包括使用本发明磁场发生装置进行磁 分离的步骤。
[0064] 通常，所述方法还包括使细胞与磁性材料孵育的步骤。
[0065] 可采用本发明磁场发生装置进行细胞分选的细胞可以是本领域已知的各种细胞， 优选是哺乳动物来源的细胞，更优选为人细胞。
[0066] 细胞包括但不限于外周血细胞、造血细胞、神经干细胞和肿瘤细胞，更具体而言， 包括但不限于红细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、外周血单核细胞或淋巴 细胞。
[0067] 可用于本发明的磁性材料可以是本领域已知的各种磁性材料，例如磁珠，只要这 类磁性材料可用于吸附细胞。
[0068] 对细胞与磁珠孵育的条件并无特殊限制，通常按本领域常规的孵育条件进行。
[0069] 除细胞分选之外，本发明的磁场发生装置还可以用于其它使用磁性材料结合并分 离的方法中。这类方法包括但不限于蛋白质（如抗体）、核酸的分离。例如，通常先使靶分 子（例如蛋白质、核酸）与磁性材料（例如磁珠）孵育，从而使靶分子连接到磁性材料上。 然后再使用本发明的磁场发生装置进行磁分离，分选出结合了靶分子的磁性材料。
[0070] 因此，本发明也提供一种靶分子分离的方法，所述方法包括使用本发明磁场发生 装置进行磁分离的步骤。如前所述，该方法还可包括使靶分子与磁性材料孵育的步骤。
[0071] 本发明的其他方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见 的。
[0072] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照国家标 准测定。若没有相应的国家标准，则按照通用的国际标准、常规条件、或按照制造厂商所建 议的条件进行。除非另外说明，否则所有的份数为重量份，所有的百分比为重量百分比。
[0073] 如无具体说明，本发明的各种原料均可以通过市售得到；或根据本领域的常规方 法制备得到。
[0074] 除非另有定义或说明，本文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术熟练人 员所熟悉的意义相同。此外任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明 方法中。
[0075] 实施例
[0076] 采用本发明的磁力分选装置、商品磁铁架和对照装置进行测试。商品磁铁架为奥 磁⑩多功能磁分离器MS-12,制造商（上海奥润微纳米材料科技有限公司）。对照装置的结 构与本发明的磁力分选装置相同，不同之处仅在于将该对照装置中磁极进行相应对调（即 相对面的磁极是NS)。具体分选步骤如下：
[0077] 1、取待分选混合细胞，2000转/分钟离心（rpm) 5分钟。初始细胞纯度通过流失细 胞仪检测，标记抗体为⑶3_PECy7。
[0078] 2、去掉上清，将细胞重悬，加入1毫升PBS混合充分。
[0079]3、2000rpm离心5分钟。
[0080] 4、去掉上清，将细胞重悬，加入800微升PBS混合充分。
[0081] 5、取20微升磁珠，磁分离。
[0082] 6、将步骤4中细胞加入步骤5中，重悬混合充分。
[0083] 7、将步骤6中的细胞放置于旋转混合仪室温结合1小时。
[0084] 8、磁分离。
[0085] 9、将步骤8中的磁珠用1毫升PBS重悬，洗涤细胞。
[0086] 10、磁分离。
[0087] 11、200 微升 PBS 重悬。
[0088] 12、流式细胞仪检测细胞纯度，标记抗体为⑶3-PECy 7。
[0089] 具体实验样品和参数如下表1所示：
[0090] 表 1
[0091]
[0092] 测试结果如下表2所示：
[0093] 表 2
[0094]
[0095] 此外，图15显示了采用对照装置进行细胞磁分离后的效果，图16显示了采用本发 明的磁力分选装置分选进行细胞磁分离的效果。从图15中可以看出，由于对照装置的磁极 排列导致磁力线分布不均，细胞在试管中分布非常不均匀。与之相反，如图16所示，采用本 发明磁力分选装置进行细胞磁分离时，细胞均匀地分布在试管内。这种均匀分布对之后的 洗脱非常有益。其效果已在表2中体现出来。
【主权项】
1. 一种磁场发生装置，该磁场发生装置包括： 磁力发生单元； 用于固定所述磁力发生单元的固定装置；和 放置于固定装置两端的磁力噪音消除组件； 其中，所述磁力发生单元由沿着同一轴心排列的四块磁力组件构成，并由固定装置固 定为两两相对，所述四块磁力组件合围，形成允许管道穿过的通道；且磁力发生单元中，相 对的两块磁力组件的相对面的磁极都为N极，而另两块相对的磁力组件的相对面都为S极。2. 如权利要求1所述的磁场发生装置，其特征在于，所述磁力组件为表面磁场强度为 0. 3 -IT的磁铁。3. 如权利要求1一2中任一项所述的磁场发生装置，其特征在于，所述固定装置由四个 组件组成，两两组合，分别在所述磁场发生装置的两端固定住四块磁力组件。4. 如权利要求3所述的磁场发生装置，其特征在于，固定装置中的所述组件设置为顶 部投影为"凸"形，正面投影为"凹"形，位于磁场发生装置一端的两个组件组装后，凸出部 与凹进部能相互嵌合；所述单元的凸出部设置有穿透孔和半圆形凹陷，所述穿透孔设置用 于容纳并固定磁力组件，所述半圆形凹陷设置用于在两个组件组装后形成允许管道穿过的 圆形通道。5. 如权利要求1一4中任一项所述的磁场发生装置，其特征在于，所述磁力噪音消除组 件设置成覆盖所述磁力发生单元及允许管道穿过。6. 一种磁场发生装置，包括： 固定组件505、506、507和508 ; 磁力组件509、510、511和512 ;和 磁力噪音消除组件503和504 ; 其中，固定组件505和506借助穿透孔固定磁力组件509和510,形成部件501，固定组 件507和508借助穿透孔固定磁力组件511和512,形成部件502 ; 部件501和502组装嵌合后，形成通道514 ; 磁力噪音消除组件503和504分别位于固定组件505与508以及506与507嵌合后形 成的部件的外侧，覆盖所有磁力组件，并具有允许管道通过的中空部分。7. 如权利要求6所述的磁场发生装置，其特征在于，所述磁场发生装置设置成部件501 和502组装嵌合后，四个磁力组件面向通道514的磁极依次是N、S、N和S。8. -种分选细胞或分离祀分子的方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1 一 6 中任一项所述的磁场发生装置进行磁分离的步骤。9. 如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括使细胞或靶分子与磁性材 料孵育的步骤。10. 如权利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述细胞选自外周血细胞、造血细胞、 神经干细胞和肿瘤细胞，所述靶分子选自蛋白质和核酸。
【专利摘要】本发明提供细胞磁珠流式分选装置。具体而言，本发明提供一种磁场发生装置，该磁场发生装置包括：磁力发生单元；用于固定所述磁力发生单元的固定装置；和放置于固定装置两端的磁力噪音消除组件；其中，所述磁力发生单元由沿着同一轴心排列的四块磁力组件构成，并由固定装置固定为两两相对，所述四块磁力组件合围，形成允许管道穿过的通道；且磁力组件中，相对的两块磁力组件的相对面的磁极都为N极，而另两块相对的磁力组件的相对面都为S极。本发明还提供一种基于本发明磁场发生装置分选细胞或分离靶分子的方法。采用本发明的装置和方法，可实现高效、可靠、高通量的细胞分选富集和靶分子的分离。
【IPC分类】C12N5/078, H01F7/02, C12N5/09, C12M1/42, C12N5/0797, C12N5/00
【公开号】CN105185504
【申请号】CN201510500417
【发明人】钱其军, 庞震国, 胡金伟, 孙紫盎, 吕功路, 颜开冬, 师传胤
【申请人】上海白泽医疗器械有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年8月14日