谱进样的状态。
[0030] 图4为实施例1中的NNK和NNAL在碱性氧化铝色谱柱上分离的色谱图；
[0031] 图5为实施例1中的NNK(图5a)和NNAL(图5b)的质谱图；
[0032] 图6为实施例1中的NNK(图6a)和NNAL(图6b)的选择离子色谱图。
[0033]图中各附图标记含义如下：1_溶剂排出管;2-第一控制阀；3-第一物料进出口；4- 柱塞杆;5-控温加热装置;6-馏分收集仓;7-尾管;8-第二控制阀;9-第二物料进出口； 10-阀 门；11-第一栗；12-第二栗；13-第一脱气装置；14-第二脱气装置；15-数控十通阀；16-液相 色谱分析装置；161-柱温箱；162-液相色谱柱；163-紫外检测器；164-进样器；17-第一流动 相容器；18-第二流动相容器；19-废液排出口； 20-气相色谱分析装置;21-第一在线浓缩装 置;22-第二在线浓缩装置。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步的说明，但不以任何方式对本实用 新型加以限制，基于本实用新型教导所作的任何变换或替换，均属于本实用新型的保护范 围。
[0035] 实施例1
[0036] 如图1所示的液相-气相二维色谱，其包括液相色谱分析装置16和位于其下游的气 相色谱分析装置20;所述液相色谱分析装置16与气相色谱分析装置20之间设有数控十通阀 15;所述数控十通阀15的第一接口供所述液相色谱分析装置16的流出馏分流入;第三和第 八接口分别连接第一在线浓缩装置21的第一物料进出口 3和第二物料进出口 9，第五和第 十接口分别连接第二在线浓缩装置22的第一物料进出口 3和第二物料进出口 9，用两个在线 浓缩装置对所述液相色谱分析装置16按保留时间连续切割的流出馏分依次或交替进行在 线切割、收集和浓缩;第六接口连接至第二流动相容器18，所述第二流动相用于将在线浓缩 后的含待测组分的流出馏分带入所述气相色谱分析装置20中；第四接口用于抽真空和排出 溶剂;第九接口连接至所述气相色谱分析装置20的进样口。
[0037] 所述在线浓缩装置包括依次流体连通的以下组件:第一物料进出口 3、溶剂蒸发装 置和第二物料进出口 9。所述溶剂蒸发装置包括馏分收集仓6、密闭式插入所述馏分收集仓6 内部的柱塞杆4和位于所述馏分收集仓6外壁的控温加热装置5;其中所述柱塞杆4能在待浓 缩样品对其浮力或其自身重力的作用下沿所述馏分收集仓6内壁上下移动;所述柱塞杆4具 有连通所述第一物料进出口 3和所述馏分收集仓6的贯穿式通道;所述第一物料进出口 3上 设有与其交叉的溶剂排出管1，在两者的交叉处设有第一控制阀2,所述第一控制阀2控制待 切割馏分由所述第一物料进出口 3的输入和浓缩时挥发的溶剂经所述溶剂排出管1的排出； 所述第二物料进出口 9上设有用于控制浓缩后样品输出的第二控制阀8,所述馏分收集仓6 和所述第二控制阀8之间具有一段尾管7,用于储存浓缩后样品。所述尾管7的容积为0.01-200yL。该在线浓缩装置连接抽真空装置。
[0038]该二维色谱的工作原理如下：首先启动第一栗11，使第一流动相经由第一脱气装 置13进入液相色谱分析装置16中；待测样品经进样器164进入液相色谱分析装置16中，并经 液相色谱柱162进行分离;来自所述液相色谱分析装置16的流出馏分按保留时间经第一接 口进入数控十通阀15中，含待测组分的待浓缩流出馏分经数控十通阀15转入第一在线浓缩 装置21中进行浓缩;转移完后，切换数控六通阀15,让其他保留时间的含待测组分的待浓缩 流出馏分经数控十通阀15转入第二在线浓缩装置22中进行浓缩;待某一在线浓缩装置中的 物料浓缩完成后，启动第二栗12，使第二流动相18经由第二脱气装置14进入数控六通阀15 中；第二流动相18将该在线浓缩装置中浓缩后的含待测组分的流出馏分经所述数控六通阀 15的第九接口排出并输送到气相色谱分析装置20的进样口，进行气相色谱分析。待检测切 割馏分多于两个时，两个在线浓缩装置交替工作，一个在浓缩时另一个进行洗脱并向气相 色谱进样，如此交替进行，可以将液相色谱中按不同保留时间依次流出的各馏分依次捕集 浓缩并依次向气相色谱进样。
[0039] 其中，所述在线浓缩装置的工作原理如下:转动第一控制阀2使第一管道关闭且所 述溶剂排出管1与所述馏分收集仓6连通;转动第二控制阀8使待浓缩样品经第二管道进入 馏分收集仓6中，并使所述柱塞杆4向上移动，开启控温加热装置5和抽真空装置;等所述待 浓缩样品进样完成后，关闭第二控制阀8进行浓缩。在浓缩过程中，待浓缩样品中的溶剂经 所述溶剂排出管1排出，所述馏分收集仓6中样品体积减少，所述柱塞杆4向下移动。待样品 浓缩完成后，浓缩后样品储存在尾管7中，打开第一控制阀2和所述第二控制阀8使第二流动 相进入所述馏分收集仓6并带动浓缩后样品经由第二通道即可排出该在线浓缩装置。
[0040] 实施例2
[0041] 使用实施例1中的液相-气相二维色谱分析吸烟者血液中超低含量NNK和NNAL的方 法，包括样品前处理和仪器分析，具体包括如下步骤：
[0042] A:样品萃取:取血液样品50mL于IOOmL的试管中，加入含氘带NNK和NNAL内标(浓度 为50ng/L)的二氯甲烷IOmL;用高速匀浆机20000转/min漩涡震荡5min，静置分层后，取下层 清液(二氯甲烷层）1.OmU经0.25μπι滤头过滤后，得到待测样品，供下一步液相色谱分离用。
[0043] Β:仪器分析:在线液相-气相二维色谱装置结构示意图见图1，样品通过进样器164 进入高效液相色谱仪，由第一栗11输送第一流动相17经液相色谱柱162分离，所需要的馏分 (含NNK和NNAL的部位)通过数控十通阀15依次转入第一在线浓缩装置21和第二在线浓缩装 置22(图2)中，转移完后，切换数控十通阀15，让第一流动相废液从废液排出口排出；启动在 线浓缩装置的控温加热装置5加热，并抽真空排除溶剂，让液相色谱切入馏分在线浓缩到体 积小于200μΜ浓缩好后启动第二栗12输送第二流动相18把在线浓缩装置中的浓缩后馏分 输送到气相色谱预柱中，在气相色谱